摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 文献综述 | 第11-21页 |
1.1 国内外研究进展 | 第11-19页 |
1.1.1 HPV的流行病学研究 | 第11-12页 |
1.1.1.1 HPV的分型 | 第11-12页 |
1.1.1.2 HPV的传播途径 | 第12页 |
1.1.1.3 宫颈易受感染的危险因素 | 第12页 |
1.1.2 HPV的基因结构与功能 | 第12-14页 |
1.1.3 HPV的感染途径及致病机理 | 第14-15页 |
1.1.4 HPV的检测方式 | 第15-18页 |
1.1.5 HPV疫苗研究现状 | 第18-19页 |
1.2 本研究目的意义及主要内容 | 第19-21页 |
1.2.1 本研究目的意义 | 第19页 |
1.2.2 本研究的主要研究途径与方法 | 第19-20页 |
1.2.3 技术路线 | 第20-21页 |
第2章 共表达载体的构建及初步鉴定 | 第21-35页 |
2.1 实验材料 | 第21-24页 |
2.1.1 载体与感受态细胞 | 第21页 |
2.1.2 主要试剂 | 第21-22页 |
2.1.3 主要溶液配置 | 第22-23页 |
2.1.4 实验仪器 | 第23-24页 |
2.2 实验方法 | 第24-28页 |
2.2.1 共表达载体的构建及初步鉴定 | 第24-25页 |
2.2.1.1 转化 | 第24页 |
2.2.1.2 含有伴侣分子感受态细胞的制备 | 第24-25页 |
2.2.1.3 构建共表达载体 | 第25页 |
2.2.1.4 双酶切鉴定重组质粒 | 第25页 |
2.2.2 重组共表达载体的初步表达及鉴定 | 第25-27页 |
2.2.2.1 表达 | 第25-26页 |
2.2.2.2 SDS-PAGE | 第26页 |
2.2.2.3 采用半干转膜法进行Western blot鉴定 | 第26-27页 |
2.2.3 分子伴侣促进重组蛋白GST-HPV58 L1的表达条件优化 | 第27-28页 |
2.2.3.1 IPTG浓度梯度优化 | 第27页 |
2.2.3.2 诱导温度优化 | 第27页 |
2.2.3.3 L-阿拉伯糖浓度梯度优化 | 第27-28页 |
2.2.3.4 L-阿拉伯糖诱导时间优化 | 第28页 |
2.3 结果与分析 | 第28-33页 |
2.3.1 共表达体系的建立 | 第28-29页 |
2.3.1.1 共表达菌质粒的电泳鉴定 | 第28-29页 |
2.3.1.2 双酶切产物的鉴定 | 第29页 |
2.3.2 重组共表达载体的初步鉴定 | 第29-30页 |
2.3.3 分子伴侣促进重组蛋白GST-HPV58 L1的表达条件优化 | 第30-33页 |
2.3.3.1 IPTG浓度梯度优化 | 第30-31页 |
2.3.3.2 诱导温度优化 | 第31页 |
2.3.3.3 L-阿拉伯糖浓度梯度优化 | 第31-32页 |
2.3.3.4 L-阿拉伯糖加入时间优化 | 第32-33页 |
2.4 讨论 | 第33-34页 |
2.5 小结 | 第34-35页 |
第3章 重组蛋白GST-HPV58 L1的纯化及初步免疫评价 | 第35-46页 |
3.1 实验材料 | 第35-39页 |
3.1.1 实验动物与菌株 | 第35页 |
3.1.2 主要试剂 | 第35-36页 |
3.1.3 主要溶液配制 | 第36-38页 |
3.1.4 实验仪器 | 第38-39页 |
3.2 实验方法 | 第39-41页 |
3.2.1 重组蛋白GST-HPV58 L1的纯化 | 第39页 |
3.2.2 重组蛋白GST-HPV58 L1 GST标签的切除 | 第39-40页 |
3.2.2.1 重组蛋白GST-HPV58 L1的透析 | 第39页 |
3.2.2.2 重组蛋白GST-HPV58 L1浓度的测定 | 第39-40页 |
3.2.2.3 重组蛋白GST-HPV58 L1的酶切 | 第40页 |
3.2.2.4 酶切产物的Western blot鉴定 | 第40页 |
3.2.3 截短型HPV58 L1蛋白的初步免疫及免疫评价 | 第40-41页 |
3.2.3.1 免疫方案 | 第40页 |
3.2.3.2 ELISA法测定免疫小鼠血清效价 | 第40-41页 |
3.3 结果与分析 | 第41-44页 |
3.3.1 重组蛋白GST-HPV58 L1的表达纯化 | 第41-42页 |
3.3.2 重组蛋白GST-HPV58 L1 GST标签的切除 | 第42-43页 |
3.3.3 免疫评价 | 第43-44页 |
3.3.3.1 血清的效价测定 | 第43页 |
3.3.3.2 免疫效果显著性差异分析 | 第43-44页 |
3.3.3.3 消长规律测定 | 第44页 |
3.4 讨论 | 第44-45页 |
3.5 小结 | 第45-46页 |
第4章 全文结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-52页 |
附录:中英文缩略表 | 第52-54页 |
个人简历 | 第54-55页 |
学习经历 | 第54页 |
科研经历 | 第54页 |
发表论文情况 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |