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miR-125a-5p在C2C12细胞增殖分化中的作用及机制研究

摘要第6-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 文献综述第12-23页
    引言第12页
    1.1 骨骼肌的研究概述第12-16页
        1.1.1 胚胎期骨骼肌发生与调控第12-14页
        1.1.2 出生后骨骼肌再生研究第14-15页
        1.1.3 成肌细胞增殖和分化研究第15页
        1.1.4 骨骼肌肥大与萎缩研究第15-16页
        1.1.5 肌纤维类型的研究第16页
    1.2 microRNAs的研究概述第16-18页
        1.2.1 microRNAs的产生第16-17页
        1.2.2 microRNAs的作用机制第17页
        1.2.3 microRNAs的生物学功能第17-18页
    1.3 microRNAS在骨骼肌中的研究第18-20页
        1.3.1 microRNAs在骨骼肌再生中的研究第18页
        1.3.2 microRNAs在成肌细胞增殖中的研究第18-19页
        1.3.3 microRNAs在成肌细胞分化中的研究第19页
        1.3.4 microRNAs在骨骼肌肥大与萎缩中的研究第19-20页
        1.3.5 microRNAs在肌纤维类型中的研究第20页
    1.4 microRNA-125a的研究进展第20-21页
        1.4.1 miRNA-125a的生物学信息第20-21页
        1.4.2 miRNA-125a的生物学功能第21页
    1.5 细胞周期相关基因的研究第21-22页
        1.5.1 细胞周期蛋白D1概述第21-22页
        1.5.2 E2F2和E2F3概述第22页
    1.6 本研究的目的和意义第22-23页
第二章 MiR-125a-5p在C2C12细胞增殖期的作用研究第23-31页
    2.1 材料和方法第23-25页
        2.1.1 材料第23页
        2.1.2 细胞培养及转染第23页
        2.1.3 细胞总RNA提取第23页
        2.1.4 荧光定量 PCR第23-24页
        2.1.5 蛋白免疫印迹第24页
        2.1.6 EdU检测第24-25页
        2.1.7 细胞流式检测第25页
        2.1.8 CCK-8 检测第25页
        2.1.9 数据统计与分析第25页
    2.2 结果与分析第25-29页
        2.2.1 C2C12细胞增殖期miR-125a-5p和E2F3表达呈相反趋势第25-26页
        2.2.2 过表达miR-125a-5p抑制细胞周期基因表达水平第26页
        2.2.3 过表达miR-125a-5p抑制细胞增殖第26-27页
        2.2.4 抑制mi R-125a-5p不影响细胞周期基因表达水平第27-28页
        2.2.5 抑制mi R-125a-5p不影响细胞增殖第28-29页
    2.3 讨论第29-31页
第三章 MiR-125a-5p在C2C12细胞分化期的作用研究第31-36页
    3.1 材料和方法第31-32页
        3.1.1 材料第31页
        3.1.2 细胞培养及转染第31页
        3.1.3 细胞总RNA提取第31页
        3.1.4 荧光定量 PCR第31页
        3.1.5 蛋白免疫印迹第31页
        3.1.6 免疫荧光检测细胞分化第31页
        3.1.7 数据统计与分析第31-32页
    3.2 结果与分析第32-34页
        3.2.1 C2C12细胞分化期miR-125a-5p和E2F2表达水平呈相反趋势第32页
        3.2.2 过表达miR-125a-5p不影响C2C12成肌细胞分化第32-33页
        3.2.3 干扰mi R-125a-5p不影响C2C12成肌细胞分化第33-34页
    3.3 讨论第34-36页
第四章 MiR-125a-5p的靶基因预测及验证第36-41页
    4.1 材料和方法第36-37页
        4.1.1 材料第36页
        4.1.2 细胞培养及转染第36页
        4.1.3 双荧光素酶报告载体的构建及检测第36页
        4.1.4 细胞总RNA的提取第36页
        4.1.5 荧光定量 PCR第36页
        4.1.6 蛋白免疫印迹第36页
        4.1.7 CCK-8 检测第36-37页
        4.1.8 数据统计与分析第37页
    4.2 结果与分析第37-40页
        4.2.1 数据库靶基因预测第37页
        4.2.2 E2F3是miR-125a-5p的靶基因第37-38页
        4.2.3 干扰E2F3抑制细胞增殖基因的表达第38-39页
        4.2.4 干扰E2F3抑制细胞增殖第39-40页
    4.3 讨论第40-41页
结论第41页
创新点第41页
进一步研究内容第41-42页
参考文献第42-47页
附录第47-54页
致谢第54-55页
作者简介第55页

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