中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
1 前言 | 第14-24页 |
1.1 鸡传染性贫血病毒(CIAV)病原学 | 第14-18页 |
1.1.1 CIAV的发现及分类 | 第14-15页 |
1.1.2 CIAV的形态学结构和理化特性 | 第15页 |
1.1.3 CIAV的基因组结构及特性 | 第15-18页 |
1.2 鸡传染性贫血病毒(CIAV)流行病学 | 第18-19页 |
1.2.1 发生与分布 | 第18页 |
1.2.2 易感动物 | 第18-19页 |
1.2.3 细胞体外培养 | 第19页 |
1.3 鸡传染性贫血病毒(CIAV)发病机理 | 第19-20页 |
1.4 鸡传染性贫血病毒(CIAV)病理变化 | 第20页 |
1.5 CIAV疫苗研究进展 | 第20-21页 |
1.6 CIAV的诊断技术 | 第21-24页 |
1.6.1 临床诊断 | 第21页 |
1.6.2 病理解剖 | 第21-22页 |
1.6.3 病原学诊断 | 第22-23页 |
1.6.4 血清学诊断 | 第23页 |
1.6.5 分子生物学检测 | 第23-24页 |
2 材料与方法 | 第24-36页 |
2.1 材料 | 第24-25页 |
2.1.1 毒株 | 第24页 |
2.1.2 试验动物与饲养设施 | 第24页 |
2.1.3 疫苗 | 第24页 |
2.1.4 主要试剂和仪器 | 第24-25页 |
2.1.4.1 主要试剂 | 第24页 |
2.1.4.2 主要仪器 | 第24-25页 |
2.1.5 其他试剂的配制 | 第25页 |
2.2 方法 | 第25-36页 |
2.2.1 Nested-PCR反应体系的建立和优化 | 第25-30页 |
2.2.1.1 引物设计与合成 | 第25-26页 |
2.2.1.2 毒株的增殖与定量 | 第26页 |
2.2.1.3 病毒核酸的提取与PCR扩增 | 第26-27页 |
2.2.1.4 PCR产物的回收及纯化 | 第27-28页 |
2.2.1.5 回收产物的连接 | 第28页 |
2.2.1.6 DH5α大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第28页 |
2.2.1.7 连接产物的转化 | 第28-29页 |
2.2.1.8 质粒的提取 | 第29页 |
2.2.1.9 Nested-PCR反应体系的建立 | 第29页 |
2.2.1.10 Nested-PCR反应引物浓度的优化 | 第29-30页 |
2.2.1.11 Nested-PCR反应退火温度的优化 | 第30页 |
2.2.1.12 Nested-PCR反应敏感性试验 | 第30页 |
2.2.1.13 Nested-PCR反应特异性试验 | 第30页 |
2.2.1.14 Nested-PCR反应检测弱毒疫苗中CIAV污染 | 第30页 |
2.2.2 不同方法在检测弱毒疫苗中CIAV污染时的比较 | 第30-33页 |
2.2.2.1 TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法 | 第30-31页 |
2.2.2.2 核酸斑点杂交检测方法 | 第31-33页 |
2.2.2.3 不同检测方法检测企业送检疫苗及病料 | 第33页 |
2.2.3 不同CIAV母源抗体水平对鸡群保护率的影响 | 第33-36页 |
2.2.3.1 鸡群不同鸡只抗体滴度水平的检测 | 第33-34页 |
2.2.3.2 分组与攻毒 | 第34-35页 |
2.2.3.3 不同母源抗体滴度下不同攻毒剂量鸡体重的检测 | 第35页 |
2.2.3.4 不同母源抗体滴度下不同攻毒剂量雏鸡红细胞数目检测 | 第35页 |
2.2.3.5 不同母源抗体滴度下不同攻毒剂量鸡核酸阳性率的检测 | 第35页 |
2.2.3.6 不同母源抗体滴度下不同攻毒剂量鸡抗体滴度的检测 | 第35页 |
2.2.3.7 不同母源抗体滴度下不同攻毒剂量鸡免疫器官指数的检测 | 第35-36页 |
3 结果与分析 | 第36-45页 |
3.1 鸡传染性贫血病毒Nested-PCR方法 | 第36-41页 |
3.1.1 Nested-PCR反应引物浓度的优化结果 | 第36页 |
3.1.2 Nested-PCR反应退火温度的优化结果 | 第36-37页 |
3.1.3 Nested-PCR反应优化体系的确立 | 第37页 |
3.1.4 Nested-PCR反应敏感性试验结果 | 第37页 |
3.1.5 Nested-PCR反应特异性试验结果 | 第37-38页 |
3.1.6 Nested-PCR反应在检测弱毒疫苗中CIAV污染中的应用结果 | 第38-39页 |
3.1.7 不同方法在检测弱毒疫苗中CIAV污染时的比较结果 | 第39-41页 |
3.1.7.1 TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法 | 第39页 |
3.1.7.2 核酸斑点杂交检测方法 | 第39页 |
3.1.7.3 不同检测方法检测企业送检疫苗及病料结果 | 第39-41页 |
3.2 不同CIAV母源抗体水平对鸡群保护率的影响结果 | 第41-45页 |
3.2.1 不同母源抗体滴度下不同攻毒剂量对鸡体重的影响 | 第41-42页 |
3.2.2 不同母源抗体滴度下不同攻毒剂量对鸡红细胞数目的影响 | 第42页 |
3.2.3 不同母源抗体滴度下不同攻毒剂量对鸡核酸阳性率的影响 | 第42-43页 |
3.2.4 不同母源抗体滴度下不同攻毒剂量对鸡CIAV抗体滴度的影响 | 第43页 |
3.2.5 不同母源抗体滴度下不同攻毒剂量对鸡免疫器官指数的影响 | 第43-45页 |
4 讨论 | 第45-49页 |
4.1 鸡传染性贫血病毒Nested-PCR检测方法的建立及应用 | 第45-46页 |
4.2 不同CIAV母源抗体水平对鸡群保护率的影响 | 第46-49页 |
5 结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
硕士期间发表论文的论文 | 第57页 |