| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-20页 |
| 1.1 多杀性巴氏杆菌的基本分类 | 第12页 |
| 1.2 多杀性巴氏杆菌引起的动物疾病 | 第12-13页 |
| 1.3 多杀性巴氏杆菌致病基因组学 | 第13页 |
| 1.4 多杀性巴氏杆菌的毒力机制 | 第13-16页 |
| 1.4.1 宿主环境 | 第13-14页 |
| 1.4.2 表面成分 | 第14-15页 |
| 1.4.3 PMT | 第15页 |
| 1.4.4 抗生素耐药性 | 第15-16页 |
| 1.5 治疗和预防 | 第16-18页 |
| 1.5.1 抗生素 | 第16页 |
| 1.5.2 疫苗 | 第16-18页 |
| 1.6 融合蛋白 | 第18页 |
| 1.6.1 融合蛋白技术 | 第18页 |
| 1.6.2 融合蛋白连接肽的选择 | 第18页 |
| 1.6.3 连接肽在应用中出现的问题及解决方法 | 第18页 |
| 1.7 展望 | 第18-20页 |
| 第2章 引言 | 第20-22页 |
| 2.1 研究目的及意义 | 第20页 |
| 2.2 研究的主要内容 | 第20-21页 |
| 2.2.1 牛源多杀性巴氏杆菌交叉保护性抗原的筛选 | 第20页 |
| 2.2.2 牛源多杀性巴氏杆菌pm0979-ompH融合基因的表达及其表达产物的交叉保护性研究 | 第20页 |
| 2.2.3 牛源多杀性巴氏杆菌pm0979-PlpE融合基因的表达及其表达产物的交叉保护性研究 | 第20-21页 |
| 2.3 技术路线 | 第21-22页 |
| 第3章 牛源多杀性巴氏杆菌交叉保护性抗原的筛选 | 第22-32页 |
| 3.1 实验材料 | 第22-23页 |
| 3.1.1 菌种与质粒 | 第22页 |
| 3.1.2 酶及生化试剂 | 第22页 |
| 3.1.3 实验动物 | 第22页 |
| 3.1.4 主要仪器设备 | 第22-23页 |
| 3.1.5 主要试剂的配制 | 第23页 |
| 3.2 方法 | 第23-27页 |
| 3.2.1 引物的设计与合成 | 第23-24页 |
| 3.2.2 目的基因的扩增 | 第24页 |
| 3.2.3 目的基因原核表达载体的构建 | 第24-26页 |
| 3.2.4 目的基因的表达 | 第26页 |
| 3.2.5 目的蛋白的纯化 | 第26-27页 |
| 3.2.6 目的蛋白的Western-blot分析 | 第27页 |
| 3.2.7 小鼠攻毒保护性试验 | 第27页 |
| 3.3 结果 | 第27-30页 |
| 3.3.1 目的基因的扩增 | 第27-28页 |
| 3.3.2 目的基因表达产物的鉴定 | 第28-29页 |
| 3.3.3 小鼠攻毒保护性试验结果 | 第29-30页 |
| 3.4 讨论 | 第30-32页 |
| 3.4.1 牛源多杀性巴氏杆菌保护性抗原的选择 | 第30-31页 |
| 3.4.2 目的蛋白的纯化及复性 | 第31页 |
| 3.4.3 牛源多杀性巴氏杆菌交叉保护性抗原的筛选 | 第31-32页 |
| 第四章 牛源多杀性巴氏杆菌pm0979-ompH融合基因的表达及其表达产物的交叉保护性研究 | 第32-44页 |
| 4.1 材料 | 第32页 |
| 4.1.1 菌种 | 第32页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第32页 |
| 4.1.3 主要试剂的配制 | 第32页 |
| 4.1.4 实验动物 | 第32页 |
| 4.1.5 主要仪器设备 | 第32页 |
| 4.2 方法 | 第32-36页 |
| 4.2.1 pm0979、ompH优势抗原表位的筛选 | 第32-33页 |
| 4.2.2 引物的设计与合成 | 第33-34页 |
| 4.2.3 目的基因的扩增 | 第34-35页 |
| 4.2.4 融合基因pm0979-ompH的生物信息学分析 | 第35页 |
| 4.2.5 目的基因原核表达载体的构建 | 第35页 |
| 4.2.6 目的基因的表达与纯化 | 第35-36页 |
| 4.2.7 目的蛋白的Western-blot分析 | 第36页 |
| 4.2.8 小鼠攻毒保护性试验 | 第36页 |
| 4.3 结果 | 第36-41页 |
| 4.3.1 pm0979、ompH优势抗原表位的筛选 | 第36-37页 |
| 4.3.2 目的基因的扩增 | 第37-38页 |
| 4.3.3 融合基因pm0979-ompH的生物信息学分析 | 第38-39页 |
| 4.3.4 融合基因表达产物的鉴定 | 第39-40页 |
| 4.3.5 小鼠攻毒保护性试验结果 | 第40-41页 |
| 4.4 讨论 | 第41-44页 |
| 4.4.1 多杀性巴氏杆菌交叉保护性抗原的选择 | 第41-42页 |
| 4.4.2 linker的：选择 | 第42页 |
| 4.4.3 牛源多杀性巴氏杆菌融合蛋白对小鼠的交叉保护性 | 第42-44页 |
| 第五章 牛源多杀性巴氏杆菌pm0979-PlpE融合基因的表达及其表达产物的交叉保护性研究 | 第44-54页 |
| 5.1 实验材料 | 第44页 |
| 5.1.1 菌种与质粒 | 第44页 |
| 5.1.2 酶及生化试剂 | 第44页 |
| 5.1.3 实验动物 | 第44页 |
| 5.1.4 主要仪器设备 | 第44页 |
| 5.2 方法 | 第44-47页 |
| 5.2.1 pm0979、PlpE优势抗原表位的筛选 | 第44页 |
| 5.2.2 引物的设计与合成 | 第44-45页 |
| 5.2.3 目的基因的扩增 | 第45-46页 |
| 5.2.4 融合基因pm0979-plpE的生物信息学分析 | 第46页 |
| 5.2.5 目的基因原核表达载体的构建 | 第46页 |
| 5.2.6 目的基因的表达与纯化 | 第46-47页 |
| 5.2.7 目的蛋白的Western-blot分析 | 第47页 |
| 5.2.8 小鼠攻毒保护性试验 | 第47页 |
| 5.3 结果 | 第47-52页 |
| 5.3.1 pm0979、PlpE抗原表位的筛选 | 第47页 |
| 5.3.2 目的基因的扩增 | 第47-48页 |
| 5.3.3 融合基因pm0979-PlpE的生物信息学分析 | 第48-50页 |
| 5.3.4 目的基因表达产物的鉴定 | 第50-51页 |
| 5.3.5 小鼠攻毒保护性试验结果 | 第51-52页 |
| 5.4 讨论 | 第52-54页 |
| 第6章 结论 | 第54-56页 |
| 6.1 牛源多杀性巴氏杆菌交叉保护性抗原的初步筛选 | 第54页 |
| 6.2 牛源多杀性巴氏杆菌pm0979-ompH融合基因的表达及其表达产物的交叉保护性研究 | 第54页 |
| 6.3 牛源多杀性巴氏杆菌pm0979-PlpE融合基因的表达及其表达产物的交叉保护性研究 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 附表 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64-66页 |
| 硕士期间发表论文及参与的科研项目 | 第66页 |
