| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| 1.1 川金丝猴研究现状 | 第11-13页 |
| 1.1.1 金丝猴生存压力 | 第11-12页 |
| 1.1.2 金丝猴的保护 | 第12-13页 |
| 1.2 小分子诱导细胞 | 第13-20页 |
| 1.2.1 Tranylcypromine | 第14-15页 |
| 1.2.2 FSK | 第15页 |
| 1.2.3 Chir99021 | 第15-16页 |
| 1.2.4 VPA作用机理 | 第16-17页 |
| 1.2.5 RepSox作用机理 | 第17-18页 |
| 1.2.6 AM580作用机理 | 第18-19页 |
| 1.2.7 EPZ004777作用机理 | 第19-20页 |
| 1.3 组织提取液诱导细胞分化 | 第20-21页 |
| 1.4 生殖细胞发育来源 | 第21-22页 |
| 1.5 本实验的研究意义与实验内容 | 第22-23页 |
| 第二章 金丝猴成纤维细胞的分离和培养 | 第23-30页 |
| 2.1 细胞 | 第23页 |
| 2.2 仪器和耗材 | 第23页 |
| 2.3 试剂 | 第23页 |
| 2.4 试剂配制 | 第23-24页 |
| 2.4.1 消化液配制 | 第23页 |
| 2.4.2 川金丝猴皮肤成纤维细胞培养基的配制 | 第23页 |
| 2.4.3 冻存液的配制 | 第23-24页 |
| 2.4.4 PBS的配制 | 第24页 |
| 2.4.5 双抗的配制(100×) | 第24页 |
| 2.5 方法 | 第24-27页 |
| 2.5.1 川金丝猴成纤维细胞的分离 | 第24页 |
| 2.5.2 川金丝猴皮肤成纤维的传代 | 第24-25页 |
| 2.5.3 川金丝猴皮肤成纤维细胞的冻存与复苏 | 第25-26页 |
| 2.5.4 川金丝猴皮肤成纤维细胞的活力测定 | 第26页 |
| 2.5.5 数据统计 | 第26-27页 |
| 2.6 结果 | 第27-29页 |
| 2.6.1 川金丝猴皮肤成纤维细胞的形态学观察 | 第27页 |
| 2.6.2 川金丝猴皮肤成纤维细胞细胞活力测定 | 第27-29页 |
| 2.7 讨论和小结 | 第29-30页 |
| 第三章 金丝猴皮肤成纤维细胞特征化 | 第30-37页 |
| 3.1 细胞 | 第30页 |
| 3.2 仪器和耗材 | 第30页 |
| 3.3 试剂 | 第30页 |
| 3.4 相关试剂的配制方法 | 第30-31页 |
| 3.4.1 1L 50×TAE的配制 | 第30页 |
| 3.4.2 1L 4%多聚甲醛 | 第30页 |
| 3.4.3 1LPBS的配制 | 第30页 |
| 3.4.4 50ml川金丝猴皮肤成纤维细胞培养基的配制 | 第30-31页 |
| 3.5 方法 | 第31-33页 |
| 3.5.1 川金丝猴皮肤成纤维细胞总RNA的提取以及PCR | 第31-32页 |
| 3.5.3 流式细胞仪检测川金丝猴皮肤成纤维细胞表面分子标记 | 第32-33页 |
| 3.6 结果 | 第33-36页 |
| 3.6.1 川金丝猴皮肤成纤维细胞基因表达 | 第33页 |
| 3.6.2 川金丝猴皮肤成纤维细胞表面分子标记特征测定 | 第33-36页 |
| 3.7 讨论和小结 | 第36-37页 |
| 第四章 川金丝猴皮肤成纤维细胞向胚外内胚层谱系细胞诱导 | 第37-46页 |
| 4.1 细胞 | 第37页 |
| 4.2 仪器和耗材 | 第37页 |
| 4.3 试剂 | 第37页 |
| 4.4 相关试剂的配制方法 | 第37页 |
| 4.4.1 小分子溶液的配制 | 第37页 |
| 4.4.2 1LPBS的配制 | 第37页 |
| 4.4.3 50ml川金丝猴皮肤成纤维细胞培养液的配制 | 第37页 |
| 4.5 方法 | 第37-39页 |
| 4.5.1 小分子诱导川金丝猴皮肤成纤维细胞 | 第37-38页 |
| 4.5.2 PCR以及qPCR检测川金丝猴皮肤成纤维细胞经诱导后基因表达 | 第38-39页 |
| 4.6 结果 | 第39-44页 |
| 4.6.1 川金丝猴皮肤成纤维细胞经小分子诱导后的细胞形态观察 | 第39-40页 |
| 4.6.2 PCR检测川金丝猴皮肤成纤维细胞经诱导后的基因表达 | 第40-42页 |
| 4.6.3 qPCR检测川金丝猴皮肤成纤维细胞经诱导后的基因表达 | 第42-44页 |
| 4.7 讨论与小结 | 第44-46页 |
| 第五章 小分子诱导后的细胞向生殖谱系细胞的诱导及检测 | 第46-53页 |
| 5.1 动物以及细胞 | 第46页 |
| 5.2 仪器和耗材 | 第46页 |
| 5.3 试剂 | 第46页 |
| 5.4 相关试剂的配制方法 | 第46-47页 |
| 5.4.1 组织提取液的配制 | 第46页 |
| 5.4.2 1LPBS的配制 | 第46页 |
| 5.4.3 50ml川金丝猴皮肤成纤维细胞培养液的配制 | 第46-47页 |
| 5.5 方法 | 第47页 |
| 5.5.1 组织提取液诱导川金丝猴皮肤成纤维细胞 | 第47页 |
| 5.5.2 PCR以及qPCR检测川金丝猴皮肤成纤维细胞经小分子以及小鼠睾丸组织提取液诱导后基因表达 | 第47页 |
| 5.6 结果 | 第47-51页 |
| 5.6.1 经小分子诱导后再用小鼠睾丸组织提取液诱导的细胞形态观察 | 第47-49页 |
| 5.6.2 PCR检测小分子诱导后再用小鼠睾丸组织提取液诱导的细胞基因水平 | 第49-51页 |
| 5.6.3 qPCR检测小分子诱导后再用小鼠睾丸组织提取液诱导的细胞基因水平 | 第51页 |
| 5.7 讨论与小结 | 第51-53页 |
| 结论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-64页 |
| 附录 | 第64-72页 |
| 攻读硕士期间取得的科研成果 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
