| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 缩略词表 | 第14-16页 |
| 前言 | 第16-18页 |
| 第一章 SmMYC2a和SmMYC2b的全长克隆 | 第18-34页 |
| 1 实验材料 | 第18-19页 |
| 1.1 植物材料 | 第18页 |
| 1.2 菌株和质粒 | 第18页 |
| 1.3 试剂与药品 | 第18-19页 |
| 1.4 主要仪器设备 | 第19页 |
| 2 实验方法 | 第19-27页 |
| 2.1 丹参总RNA的提取和检测 | 第19-21页 |
| 2.2 第一链cDNA合成 | 第21页 |
| 2.3 丹参DNA的提取与检测 | 第21-22页 |
| 2.4 SmMYC2基因ORF的获得 | 第22-23页 |
| 2.5 连接测序载体和测序 | 第23-24页 |
| 2.6 SmMYC2基因组全长的克隆 | 第24-25页 |
| 2.7 SmMYC2基因的生物信息学分析 | 第25-27页 |
| 3 实验结果 | 第27-32页 |
| 3.1 SmMYC2基因的克隆 | 第27-28页 |
| 3.2 SmMYC2的生物信息学分析 | 第28-32页 |
| 4 小结与讨论 | 第32-34页 |
| 第二章 SmMYC2的表达特征分析 | 第34-45页 |
| 1 实验材料 | 第34-35页 |
| 1.1 植物材料 | 第34页 |
| 1.2 试剂和药品 | 第34-35页 |
| 1.3 仪器设备 | 第35页 |
| 2 实验方法 | 第35-41页 |
| 2.1 RNA的提取、反转录与实时定量PCR | 第35-37页 |
| 2.2 亚细胞定位实验 | 第37-41页 |
| 3 实验结果 | 第41-44页 |
| 3.1 SmMYC2的器官表达分析 | 第41-42页 |
| 3.2 SmMYC2在MeJA诱导后的表达分析 | 第42-43页 |
| 3.3 激光共聚焦观察结果 | 第43-44页 |
| 4 小结与讨论 | 第44-45页 |
| 4.1 SmMYC2的器官表达分析 | 第44页 |
| 4.2 SmMYC2在MeJA诱导下的表达分析 | 第44页 |
| 4.3 亚细胞定位 | 第44-45页 |
| 第三章 MYC2-RNAi转基因丹参发根的培养 | 第45-54页 |
| 1 实验材料 | 第45-46页 |
| 1.1 植物材料 | 第45页 |
| 1.2 菌株和质粒 | 第45页 |
| 1.3 试剂和药品 | 第45页 |
| 1.4 主要仪器设备 | 第45-46页 |
| 2 实验方法 | 第46-51页 |
| 2.1 构建植物表达载体 | 第46-48页 |
| 2.2 丹参发根的遗传转化和培养 | 第48-50页 |
| 2.3 发根的阳性鉴定 | 第50-51页 |
| 2.4 发根的液培 | 第51页 |
| 3 实验结果 | 第51-53页 |
| 3.1 丹参发根的继代培养 | 第51-52页 |
| 3.2 丹参转化发根的PCR检测 | 第52-53页 |
| 4 小结与讨论 | 第53-54页 |
| 第四章 MYC2-RNAi转基因发根中基因表达分析 | 第54-61页 |
| 1 实验材料 | 第54-55页 |
| 1.1 植物材料 | 第54页 |
| 1.2 试剂与药品 | 第54页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第54-55页 |
| 2 实验方法 | 第55-58页 |
| 2.1 丹参发根RNA的提取及检测 | 第55页 |
| 2.2 第一链cDNA的合成 | 第55页 |
| 2.3 QRT-PCR引物的设计及验证 | 第55-57页 |
| 2.4 QRT-PCR检测 | 第57-58页 |
| 3 实验结果 | 第58-60页 |
| 4 小结与讨论 | 第60-61页 |
| 第五章 MYC2-RNAi转基因发根中化学成分的含量测定 | 第61-67页 |
| 1 实验材料 | 第61页 |
| 1.1 植物材料 | 第61页 |
| 1.2 试剂与药品 | 第61页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第61页 |
| 2 实验方法 | 第61-64页 |
| 2.1 标准品溶液的制备 | 第61-62页 |
| 2.2 供试品溶液的制备 | 第62页 |
| 2.3 色谱分离条件 | 第62-63页 |
| 2.4 质谱检测条件 | 第63页 |
| 2.5 两点法测定样品含量 | 第63-64页 |
| 3 实验结果 | 第64-66页 |
| 4 小结与讨论 | 第66-67页 |
| 第六章 MYC2对关键酶基因的调控 | 第67-78页 |
| 1 实验材料 | 第67-68页 |
| 1.1 菌株和质粒 | 第67页 |
| 1.2 试剂与药品 | 第67页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第67-68页 |
| 2 实验方法 | 第68-75页 |
| 2.1 原核表达载体构建 | 第68-69页 |
| 2.2 目的蛋白的诱导表达 | 第69-70页 |
| 2.3 SDS-PAGE检测表达的目的蛋白 | 第70-71页 |
| 2.4 目的蛋白的纯化 | 第71-72页 |
| 2.5 目的蛋白的除盐和浓缩 | 第72页 |
| 2.6 目的蛋白的定量 | 第72页 |
| 2.7 探针的设计 | 第72-73页 |
| 2.8 EMSA实验 | 第73-75页 |
| 3 实验结果 | 第75-77页 |
| 3.1 目的蛋白的诱导表达结果 | 第75-76页 |
| 3.2 EMSA实验 | 第76-77页 |
| 4 小结与讨论 | 第77-78页 |
| 第七章 SmJAZ1/2的获得及其与MYC2的互作 | 第78-95页 |
| 1 实验材料 | 第78-79页 |
| 1.1 植物材料 | 第78页 |
| 1.2 菌株和质粒 | 第78页 |
| 1.3 试剂与药品 | 第78页 |
| 1.4 主要仪器设备 | 第78-79页 |
| 2 实验方法 | 第79-83页 |
| 2.1 SmJAZ序列的获得、生信分析、器官表达和MeJA诱导分析 | 第79-80页 |
| 2.2 酵母双杂交载体的构建 | 第80-83页 |
| 3 实验结果 | 第83-93页 |
| 3.1 SmJAZ序列的获得、生信分析、器官表达和MeJA诱导分析 | 第83-92页 |
| 3.2 酵母双杂交实验 | 第92-93页 |
| 4 小结与讨论 | 第93-95页 |
| 第八章 研究总结 | 第95-97页 |
| 参考文献 | 第97-100页 |
| 附录 | 第100-107页 |
| 致谢 | 第107-108页 |
| 文献综述 | 第108-116页 |
| 参考文献 | 第113-116页 |
| 个人简历 | 第116页 |
