中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-6页 |
1 绪论 | 第10-23页 |
1.1 牛磺熊去氧胆酸国内外研究现状 | 第10页 |
1.2 牛磺熊去氧胆酸制备方法及研究现状 | 第10-12页 |
1.2.1 化学合成法 | 第11-12页 |
1.2.2 生物催化法 | 第12页 |
1.3 生物酶反应器简介 | 第12-16页 |
1.3.1 连续搅拌釜式反应器(CSTR) | 第13-14页 |
1.3.2 填充床式反应器(PBR) | 第14-15页 |
1.3.3 流化床式反应器(FBR) | 第15-16页 |
1.4 固定化酶技术的研究现状 | 第16-19页 |
1.4.1 固定化酶载体材料 | 第16-17页 |
1.4.2 酶固定化方法 | 第17-19页 |
1.5 计算流体动力学概述 | 第19-22页 |
1.5.1 FLUENT软件介绍 | 第20-22页 |
1.6 课题思路及意义 | 第22-23页 |
2 7α-HSDH和 7β-HSDH表达与固定 | 第23-33页 |
2.1 实验材料 | 第23-25页 |
2.1.1 材料与药品 | 第23-24页 |
2.1.2 设备与仪器 | 第24-25页 |
2.2 实验方法 | 第25-28页 |
2.2.1 7α-HSDH和 7β-HSDH的表达与纯化 | 第25-27页 |
2.2.2 固定化酶载体的制备及酶的固定 | 第27-28页 |
2.3 实验结果 | 第28-32页 |
2.3.1 7α-HSDH和 7β-HSDH的SDS-PAGE凝胶电泳图 | 第28-29页 |
2.3.2 BCA法检测 7α-HSDH和 7β-HSDH浓度 | 第29页 |
2.3.3 7α-HSDH和 7β-HSDH游离酶活性检测结果 | 第29-31页 |
2.3.4 酶的固定率检测结果 | 第31-32页 |
2.4 小结 | 第32-33页 |
3 固定化酶对TUDCA转化条件的优化 | 第33-41页 |
3.1 实验材料 | 第33-34页 |
3.1.1 材料与药品 | 第33页 |
3.1.2 设备与仪器 | 第33-34页 |
3.2 实验方法 | 第34-36页 |
3.2.1 pH对固定化酶底物转化的影响 | 第34页 |
3.2.2 温度对固定化酶底物转化的影响 | 第34页 |
3.2.3 底物浓度对固定化酶底物转化的影响 | 第34-35页 |
3.2.4 固定化酶 4℃贮存条件下的酶活回收率 | 第35页 |
3.2.5 高效液相色谱分析 | 第35-36页 |
3.3 实验结果与分析 | 第36-40页 |
3.3.1 TUDCA、T7KLCA、TCDCA的HPLC标准曲线 | 第36-38页 |
3.3.2 pH对TUDCA转化效率的影响 | 第38页 |
3.3.3 温度对TUDCA转化效率的影响 | 第38-39页 |
3.3.4 底物浓度对TUDCA转化效率的影响 | 第39页 |
3.3.5 固定化酶 4℃贮存条件下的酶活力回收率 | 第39-40页 |
3.4 小结 | 第40-41页 |
4 FLUENT模拟分析 | 第41-52页 |
4.1 利用Gambit建立固定化酶反应容器的计算模型 | 第41-43页 |
4.1.1 Gambit绘制反应容器简图 | 第41页 |
4.1.2 网格的划分 | 第41-42页 |
4.1.3 设置边界类型及输出Mesh文件 | 第42-43页 |
4.2 利用FLUENT设置计算参数 | 第43-44页 |
4.3 Tecplot处理计算结果显示 | 第44-51页 |
4.3.1 循环流速对流场的影响 | 第44-48页 |
4.3.2 高径比对流场的影响 | 第48-51页 |
4.4 小结 | 第51-52页 |
5 固定化酶反应器实验验证 | 第52-58页 |
5.1 固定化酶反应器实验平台的搭载 | 第52页 |
5.2 实验材料 | 第52-53页 |
5.2.1 材料与药品 | 第52-53页 |
5.2.2 设备与仪器 | 第53页 |
5.3 实验方法 | 第53-54页 |
5.3.1 循环流速对底物转化的影响 | 第53-54页 |
5.3.2 反应容器径高比对底物转化的影响 | 第54页 |
5.4 实验结果及分析 | 第54-56页 |
5.4.1 循环流速对底物转化的影响 | 第54-56页 |
5.4.2 高径比对底物转化的影响 | 第56页 |
5.5 小结 | 第56-58页 |
6 总结 | 第58-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-65页 |
附录 | 第65-67页 |
附录A (3.3.2) | 第65-66页 |
附录B (3.3.3) | 第66-67页 |
附录C (3.3.4) | 第67页 |