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海绵共栖细菌Pseudoalteromonas sp. NJ6-3-1中群体感应系统的研究

摘要第1-9页
Abstract第9-23页
第一章 绪论第23-55页
 1 海绵共栖微生物研究概述第23-28页
   ·海绵共栖微生物第23-24页
   ·海绵共栖微生物次级代谢产物的研究第24-26页
     ·含氮类化合物第24-25页
     ·聚酮类化合物第25页
     ·萜烯及甾体第25-26页
   ·海绵共栖微生物的化学防御机制第26-28页
     ·抵御病原微生物第26-27页
     ·抵御捕食者第27页
     ·竞争生存空间第27-28页
     ·抗附着物第28页
 2 细菌群体感应系统的研究概述第28-53页
   ·细菌群体感应现象的研究历史第29-30页
   ·群体感应信息系统及信号分子研究概述第30-45页
     ·细菌种内特异性的群体感应信息系统第30-38页
       ·G-中AHLs-LuxI / LuxR 介导的信息系统第30-35页
       ·G+中寡肽介导的信息系统第35-38页
     ·细菌种间的 LuxS/AI-2 介导的群体感应信息系统第38-41页
     ·其他群体感应信息系统及信号分子第41-44页
       ·AI-3/肾上腺素/去甲肾上腺素信息系统第41-42页
       ·其他群体感应信号分子第42-44页
     ·真菌中的群体感应系统第44-45页
       ·荚膜组织胞浆菌中的调节分子第44页
       ·白色念珠菌中的调节分子第44-45页
       ·酿酒酵母菌中的群体感应信号分子第45页
       ·其它真菌的调节分子第45页
   ·群体感应信号分子AHLs 检测方法研究第45-51页
     ·理化方法第46-49页
       ·高效液相色谱-质谱法第46-47页
       ·液相色谱结合四极杆串联线性离子阱质谱法第47页
       ·超高效液相色谱法第47-48页
       ·气相色谱-质谱法第48-49页
     ·生物学方法第49-50页
       ·平板划线法检测AHLs第49页
       ·报告平板法检测AHLs第49-50页
       ·β-半乳糖苷酶活性检测法检测AHLs第50页
     ·薄层层析法第50-51页
       ·基本原理第50页
       ·薄层层析-生物传感法检测 AHLs第50-51页
   ·海洋细菌中的群体感应现象第51-53页
 3 本文的创新点及研究意义第53-55页
   ·本文的创新点第53页
   ·本文的研究意义第53-55页
第二章 具有抗菌活性的海绵共栖细菌的筛选及鉴定第55-65页
 1 前言第55页
 2 实验部分第55-59页
   ·仪器与试剂第55-57页
     ·样品来源及药品、试剂第55-56页
     ·常用溶液与培养基第56页
     ·分子生物学试剂与引物第56页
     ·实验仪器与软件第56-57页
   ·海绵组织处理第57页
   ·海绵共栖细菌分离第57页
   ·粗提液制备第57-58页
   ·活性菌株筛选第58页
   ·活性共栖细菌分子鉴定第58-59页
     ·DNA 的提取第58-59页
     ·16S rRNA PCR 扩增第59页
     ·序列分析和系统发生学地位的确定第59页
 3 结果与讨论第59-64页
   ·海洋细菌的抗菌活性第59-64页
   ·具有活性的海绵共栖细菌系统发育学鉴定及系统发育树的构建第64页
 本章小结第64-65页
第三章 海绵共栖细菌 Pseudoalteromonas sp. NJ6-3-1 抗菌物质产生的密度依赖性第65-127页
 第一节 细菌 NJ6-3-1 抗菌物质的探明(1)第65-92页
  1 前言第65-66页
  2 实验材料和方法第66-71页
   ·实验菌株、仪器与试剂第66-67页
     ·实验菌株第66页
     ·实验试剂及培养基第66页
     ·实验仪器第66-67页
   ·菌株培养第67页
   ·细菌代谢产物的提取第67页
   ·细菌抗菌代谢产物的分离纯化第67-69页
     ·硅胶柱层析第67-68页
     ·TLC 薄板层析第68页
     ·高效液相色谱第68-69页
   ·细菌代谢产物的活性检测第69页
   ·化合物结构的表征与解析第69-71页
     ·HPLC/ESI TOF-MS 对化合物分子量的测定第69页
     ·HPLC/ESI/APCI-IT-MS 对化合物结构的分析第69-70页
     ·FT-IR 对化合物结构的分析第70页
     ·NMR 测定第70-71页
   ·化合物最低抑菌浓度 MIC 的测定第71页
     ·不同浓度测试样品的制备第71页
     ·化合物MIC 的测定第71页
  3 结果与讨论第71-92页
   ·细菌NJ6-3-1 代谢产物中抗菌化合物的分离纯化第71-78页
     ·TLC 分离纯化抗菌化合物第71-73页
     ·HPLC 分离纯化抗菌化合物第73-76页
     ·抗菌物质稳定性分析第76-78页
   ·细菌NJ6-3-1 代谢产物中抗菌化合物的结构解析第78-89页
     ·HPLC/ESI TOF-MS 解析抗菌化合物的分子量第78-81页
     ·HPLC/ESI/APCI IT-MS 解析抗菌化合物的结构第81-85页
     ·FT-IR 解析抗菌化合物的结构第85-86页
     ·NMR 解析抗菌化合物的结构第86-89页
   ·细菌NJ6-3-1 代谢产物中抗菌化合物MIC 的测定第89-92页
 第二节 细菌 NJ6-3-1 抗菌物质的探明(2)第92-112页
  1 前言第92页
  2 实验材料和方法第92-97页
   ·实验菌株、仪器与试剂第92-94页
     ·实验菌株第92-93页
     ·实验试剂及培养基第93页
     ·实验仪器第93-94页
   ·菌株培养第94页
   ·细菌代谢产物的提取第94页
   ·细菌抗菌代谢产物的分离纯化第94-95页
     ·硅胶柱层析第94页
     ·TLC 薄板层析第94页
     ·高效液相色谱第94-95页
   ·细菌代谢产物的活性检测第95页
   ·化合物结构的表征与解析第95-96页
     ·HPLC/ESI TOF-MS 对化合物分子量的测定第95页
     ·HPLC/ESI/IT-MS 对化合物结构的分析第95-96页
     ·FT-IR 对化合物结构的分析第96页
     ·元素分析测定第96页
     ·NMR 测定第96页
   ·化合物最低抑菌浓度MIC 的测定第96-97页
     ·不同浓度测试样品的制备第96页
     ·化合物MIC 的测定第96-97页
  3 结果与讨论第97-112页
   ·细菌NJ6-3-1 代谢产物中抗菌化合物的分离纯化第97-100页
     ·TLC 分离纯化抗菌化合物第97-98页
     ·HPLC 分离纯化抗菌化合物第98-100页
   ·细菌NJ6-3-1 代谢产物中抗菌化合物的结构解析第100-111页
     ·HPLC/ESI TOF-MS 解析抗菌化合物的分子量第100-103页
     ·HPLC/ESI IT-MS 解析抗菌化合物的结构第103-106页
     ·FT-IR 解析抗菌化合物的结构第106-107页
     ·元素分析解析抗菌化合物的结构第107页
     ·NMR 解析抗菌化合物的结构第107-111页
   ·细菌NJ6-3-1 代谢产物中抗菌化合物MIC 的测定第111-112页
 第三节 细菌 NJ6-3-1 抗菌物质产生的密度依赖性第112-126页
  1 前言第112页
  2 实验部分第112-117页
   ·实验菌株、仪器与试剂第112-113页
     ·实验菌株第112页
     ·实验试剂第112-113页
     ·实验仪器第113页
     ·培养基配制第113页
   ·细菌NJ6-3-1 的培养第113-114页
   ·细菌NJ6-3-1 细胞密度的测定第114页
   ·细菌NJ6-3-1 代谢产物的提取第114页
   ·HPLC 分离条件的确定第114-115页
   ·细菌NJ6-3-1 培养液中抗菌物质含量的测定第115页
   ·细菌NJ6-3-1 培养液中抗菌物质的质谱鉴定第115-116页
   ·细菌NJ6-3-1 培养液的抗菌活性检测第116-117页
  3 结果与讨论第117-126页
   ·细菌NJ6-3-1 细胞密度的测定第117页
   ·细菌NJ6-3-1 抗菌物质的测定第117-120页
   ·细菌NJ6-3-1 抗菌物质含量与细胞密度的关系第120-121页
   ·细菌NJ6-3-1 代谢产物中抗菌物质的结构解析第121-125页
   ·细菌NJ6-3-1 代谢产物的抗菌活性检测第125-126页
 本章小结第126-127页
第四章 海绵共栖细菌 Pseudoalteromonas sp. NJ6-3-1 中 AHLs 信号分子的探明第127-150页
 第一节 细菌 NJ6-3-1 产生 AHLs 的情况第127-141页
  1 前言第127-128页
  2 实验材料和方法第128-131页
   ·实验材料第128-130页
     ·实验菌株与培养条件第128页
     ·实验药品及试剂第128-129页
     ·实验仪器第129页
     ·培养基及溶液配制第129-130页
   ·细菌 NJ6-3-1 代谢产物粗提液的制备第130页
   ·平行划线法检测AHLs第130页
   ·报告平板打孔法检测AHLs第130页
   ·GC-MS 法检测AHLs第130-131页
     ·样品制备第130页
     ·GC-MS 检测条件第130-131页
  3 结果与讨论第131-141页
   ·平行划线法检测细菌NJ6-3-1 中的AHLs第131-133页
   ·报告平板打孔法检测细菌NJ6-3-1 中的AHLs第133-138页
   ·GC-MS 法检测细菌NJ6-3-1 中的AHLs第138-141页
 第二节 外源 AHLs 对细菌 NJ6-3-1 抗菌物质的诱导作用第141-149页
  1 前言第141-142页
  2 材料与方法第142-144页
   ·实验试剂和仪器第142页
   ·实验所用菌株第142页
   ·自诱导实验第142-144页
     ·菌株培养第142-143页
     ·AHLs 的配制第143页
     ·自诱导物质的添加第143页
     ·细菌NJ6-3-1 代谢产物粗提液的制备第143页
     ·细菌NJ6-3-1 代谢产物粗提液的活性检测第143页
     ·细菌NJ6-3-1 代谢产物粗提液的HPLC 检测第143-144页
  3 结果与讨论第144-149页
   ·生物自显影法检测AHLs 诱导作用第144-146页
   ·HPLC 法检测AHLs 自诱导作用第146-149页
 本章小结第149-150页
第五章 海绵共栖细菌 Pseudoalteromonas sp. NJ6-3-1 中 DKPs 信号分子的探明第150-166页
 1 前言第150-152页
 2 材料与方法第152-154页
   ·实验试剂和仪器第152-153页
   ·实验所用菌株第153页
   ·自诱导实验第153-154页
     ·菌株培养第153页
     ·DKPs 的配制第153页
     ·诱导物质的添加第153页
     ·细菌NJ6-3-1 代谢产物的提取第153-154页
     ·细菌NJ6-3-1 代谢产物粗提液的活性检测第154页
   ·细菌NJ6-3-1 的发酵第154页
   ·发酵液中代谢产物的提取分离第154页
 3 结果与讨论第154-165页
   ·DKPs 诱导细菌NJ6-3-1 产生抗菌活性第154-156页
   ·细菌NJ6-3-1 代谢产物中DKPs 化合物结构鉴定第156-163页
   ·讨论第163-165页
 本章小结第165-166页
第六章 海绵共栖细菌 Pseudoalteromonas sp. NJ6-3-1 群体感应系统的分子基础初步研究第166-171页
 1 前言第166-167页
 2 实验部分第167-169页
   ·仪器与试剂第167页
     ·样品来源及药品、试剂第167页
     ·常用溶液与培养基第167页
   海绵共栖细菌Pseudoalteromonas sp.NJ6-3-1 中群体感应系统的研究第167页
   ·细菌NJ6-3-1 基因组DNA 的制备第167-168页
   ·基因组DNA 片段的破碎及测序接头的链接第168页
   ·上机测序第168页
   ·测序结果分析及部分基因注释第168-169页
 3 结果与讨论第169-170页
   ·高分子量的细菌NJ6-3-1 基因组DNA 的制备第169页
   ·DNA 片段选择第169页
   ·测序拼装结果第169-170页
   ·luxR 基因片段的获得第170页
 本章小结第170-171页
第七章 结论与创新点第171-173页
参考文献第173-190页
附录第190-208页
缩略语注释第208-212页
致谢第212-214页
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果第214-216页

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