摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
英文缩略词 | 第7-10页 |
1 前言 | 第10-16页 |
1.1 墨吉明对虾概况 | 第10页 |
1.2 CHH家族 | 第10-13页 |
1.3 MIH | 第13-15页 |
1.4 目的与意义 | 第15-16页 |
2 墨吉明对虾蜕皮抑制激素1(FmMIH1)cDNA及gDNA全长的克隆 | 第16-37页 |
2.1 实验材料 | 第16-18页 |
2.1.1 实验用虾 | 第16页 |
2.1.2 菌株及载体 | 第16页 |
2.1.3 主要试剂 | 第16-17页 |
2.1.4 主要仪器 | 第17页 |
2.1.5 引物设计 | 第17-18页 |
2.2 实验方法 | 第18-26页 |
2.2.1 FmMIH1全长cDNA的克隆 | 第18-24页 |
2.2.2 FmMIH1基因组DNA的克隆 | 第24-26页 |
2.3 生物信息学分析 | 第26-27页 |
2.4 实验结果 | 第27-35页 |
2.4.1 FmMIH1基因cDNA的序列特征 | 第27-28页 |
2.4.2 FmMIH1基因gDNA结构及序列分析 | 第28-30页 |
2.4.3 FmMIH1基因蛋白理化性质分析 | 第30-31页 |
2.4.4 FmMIH1基因同源性分析 | 第31-33页 |
2.4.5 FmMIH1基因系统进化树分析 | 第33-34页 |
2.4.6 FmMIH1蛋白三维结构预测 | 第34-35页 |
2.5 讨论 | 第35-37页 |
3 墨吉明对虾蜕皮抑制激素1(FmMIH1)基因的表达分析 | 第37-43页 |
3.1 实验材料 | 第37-38页 |
3.1.1 实验用虾 | 第37页 |
3.1.2 主要试剂 | 第37页 |
3.1.3 主要仪器 | 第37-38页 |
3.1.4 引物设计 | 第38页 |
3.2 实验方法 | 第38-40页 |
3.2.1 总RNA的提取与纯化 | 第38页 |
3.2.2 反转录合成cDNA模板 | 第38-39页 |
3.2.3 RealTime-PCR检测FmMIH1的组织表达 | 第39-40页 |
3.2.4 RealTime-PCR检测FmMIH1的蜕皮周期表达 | 第40页 |
3.3 数据处理 | 第40页 |
3.4 结果与分析 | 第40-42页 |
3.4.1 FmMIH1组织表达分析 | 第40-41页 |
3.4.2 FmMIH1不同蜕皮时期的表达分析 | 第41-42页 |
3.5 讨论 | 第42-43页 |
4 墨吉明对虾蜕皮抑制激素1(FmMIH1)基因的功能研究 | 第43-63页 |
4.1 实验材料 | 第43-47页 |
4.1.1 实验用虾 | 第43页 |
4.1.2 质粒与菌株 | 第43-45页 |
4.1.3 主要试剂 | 第45页 |
4.1.4 主要仪器 | 第45-46页 |
4.1.5 自配溶液 | 第46页 |
4.1.6 引物设计 | 第46-47页 |
4.2 实验方法 | 第47-55页 |
4.2.1 FmMIH1重组蛋白的制备 | 第47-54页 |
4.2.2 FmMIH1 dsRNA的制备 | 第54-55页 |
4.2.3 FmMIH1功能验证实验 | 第55页 |
4.3 结果与分析 | 第55-61页 |
4.3.1 FmMIH1原核表达 | 第55-59页 |
4.3.2 FmMIH1双链RNA | 第59-60页 |
4.3.3 FmMIH1功能验证 | 第60-61页 |
4.4 讨论 | 第61-63页 |
结论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
作者简介 | 第75-76页 |
导师简介 | 第76-77页 |