中文摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-13页 |
第一章 前言 | 第14-22页 |
1. 飞蝗概况 | 第14页 |
2. 海藻糖的研究背景及进展 | 第14-17页 |
2.1 海藻糖概述 | 第14页 |
2.2 海藻糖的能源贮存功能 | 第14-15页 |
2.3 海藻糖的生物保护功能 | 第15-16页 |
2.4 海藻糖是昆虫几丁质合成的重要物质 | 第16-17页 |
3. 海藻糖酶的研究背景及进展 | 第17-19页 |
3.1 海藻糖酶基因的研究进展 | 第18页 |
3.2 海藻糖酶相对分子量 | 第18页 |
3.3 海藻糖酶最适pH值和温度 | 第18-19页 |
3.4 海藻糖酶的底物特异性 | 第19页 |
3.5 海藻糖酶在昆虫细胞中的定位 | 第19页 |
4. 本研究的内容及意义 | 第19-20页 |
5. 技术路线图 | 第20-22页 |
第二章 飞蝗海藻糖酶的基因检索及特征分析 | 第22-30页 |
1. 海藻糖酶基因特征分析工具与方法 | 第22-23页 |
1.1 海藻糖酶基因cDNA序列的搜索 | 第22页 |
1.2 海藻糖酶基因序列特征的预测 | 第22页 |
1.3 海藻糖酶基因的氨基酸比对及系统进化树分析 | 第22-23页 |
2. 实验结果 | 第23-27页 |
2.1 飞蝗海藻糖酶基因cDNA序列的获得及特征分析 | 第23-25页 |
2.2 飞蝗海藻糖酶氨基酸比对结果 | 第25页 |
2.3 海藻糖酶系统进化树分析 | 第25-27页 |
3. 讨论 | 第27-30页 |
第三章 飞蝗海藻糖酶基因的组织和发育表达特性 | 第30-38页 |
1. 实验材料 | 第30页 |
1.1 供试昆虫 | 第30页 |
1.2 供试药品及主要仪器 | 第30页 |
2. 实验方法 | 第30-33页 |
2.1 内参基因的选择和引物设计 | 第30-31页 |
2.2 总RNA提取及cDNA合成 | 第31-32页 |
2.3 实时荧光定量PCR | 第32-33页 |
2.4 数据处理与分析 | 第33页 |
3. 结果与分析 | 第33-36页 |
3.1 内参基因的geNorm分析结果 | 第33页 |
3.2 内参基因的NormFinder分析结果 | 第33-34页 |
3.3 飞蝗不同组织部位海藻糖酶基因的mRNA表达特性 | 第34-35页 |
3.4 飞蝗不同天数海藻糖酶基因表达特性 | 第35-36页 |
4. 讨论 | 第36-38页 |
第四章 飞蝗海藻糖酶的酶活特性分析 | 第38-44页 |
1. 实验材料 | 第38页 |
1.1 供试昆虫 | 第38页 |
1.2 供试药品与主要仪器 | 第38页 |
2. 实验方法 | 第38-40页 |
2.1 酶液制备 | 第38页 |
2.2 标准曲线的绘制 | 第38-39页 |
2.3 海藻醣酶活性的测定 | 第39页 |
2.4 数据处理 | 第39-40页 |
3. 结果与分析 | 第40-42页 |
4. 讨论 | 第42-44页 |
第五章 飞蝗海藻糖酶基因的功能分析 | 第44-50页 |
1. 实验材料 | 第44页 |
1.1 供试昆虫 | 第44页 |
1.2 供试药品及主要仪器 | 第44页 |
2. 实验方法 | 第44-46页 |
2.1 飞蝗海藻糖酶基因dsRNA引物的设计 | 第44-45页 |
2.2 飞蝗海藻糖酶基因dsRNA的体外合成 | 第45页 |
2.3 飞蝗海藻糖酶dsRNA的体外注射 | 第45-46页 |
2.4 RNA干扰效果的观察与检测 | 第46页 |
3. 结果与分析 | 第46-49页 |
3.1 海藻糖酶基因dsRNA干扰区域的序列比对 | 第46-48页 |
3.2 RNA干扰表型效果的观察 | 第48页 |
3.3 实时定量PCR检测各基因RNA干扰效率 | 第48-49页 |
4. 讨论 | 第49-50页 |
全文总结 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-56页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第56-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
个人简况及联系方式 | 第58-60页 |