摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第12-23页 |
引言 | 第12页 |
1.1 骨骼肌的研究概述 | 第12-16页 |
1.1.1 胚胎期骨骼肌发生与调控 | 第12-14页 |
1.1.2 出生后骨骼肌再生研究 | 第14-15页 |
1.1.3 成肌细胞增殖和分化研究 | 第15页 |
1.1.4 骨骼肌肥大与萎缩研究 | 第15-16页 |
1.1.5 肌纤维类型的研究 | 第16页 |
1.2 microRNAs的研究概述 | 第16-18页 |
1.2.1 microRNAs的产生 | 第16-17页 |
1.2.2 microRNAs的作用机制 | 第17页 |
1.2.3 microRNAs的生物学功能 | 第17-18页 |
1.3 microRNAS在骨骼肌中的研究 | 第18-20页 |
1.3.1 microRNAs在骨骼肌再生中的研究 | 第18页 |
1.3.2 microRNAs在成肌细胞增殖中的研究 | 第18-19页 |
1.3.3 microRNAs在成肌细胞分化中的研究 | 第19页 |
1.3.4 microRNAs在骨骼肌肥大与萎缩中的研究 | 第19-20页 |
1.3.5 microRNAs在肌纤维类型中的研究 | 第20页 |
1.4 microRNA-125a的研究进展 | 第20-21页 |
1.4.1 miRNA-125a的生物学信息 | 第20-21页 |
1.4.2 miRNA-125a的生物学功能 | 第21页 |
1.5 细胞周期相关基因的研究 | 第21-22页 |
1.5.1 细胞周期蛋白D1概述 | 第21-22页 |
1.5.2 E2F2和E2F3概述 | 第22页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
第二章 MiR-125a-5p在C2C12细胞增殖期的作用研究 | 第23-31页 |
2.1 材料和方法 | 第23-25页 |
2.1.1 材料 | 第23页 |
2.1.2 细胞培养及转染 | 第23页 |
2.1.3 细胞总RNA提取 | 第23页 |
2.1.4 荧光定量 PCR | 第23-24页 |
2.1.5 蛋白免疫印迹 | 第24页 |
2.1.6 EdU检测 | 第24-25页 |
2.1.7 细胞流式检测 | 第25页 |
2.1.8 CCK-8 检测 | 第25页 |
2.1.9 数据统计与分析 | 第25页 |
2.2 结果与分析 | 第25-29页 |
2.2.1 C2C12细胞增殖期miR-125a-5p和E2F3表达呈相反趋势 | 第25-26页 |
2.2.2 过表达miR-125a-5p抑制细胞周期基因表达水平 | 第26页 |
2.2.3 过表达miR-125a-5p抑制细胞增殖 | 第26-27页 |
2.2.4 抑制mi R-125a-5p不影响细胞周期基因表达水平 | 第27-28页 |
2.2.5 抑制mi R-125a-5p不影响细胞增殖 | 第28-29页 |
2.3 讨论 | 第29-31页 |
第三章 MiR-125a-5p在C2C12细胞分化期的作用研究 | 第31-36页 |
3.1 材料和方法 | 第31-32页 |
3.1.1 材料 | 第31页 |
3.1.2 细胞培养及转染 | 第31页 |
3.1.3 细胞总RNA提取 | 第31页 |
3.1.4 荧光定量 PCR | 第31页 |
3.1.5 蛋白免疫印迹 | 第31页 |
3.1.6 免疫荧光检测细胞分化 | 第31页 |
3.1.7 数据统计与分析 | 第31-32页 |
3.2 结果与分析 | 第32-34页 |
3.2.1 C2C12细胞分化期miR-125a-5p和E2F2表达水平呈相反趋势 | 第32页 |
3.2.2 过表达miR-125a-5p不影响C2C12成肌细胞分化 | 第32-33页 |
3.2.3 干扰mi R-125a-5p不影响C2C12成肌细胞分化 | 第33-34页 |
3.3 讨论 | 第34-36页 |
第四章 MiR-125a-5p的靶基因预测及验证 | 第36-41页 |
4.1 材料和方法 | 第36-37页 |
4.1.1 材料 | 第36页 |
4.1.2 细胞培养及转染 | 第36页 |
4.1.3 双荧光素酶报告载体的构建及检测 | 第36页 |
4.1.4 细胞总RNA的提取 | 第36页 |
4.1.5 荧光定量 PCR | 第36页 |
4.1.6 蛋白免疫印迹 | 第36页 |
4.1.7 CCK-8 检测 | 第36-37页 |
4.1.8 数据统计与分析 | 第37页 |
4.2 结果与分析 | 第37-40页 |
4.2.1 数据库靶基因预测 | 第37页 |
4.2.2 E2F3是miR-125a-5p的靶基因 | 第37-38页 |
4.2.3 干扰E2F3抑制细胞增殖基因的表达 | 第38-39页 |
4.2.4 干扰E2F3抑制细胞增殖 | 第39-40页 |
4.3 讨论 | 第40-41页 |
结论 | 第41页 |
创新点 | 第41页 |
进一步研究内容 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-47页 |
附录 | 第47-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
作者简介 | 第55页 |