| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第10-15页 |
| 1.1 聚合物胶束 | 第10页 |
| 1.2 刺激响应型聚合物胶束 | 第10-11页 |
| 1.3 HA介导的靶向药物传递 | 第11页 |
| 1.4 细胞摄取 | 第11-12页 |
| 1.4.1 细胞摄取途径 | 第11-12页 |
| 1.4.2 纳米粒子粒径的影响 | 第12页 |
| 1.5 肿瘤多药耐药 | 第12-13页 |
| 1.5.1 MDR产生机制 | 第12-13页 |
| 1.5.2 MDR逆转策略 | 第13页 |
| 1.6 本文主要研究内容及意义 | 第13-15页 |
| 第二章 不同取代度的HOA聚合物的制备及细胞摄取研究 | 第15-28页 |
| 2.1 引言 | 第15页 |
| 2.2 材料 | 第15-16页 |
| 2.2.1 仪器 | 第15页 |
| 2.2.2 试剂 | 第15-16页 |
| 2.2.3 细胞株 | 第16页 |
| 2.3 实验方法 | 第16-19页 |
| 2.3.1 HOA的合成 | 第16-17页 |
| 2.3.2 HOA空白胶束及DOX/HOA胶束的制备 | 第17-18页 |
| 2.3.2.1 脱盐阿霉素的制备 | 第17页 |
| 2.3.2.2 HOA空白胶束的制备 | 第17页 |
| 2.3.2.3 DOX/HOA载药胶束的制备 | 第17-18页 |
| 2.3.3 空白胶束的血清稳定性 | 第18页 |
| 2.3.4 DOX/HOA的粒径、zeta电位和形貌观察 | 第18页 |
| 2.3.5 DOX/HOA的包封率和载药量的测定 | 第18页 |
| 2.3.5.1 DOX吸收波长的确定及标准曲线的制备 | 第18页 |
| 2.3.5.2 包封率和载药量测定 | 第18页 |
| 2.3.6 体外药物释放行为考察 | 第18-19页 |
| 2.3.7 胶束的细胞毒性评价 | 第19页 |
| 2.3.8 细胞摄取实验 | 第19页 |
| 2.3.8.1 荧光显微镜定性观察 | 第19页 |
| 2.3.8.2 流式细胞仪定量观察 | 第19页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第19-27页 |
| 2.4.1 HOA的合成与表征 | 第19-20页 |
| 2.4.2 HOA胶束的血清稳定性 | 第20-21页 |
| 2.4.3 载药胶束的粒径、zeta电位和形貌观察 | 第21-22页 |
| 2.4.4 DOX/HOA的包封率和载药量的测定 | 第22-23页 |
| 2.4.4.1 DOX吸收波长的确定及标准曲线的制备 | 第22-23页 |
| 2.4.4.2 包封率和载药量测定 | 第23页 |
| 2.4.5 DOX/HOA胶束的体外药物释放行为 | 第23-24页 |
| 2.4.6 空白载体及载药胶束的体外毒性实验 | 第24-25页 |
| 2.4.6.1 空白载体体外毒性 | 第24页 |
| 2.4.6.2 载药胶束的体外毒性 | 第24-25页 |
| 2.4.7 细胞摄取实验 | 第25-27页 |
| 2.4.7.1 荧光显微镜定性观察 | 第25-26页 |
| 2.4.7.2 流式细胞仪定量观察 | 第26-27页 |
| 2.5 本章小结 | 第27-28页 |
| 第三章 pH敏感HOD聚合物的制备及抗肿瘤活性研究 | 第28-45页 |
| 3.1 引言 | 第28-29页 |
| 3.2 材料 | 第29-30页 |
| 3.2.1 仪器 | 第29页 |
| 3.2.2 试剂 | 第29页 |
| 3.2.3 细胞株及动物 | 第29-30页 |
| 3.3 实验方法 | 第30-34页 |
| 3.3.1 OD的合成 | 第30-31页 |
| 3.3.2 HOD的合成 | 第31页 |
| 3.3.3 HOD的临界胶束浓度测定 | 第31页 |
| 3.3.4 空白胶束及载药胶束的制备 | 第31-32页 |
| 3.3.5 pH敏感性考察 | 第32页 |
| 3.3.6 粒径、zeta电位和形貌观察 | 第32页 |
| 3.3.7 包封率和载药量的测定 | 第32页 |
| 3.3.8 体外pH敏感释放行为考察 | 第32页 |
| 3.3.9 胶束的细胞毒性评价 | 第32页 |
| 3.3.10 载药胶束的细胞摄取 | 第32-33页 |
| 3.3.10.1 荧光显微镜定性观察 | 第32页 |
| 3.3.10.2 流式细胞仪定量观察 | 第32-33页 |
| 3.3.11 DOX/HOD胶束的细胞摄取机制 | 第33页 |
| 3.3.11.1 能量依赖考察 | 第33页 |
| 3.3.11.2 抑制剂毒性考察 | 第33页 |
| 3.3.11.3 细胞摄取机制考察 | 第33页 |
| 3.3.12 胞内pH触发的DOX/HOD胶束药物释放 | 第33-34页 |
| 3.3.13 荷瘤裸鼠活体成像实验 | 第34页 |
| 3.3.13.1 MCF-7/ADR荷瘤裸鼠模型的建立 | 第34页 |
| 3.3.13.2 活体荧光成像实验 | 第34页 |
| 3.4 实验结果 | 第34-44页 |
| 3.4.1 OD与HOD的合成与表征 | 第34-35页 |
| 3.4.2 HOD的CMC测定 | 第35页 |
| 3.4.3 HOD空白胶束的体外pH敏感性 | 第35-36页 |
| 3.4.4 粒径、zeta电位和形貌观察 | 第36-37页 |
| 3.4.5 包封率和载药量的测定 | 第37页 |
| 3.4.6 体外pH敏感药物释放实验 | 第37-38页 |
| 3.4.7 体外毒性实验 | 第38-39页 |
| 3.4.7.1 空白载体体外毒性 | 第38页 |
| 3.4.7.2 载药胶束的体外毒性 | 第38-39页 |
| 3.4.8 细胞摄取实验 | 第39-41页 |
| 3.4.8.1 荧光显微镜定性观察 | 第39-40页 |
| 3.4.8.2 流式细胞仪定量观察 | 第40-41页 |
| 3.4.9 DOX/HOD胶束的细胞摄取机制 | 第41-43页 |
| 3.4.9.1 能量依赖考察 | 第41-42页 |
| 3.4.9.2 抑制剂毒性考察 | 第42-43页 |
| 3.4.10 胞内pH触发的DOX/HOD胶束药物释放 | 第43页 |
| 3.4.11 荷瘤裸鼠活体成像实验 | 第43-44页 |
| 3.5 本章小结 | 第44-45页 |
| 第四章 载DOX-NN-VES的HOD胶束的制备及其逆转肿瘤MDR研究 | 第45-67页 |
| 4.1 引言 | 第45-46页 |
| 4.2 实验材料 | 第46-48页 |
| 4.2.1 实验仪器 | 第46-47页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第47页 |
| 4.2.3 细胞株及动物 | 第47-48页 |
| 4.3 实验方法 | 第48-52页 |
| 4.3.1 DOX-NN-VES的合成与表征 | 第48-49页 |
| 4.3.2 载药胶束的制备 | 第49页 |
| 4.3.3 粒径、zeta电位和形貌观察 | 第49页 |
| 4.3.4 载药胶束的血清稳定性 | 第49页 |
| 4.3.5 载药胶束的包封率和载药量的测定 | 第49页 |
| 4.3.6 体外pH敏感药物释放行为考察 | 第49-50页 |
| 4.3.7 胶束的细胞毒性评价 | 第50页 |
| 4.3.7.1 细胞培养 | 第50页 |
| 4.3.7.2 体外毒性实验及耐药指数和逆转耐药指数的计算 | 第50页 |
| 4.3.8 载药胶束的细胞摄取 | 第50页 |
| 4.3.8.1 CLSM定性观察 | 第50页 |
| 4.3.8.2 流式细胞仪定性量观察 | 第50页 |
| 4.3.9 DNVM在MCF-7/ADR细胞内的药物释放 | 第50-51页 |
| 4.3.10 药物的摄取与外排实验 | 第51页 |
| 4.3.11 活性氧含量测定 | 第51页 |
| 4.3.12 药物对P-gp及凋亡相关蛋白表达的影响 | 第51-52页 |
| 4.3.13 体内抗肿瘤活性研究 | 第52页 |
| 4.4 实验结果 | 第52-65页 |
| 4.4.1 DOX-NN-VES的合成与表征 | 第52-54页 |
| 4.4.2 粒径、zeta电位和形貌观察 | 第54-55页 |
| 4.4.3 不同载药胶束的包封率和载药量的测定 | 第55页 |
| 4.4.4 载药胶束的血清稳定性 | 第55-56页 |
| 4.4.5 体外pH敏感药物释放 | 第56页 |
| 4.4.6 载药胶束的体外毒性实验 | 第56-58页 |
| 4.4.7 载药胶束的细胞摄取 | 第58-61页 |
| 4.4.7.1 MCF-7 细胞的摄取 | 第58-59页 |
| 4.4.7.2 MCF-7/ADR细胞的摄取 | 第59-61页 |
| 4.4.8 DNVM在MCF-7/ADR细胞内的药物释放 | 第61页 |
| 4.4.9 药物的摄取与外排实验 | 第61-62页 |
| 4.4.10 活性氧含量测定 | 第62-63页 |
| 4.4.11 药物对P-gp及凋亡相关蛋白表达的影响 | 第63-64页 |
| 4.4.11.1 药物对P-gp表达的抑制作用 | 第63页 |
| 4.4.11.2 药物对凋亡相关蛋白表达的影响 | 第63-64页 |
| 4.4.12 体内抗肿瘤活性研究 | 第64-65页 |
| 4.5 本章小结 | 第65-67页 |
| 主要结论与展望 | 第67-69页 |
| 主要结论 | 第67页 |
| 展望 | 第67-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-77页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第77页 |
