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水貂源伪狂犬病毒DL14/08株的分离鉴定及免疫原性研究

摘要第6-7页
abstract第7-8页
英文缩略表第14-15页
第一章 引言第15-22页
    1.1 伪狂犬病毒概述第15-16页
        1.1.1 伪狂犬病毒病原学第15-16页
    1.2 伪狂犬病PR的流行情况第16-18页
        1.2.1 PR国外流行情况第16-17页
        1.2.2 PR国内流行情况第17页
        1.2.3 PR在毛皮动物中的流行情况第17-18页
    1.3 PRV相关检测方法研究进展第18-19页
        1.3.1 血清学检测方法第18页
        1.3.2 分子生物学检测方法第18-19页
        1.3.3 PRV检测方法在毛皮动物上的应用第19页
    1.4 PR疫苗研究进展第19-21页
        1.4.1 PR传统疫苗第19-20页
        1.4.2 PRV基因缺失苗第20-21页
        1.4.3 毛皮动物源PR疫苗第21页
    1.5 本研究的目的和意义第21-22页
第二章 貂源伪狂犬病毒DL14/08 株分离鉴定第22-41页
    2.1 材料与方法第23-25页
        2.1.1 细胞、毒株及实验动物第23页
        2.1.2 主要试剂和仪器第23页
        2.1.3 病料的收集与处理第23页
        2.1.4 引物设计与合成第23页
        2.1.5 病毒核酸提取与PCR第23-24页
        2.1.6 病毒的分离与纯化第24页
        2.1.7 病毒IFA鉴定第24页
        2.1.8 病毒形态电镜观察第24页
        2.1.9 病毒的滴度测定及生长曲线绘制第24-25页
        2.1.10 动物回归实验第25页
        2.1.11 病毒的全基因组测序及序列分析第25页
    2.2 结果第25-38页
        2.2.1 病毒的分离结果第25-26页
        2.2.2 病毒的PCR鉴定第26-27页
        2.2.3 间接免疫荧光实验结果第27页
        2.2.4 病毒粒子的形态观察第27-28页
        2.2.5 病毒滴度的测定第28页
        2.2.6 动物回归实验第28-30页
        2.2.7 全基因组序列测定结果第30-38页
    2.3 讨论第38-39页
        2.3.1 DL14/08 株毒株的分离第38-39页
        2.3.2 DL14/08 株毒株的毒力第39页
        2.3.3 DL14/08 全基因组测序分析与gC基因分析第39页
    2.4 本章小结第39-41页
第三章 貂源伪狂犬病灭活抗原的制备及检验第41-48页
    3.1 材料与方法第41-43页
        3.1.1 细胞、毒株及实验动物第41页
        3.1.2 主要实验试剂和仪器第41-42页
        3.1.3 DL14/08 毒株的增殖与滴度测定第42页
        3.1.4 PRV- DL 14/08 对家兔LD50测定第42页
        3.1.5 PRV- DL 14/08 对水貂LD50测定第42页
        3.1.6 水貂源PRV氢氧化铝佐剂灭活抗原的制备第42页
        3.1.7 灭活抗原的无菌检验第42-43页
        3.1.8 抗原的灭活检验第43页
        3.1.9 抗原的安全检验第43页
        3.1.10 灭活抗原效力检验第43页
        3.1.11 甲醛含量测定第43页
    3.2 结果第43-46页
        3.2.0 病毒增殖与TCID50测定结果第43页
        3.2.1 PRV-DL 14/08 株对家兔LD50测定结果第43-44页
        3.2.2 PRV-DL 14/08 对水貂LD50测定结果第44页
        3.2.3 灭活抗原物理性状观察第44页
        3.2.4 灭活抗原的无菌检验结果第44-45页
        3.2.5 抗原灭活检验结果第45页
        3.2.6 抗原的安全性检验结果第45页
        3.2.7 灭活抗原效力检验结果第45页
        3.2.8 甲醛含量测定结果第45-46页
    3.3 讨论第46-47页
        3.3.1 DL14/08 株毒种的选择第46页
        3.3.2 灭活疫苗的优势第46页
        3.3.3 利用甲醛灭活第46-47页
        3.3.4 佐剂对灭活抗原免疫原性的影响第47页
    3.4 本章小结第47-48页
第四章 DL14/08 株灭活抗原免疫原性与保护效果研究第48-60页
    4.1 材料和方法第48-50页
        4.1.1 实验动物和毒株第48页
        4.1.2 主要实验试剂及仪器第48页
        4.1.3 灭活抗原对家兔最小免疫剂量(MID)测定第48-49页
        4.1.4 灭活抗原对水貂最小免疫剂量(MID)测定第49页
        4.1.5 水貂PR灭活抗原和参照疫苗对家兔免疫效力测定第49页
        4.1.6 水貂PR灭活抗原和参照疫苗对水貂免疫效力测定第49页
        4.1.7 攻毒后水貂病理组织学检测第49页
        4.1.8 灭活抗原和参照疫苗免疫水貂中和抗体比较第49-50页
        4.1.9 免疫攻毒后动物排毒情况测定第50页
    4.2 结果第50-58页
        4.2.1 灭活抗原对家兔最小免疫剂量(MID)测定结果第50页
        4.2.2 灭活抗原对水貂最小免疫剂量(MID)测定结果第50-51页
        4.2.3 灭活抗原与商品化疫苗对家兔免疫效力测定结果第51-52页
        4.2.4 灭活抗原与商品化疫苗对水貂免疫效力测定结果第52页
        4.2.6 攻毒后不同组别水貂情况比较结果第52-53页
        4.2.7 水貂攻毒后组织器官病变特征第53-55页
        4.2.8 攻毒后水貂病理组织学检测结果第55-56页
        4.2.9 灭活疫抗原免疫水貂中和抗体水平检测结果第56-57页
        4.2.10 免疫攻毒后水貂排毒情况测定结果第57-58页
    4.3 讨论第58-59页
        4.3.1 DL14/08 株具有良好的免疫原性第58页
        4.3.2 DL14/08 株制备灭活抗原与商品化疫苗比较分析第58-59页
    4.4 本章小结第59-60页
第五章 全文结论第60-61页
参考文献第61-66页
附录 实验所用仪器汇总第66-67页
致谢第67-68页
作者简历第68页

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