| 摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 引言 | 第8-9页 |
| 1 综述 | 第9-13页 |
| 1.1 miR169家族的研究进展 | 第9-10页 |
| 1.2 核转录因子Y（NF-Y）的研究进展 | 第10-12页 |
| 1.2.1 NF-YA基因在植物抗非生物胁迫中的作用 | 第10-11页 |
| 1.2.2 NF-YB与NF-YC基因在植物抗非生物胁迫的作用 | 第11-12页 |
| 1.3 miR169与NF-YA靶向关系的研究进展 | 第12页 |
| 1.4 目的意义 | 第12-13页 |
| 2 zma-miR169c及其靶基因ZmNF-YA13基因的表达模式分析 | 第13-28页 |
| 2.1 实验材料及仪器设备 | 第13-14页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第13页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第13-14页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第14页 |
| 2.2 实验方法 | 第14-17页 |
| 2.2.1 qPCR引物的设计 | 第14页 |
| 2.2.2 玉米总RNA的提取及cDNA的获得 | 第14-16页 |
| 2.2.3 实时定量荧光PCR反应 | 第16-17页 |
| 2.3 结果与分析 | 第17-25页 |
| 2.3.1 不同胁迫条件及ABA处理下基因的表达模式分析 | 第17-24页 |
| 2.3.2 玉米不同组织器官中基因的表达模式分析 | 第24-25页 |
| 2.4 讨论 | 第25-27页 |
| 2.5 小结 | 第27-28页 |
| 3 玉米zma-miR169c前体的克隆与植物表达载体构建 | 第28-40页 |
| 3.1 实验材料与实验设备 | 第28页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第28页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第28页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第28页 |
| 3.2 实验方法 | 第28-35页 |
| 3.2.1 玉米基因组DNA提取 | 第28-29页 |
| 3.2.2 zma-miR169c前体的克隆 | 第29-32页 |
| 3.2.3 zma-pre-miR169c玉米表达载体的构建与农杆菌转化 | 第32-35页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第35-38页 |
| 3.3.1 zma-miR169c前体的克隆 | 第35-36页 |
| 3.3.2 zma-pre-miR169c基因生物信息学分析 | 第36页 |
| 3.3.3 zma-pre-miR169c植物表达载体的构建 | 第36-37页 |
| 3.3.4 重组质粒转化农杆菌EHA101 | 第37-38页 |
| 3.4 讨论 | 第38页 |
| 3.5 小结 | 第38-40页 |
| 4 玉米ZmNF-YA13的克隆与植物表达载体构建 | 第40-67页 |
| 4.1 实验材料与实验设备 | 第40-41页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第40页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第40页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第40-41页 |
| 4.2 实验方法 | 第41-54页 |
| 4.2.1 玉米总RNA提取 | 第41页 |
| 4.2.2 ZmNF-YA13部分编码区的克隆 | 第41-43页 |
| 4.2.3 ZmNF-YA133’端cDNA序列的克隆 | 第43-46页 |
| 4.2.4 ZmNF-YA135’端的克隆 | 第46-48页 |
| 4.2.5 ZmNF-YA13基因ORF的获得 | 第48-51页 |
| 4.2.6 ZmNF-YA13基因编码区的生物信息学分析 | 第51页 |
| 4.2.7 ZmNF-YA13植物表达载体的构建与农杆菌转化 | 第51-54页 |
| 4.3 结果与分析 | 第54-65页 |
| 4.3.1 ZmNF-YA13基因部分编码区的克隆 | 第54-55页 |
| 4.3.2 ZmNF-YA13基因 3’端的克隆 | 第55-56页 |
| 4.3.3 ZmNF-YA13基因 5’端的克隆 | 第56-57页 |
| 4.3.4 ZmNF-YA13基因生物信息学分析 | 第57-60页 |
| 4.3.5 ZmNF-YA13植物表达载体构建与农杆菌转化 | 第60-65页 |
| 4.4 讨论 | 第65-66页 |
| 4.5 小结 | 第66-67页 |
| 5 转ZmNF-YA13基因烟草的分子及生理检测 | 第67-80页 |
| 5.1 实验材料及仪器设备 | 第67页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第67页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第67页 |
| 5.1.3 实验仪器 | 第67页 |
| 5.2 实验方法 | 第67-73页 |
| 5.2.1 烟草的转化 | 第67-68页 |
| 5.2.2 转ZmNF-YA13基因烟草的分子检测 | 第68-71页 |
| 5.2.3 转ZmNF-YA13基因烟草的生理检测 | 第71-73页 |
| 5.3 结果与分析 | 第73-78页 |
| 5.3.1 转ZmNF-YA13基因烟草的获得 | 第73-74页 |
| 5.3.2 转ZmNF-YA13基因烟草的分子检测 | 第74-75页 |
| 5.3.3 转ZmNF-YA13基因烟草的生理检测 | 第75-78页 |
| 5.4 讨论 | 第78-79页 |
| 5.5 小结 | 第79-80页 |
| 结论 | 第80-81页 |
| 展望 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-87页 |
| 附录A 论文中所用培养基 | 第87-89页 |
| 附录B 论文中所用缩略语 | 第89-90页 |
| 附录C 论文中所用的DNA Marker | 第90-91页 |
| 附录D 论文中所用的质粒图谱 | 第91-92页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93-95页 |
