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鸡传染性贫血病毒Nested-PCR检测方法的建立以及不同CIAV母源抗体水平对鸡群保护率的影响

中文摘要第9-11页
Abstract第11-13页
1 前言第14-24页
    1.1 鸡传染性贫血病毒(CIAV)病原学第14-18页
        1.1.1 CIAV的发现及分类第14-15页
        1.1.2 CIAV的形态学结构和理化特性第15页
        1.1.3 CIAV的基因组结构及特性第15-18页
    1.2 鸡传染性贫血病毒(CIAV)流行病学第18-19页
        1.2.1 发生与分布第18页
        1.2.2 易感动物第18-19页
        1.2.3 细胞体外培养第19页
    1.3 鸡传染性贫血病毒(CIAV)发病机理第19-20页
    1.4 鸡传染性贫血病毒(CIAV)病理变化第20页
    1.5 CIAV疫苗研究进展第20-21页
    1.6 CIAV的诊断技术第21-24页
        1.6.1 临床诊断第21页
        1.6.2 病理解剖第21-22页
        1.6.3 病原学诊断第22-23页
        1.6.4 血清学诊断第23页
        1.6.5 分子生物学检测第23-24页
2 材料与方法第24-36页
    2.1 材料第24-25页
        2.1.1 毒株第24页
        2.1.2 试验动物与饲养设施第24页
        2.1.3 疫苗第24页
        2.1.4 主要试剂和仪器第24-25页
            2.1.4.1 主要试剂第24页
            2.1.4.2 主要仪器第24-25页
        2.1.5 其他试剂的配制第25页
    2.2 方法第25-36页
        2.2.1 Nested-PCR反应体系的建立和优化第25-30页
            2.2.1.1 引物设计与合成第25-26页
            2.2.1.2 毒株的增殖与定量第26页
            2.2.1.3 病毒核酸的提取与PCR扩增第26-27页
            2.2.1.4 PCR产物的回收及纯化第27-28页
            2.2.1.5 回收产物的连接第28页
            2.2.1.6 DH5α大肠杆菌感受态细胞的制备第28页
            2.2.1.7 连接产物的转化第28-29页
            2.2.1.8 质粒的提取第29页
            2.2.1.9 Nested-PCR反应体系的建立第29页
            2.2.1.10 Nested-PCR反应引物浓度的优化第29-30页
            2.2.1.11 Nested-PCR反应退火温度的优化第30页
            2.2.1.12 Nested-PCR反应敏感性试验第30页
            2.2.1.13 Nested-PCR反应特异性试验第30页
            2.2.1.14 Nested-PCR反应检测弱毒疫苗中CIAV污染第30页
        2.2.2 不同方法在检测弱毒疫苗中CIAV污染时的比较第30-33页
            2.2.2.1 TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法第30-31页
            2.2.2.2 核酸斑点杂交检测方法第31-33页
            2.2.2.3 不同检测方法检测企业送检疫苗及病料第33页
        2.2.3 不同CIAV母源抗体水平对鸡群保护率的影响第33-36页
            2.2.3.1 鸡群不同鸡只抗体滴度水平的检测第33-34页
            2.2.3.2 分组与攻毒第34-35页
            2.2.3.3 不同母源抗体滴度下不同攻毒剂量鸡体重的检测第35页
            2.2.3.4 不同母源抗体滴度下不同攻毒剂量雏鸡红细胞数目检测第35页
            2.2.3.5 不同母源抗体滴度下不同攻毒剂量鸡核酸阳性率的检测第35页
            2.2.3.6 不同母源抗体滴度下不同攻毒剂量鸡抗体滴度的检测第35页
            2.2.3.7 不同母源抗体滴度下不同攻毒剂量鸡免疫器官指数的检测第35-36页
3 结果与分析第36-45页
    3.1 鸡传染性贫血病毒Nested-PCR方法第36-41页
        3.1.1 Nested-PCR反应引物浓度的优化结果第36页
        3.1.2 Nested-PCR反应退火温度的优化结果第36-37页
        3.1.3 Nested-PCR反应优化体系的确立第37页
        3.1.4 Nested-PCR反应敏感性试验结果第37页
        3.1.5 Nested-PCR反应特异性试验结果第37-38页
        3.1.6 Nested-PCR反应在检测弱毒疫苗中CIAV污染中的应用结果第38-39页
        3.1.7 不同方法在检测弱毒疫苗中CIAV污染时的比较结果第39-41页
            3.1.7.1 TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法第39页
            3.1.7.2 核酸斑点杂交检测方法第39页
            3.1.7.3 不同检测方法检测企业送检疫苗及病料结果第39-41页
    3.2 不同CIAV母源抗体水平对鸡群保护率的影响结果第41-45页
        3.2.1 不同母源抗体滴度下不同攻毒剂量对鸡体重的影响第41-42页
        3.2.2 不同母源抗体滴度下不同攻毒剂量对鸡红细胞数目的影响第42页
        3.2.3 不同母源抗体滴度下不同攻毒剂量对鸡核酸阳性率的影响第42-43页
        3.2.4 不同母源抗体滴度下不同攻毒剂量对鸡CIAV抗体滴度的影响第43页
        3.2.5 不同母源抗体滴度下不同攻毒剂量对鸡免疫器官指数的影响第43-45页
4 讨论第45-49页
    4.1 鸡传染性贫血病毒Nested-PCR检测方法的建立及应用第45-46页
    4.2 不同CIAV母源抗体水平对鸡群保护率的影响第46-49页
5 结论第49-50页
参考文献第50-56页
致谢第56-57页
硕士期间发表论文的论文第57页

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