| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略语/符号说明 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 研究现状、成果 | 第11-12页 |
| 研究目的、方法 | 第12-13页 |
| 1.对象和方法 | 第13-31页 |
| 1.1 研究对象 | 第13页 |
| 1.2 实验试剂及相关 | 第13-18页 |
| 1.2.1 实验所需主要试剂 | 第13-14页 |
| 1.2.2 Western blot所需溶液配制 | 第14-17页 |
| 1.2.3 细胞培养所需溶液配制 | 第17页 |
| 1.2.4 质粒扩增所需试剂及溶液配制 | 第17-18页 |
| 1.2.5 PI/RNase细胞周期检测试剂盒 | 第18页 |
| 1.3 主要仪器和设备 | 第18-19页 |
| 1.4 试验方法 | 第19-31页 |
| 1.4.1 细胞培养相关实验方法 | 第19-21页 |
| 1.4.1.1 细胞复苏 | 第19-20页 |
| 1.4.1.2 细胞传代 | 第20页 |
| 1.4.1.3 细胞冻存 | 第20-21页 |
| 1.4.2 细胞总蛋白的提取及浓度的测定 | 第21-23页 |
| 1.4.2.1 细胞蛋白的提取 | 第21页 |
| 1.4.2.2 BCA法蛋白浓度测定 | 第21-22页 |
| 1.4.2.3 蛋白电泳 | 第22页 |
| 1.4.2.4 转膜 | 第22-23页 |
| 1.4.2.5 免疫反应 | 第23页 |
| 1.4.2.6 化学显色及采集western blot图像 | 第23页 |
| 1.4.3 重组质粒载体的构建及验证 | 第23-28页 |
| 1.4.3.1 p Yr- LVX -TACC3-sh RNA的构建 | 第23-24页 |
| 1.4.3.2 pYr- LVX -TACC3-shRNA的序列选择及设计 | 第24-25页 |
| 1.4.3.3 总RNA的抽提 | 第25-26页 |
| 1.4.3.4 RNA逆转录为cDNA | 第26-27页 |
| 1.4.3.5 荧光定量PCR | 第27-28页 |
| 1.4.4 质粒扩增与提纯 | 第28-30页 |
| 1.4.4.1 质粒扩增 | 第28页 |
| 1.4.4.2 sh RNA质粒的纯化 | 第28-29页 |
| 1.4.4.3 质粒转染 | 第29-30页 |
| 1.4.5 流式细胞仪检测细胞周期 | 第30-31页 |
| 1.5 统计分析方法 | 第31页 |
| 2 结果 | 第31-40页 |
| 2.1 膀胱尿路上皮癌T24细胞系中TACC3蛋白量的表达水平明显增高 | 第31页 |
| 2.2 针对人TACC3基因（NM_006342）的 shRNA 表达载体pLV-TACC3-sh1、pLV-TACC3-sh2、pLV-TACC3-sh3、pLV-TACC3-sh4购自长沙赢润生物技术有限公司 | 第31-32页 |
| 2.3 Q-PCR检测四组shRNA表达载体对TACC3的mRNA表达情况 | 第32页 |
| 2.4 pYr-LVX-TACC3-shRNA转染效率的验证 | 第32-34页 |
| 2.5 流式细胞技术检测Untreated 组、Negative control组及shRNA组细胞周期变化情况 | 第34-36页 |
| 2.6 shRNA组对G1期相关细胞周期蛋白及细胞周期蛋白依赖性激酶表达情况 | 第36-37页 |
| 2.7 TACC3影响膀胱癌T24细胞周期相关通路的初步研究 | 第37-40页 |
| 3 讨论 | 第40-44页 |
| 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-48页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第48-49页 |
| 综述 膀胱癌的生物标志物及靶向治疗 | 第49-61页 |
| 综述参考文献 | 第55-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 个人简历 | 第62页 |
