| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 TaCAMTA4 在小麦与叶锈菌互作过程中的功能研究 | 第11-31页 |
| 1 引言 | 第11-13页 |
| 2 材料与方法 | 第13-22页 |
| 2.1 植物材料与菌株 | 第13页 |
| 2.2 主要仪器设备与试剂 | 第13-14页 |
| 2.2.1 主要仪器设备 | 第13页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第13页 |
| 2.2.3 试验所需药物的配制 | 第13-14页 |
| 2.2.4 试验所需培养基的配制 | 第14页 |
| 2.3 植物材料的培养和叶锈菌的繁殖 | 第14页 |
| 2.4 BSMV载体构建 | 第14-18页 |
| 2.4.1 PCR扩增TaCAMTA4 基因片段 | 第14-15页 |
| 2.4.2 PCR产物的回收 | 第15-16页 |
| 2.4.3 PCR产物与载体的连接 | 第16页 |
| 2.4.4 连接产物转化大肠杆菌E.coli DH5α 的感受态细胞 | 第16页 |
| 2.4.5 重组质粒的筛选与鉴定 | 第16页 |
| 2.4.6 TaCAMTA4 基因片段与pSL038-1 载体的连接与转化 | 第16-17页 |
| 2.4.7 BSMV载体的酶切验证 | 第17-18页 |
| 2.5 BSMV的体外转录与转染 | 第18-19页 |
| 2.5.1 质粒提取 | 第18页 |
| 2.5.2 质粒的酶切线性化 | 第18页 |
| 2.5.3 线性化质粒的纯化 | 第18页 |
| 2.5.4 体外转录与转染 | 第18-19页 |
| 2.6 VIGS试验条件的优化 | 第19页 |
| 2.7 基因沉默后的沉默效率检测 | 第19-21页 |
| 2.7.1 叶片的收集与RNA的提取 | 第19-20页 |
| 2.7.2 半定量PCR检测基因沉默效率 | 第20-21页 |
| 2.8 叶锈菌的接种与观察 | 第21-22页 |
| 2.8.1 叶锈菌的接种 | 第21页 |
| 2.8.2 接种叶片的荧光染色与观察 | 第21-22页 |
| 3 结果与分析 | 第22-29页 |
| 3.1 TaCAMTA4 基因片段的选择与克隆 | 第22页 |
| 3.2 BSMV-VIGS载体的构建 | 第22-23页 |
| 3.3 BSMV的体外转录与转染 | 第23-24页 |
| 3.4 小麦L10 VIGS体系的环境优化 | 第24-25页 |
| 3.5 基因沉默效率的检测 | 第25页 |
| 3.6 TaCAMTA4 基因的沉默对叶锈菌小种165生长发育的影响 | 第25-27页 |
| 3.7 TaCAMTA4 基因的沉默对叶锈菌小种260生长发育的影响 | 第27-29页 |
| 4 讨论 | 第29-31页 |
| 4.1 目的基因沉默效率的比较分析 | 第29页 |
| 4.2 TaCAMTA4 在小麦与叶锈菌互作过程中的作用 | 第29-30页 |
| 4.3 展望 | 第30-31页 |
| 第二章 TaCAMTA4 下游调控基因的转录组表达分析 | 第31-47页 |
| 1 引言 | 第31-32页 |
| 2 材料与方法 | 第32-37页 |
| 2.1 主要试剂 | 第32页 |
| 2.2 主要仪器 | 第32页 |
| 2.3 供试小麦与菌株 | 第32页 |
| 2.4 转录组测序样品的制备 | 第32页 |
| 2.5 样品的RNA提取 | 第32-33页 |
| 2.6 RNA质量检测 | 第33页 |
| 2.7 转录组测序 | 第33-34页 |
| 2.8 测序数据处理和de novo组装 | 第34页 |
| 2.9 Unigene功能注释 | 第34页 |
| 2.10 Unigene差异表达分析 | 第34-35页 |
| 2.11 RT-qPCR验证差异Unigene的表达水平 | 第35-36页 |
| 2.12 差异Unigene的GO和Pathway分析 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-45页 |
| 3.1 转录组测序的数据产出与质量评估 | 第37-38页 |
| 3.1.1 RNA质量分析 | 第37页 |
| 3.1.2 转录组测序的产量统计 | 第37-38页 |
| 3.1.3 序列的de novo组装与拼接 | 第38页 |
| 3.2 Unigene功能注释结果 | 第38-39页 |
| 3.3 TaCAMTA4 下游调控基因的差异表达分析 | 第39-45页 |
| 3.3.1 通过转录组测序产生的差异表达基因 | 第39-41页 |
| 3.3.2 RT-qPCR验证差异表达的基因 | 第41-42页 |
| 3.3.3 差异表达基因的GO（Gene Ontology）分析 | 第42-43页 |
| 3.3.4 差异表达基因的信号通路（Pathways）分析 | 第43-45页 |
| 4 讨论 | 第45-47页 |
| 全文结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第52-53页 |
| 作者简历 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
