摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英文缩写词 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-18页 |
1.1 线虫的概述 | 第10-12页 |
1.1.1 根结线虫的生物学特性 | 第10页 |
1.1.2 根结线虫的致病机理 | 第10页 |
1.1.3 根结线虫致病的症状 | 第10-11页 |
1.1.4 根结线虫的防治 | 第11-12页 |
1.2 线虫ACh E的研究进展 | 第12-16页 |
1.2.1 线虫ACh E的作用机理 | 第12-13页 |
1.2.2 线虫ACh E分子型 | 第13页 |
1.2.3 线虫ACh E基因型 | 第13-15页 |
1.2.4 线虫ACh E药理学特性 | 第15-16页 |
1.3 本课题来源及研究内容 | 第16页 |
1.3.1 课题来源 | 第16页 |
1.3.2 主要内容 | 第16页 |
1.4 实验目的意义及技术路线 | 第16-18页 |
1.4.1 实验目的及意义 | 第16-17页 |
1.4.2 技术路线 | 第17-18页 |
第二章 Mi-ace-3 基因克隆和序列分析 | 第18-33页 |
2.1 材料与方法 | 第18-26页 |
2.1.1 主要仪器 | 第18-19页 |
2.1.2 主要试剂 | 第19页 |
2.1.3 菌株及载体 | 第19页 |
2.1.4 主要培养基及溶液的配制 | 第19-20页 |
2.1.5 主要材料 | 第20页 |
2.1.6 Mi-ace-3 基因全长引物的设计 | 第20-21页 |
2.1.7 南方根结线虫总RNA的提取 | 第21-22页 |
2.1.8 c DNA第一链的合成 | 第22页 |
2.1.9 3′c DNA末端快速扩增 | 第22-23页 |
2.1.10 克隆测序 | 第23-25页 |
2.1.11 Mi-ace-3 全长的克隆 | 第25-26页 |
2.1.12 乙酰胆碱酯酶基因序列分析 | 第26页 |
2.2 结果与分析 | 第26-31页 |
2.2.1 南方根结线虫总RNA提取结果 | 第26-27页 |
2.2.2 Mi-ace-3 基因的克隆 | 第27-28页 |
2.2.3 Mi-ace-3 基因的序列分析 | 第28-30页 |
2.2.4 乙酰胆碱酯酶基因的系谱分析 | 第30-31页 |
2.3 结论与讨论 | 第31-33页 |
第三章 Mi-aces基因在南方根结线虫不同发育阶段的表达量分析 | 第33-38页 |
3.1 材料与方法 | 第33-35页 |
3.1.1 主要仪器 | 第33页 |
3.1.2 主要试剂 | 第33页 |
3.1.3 引物设计 | 第33-34页 |
3.1.4 主要材料 | 第34页 |
3.1.5 南方根结线虫(M. incognita)各龄幼虫的收集 | 第34页 |
3.1.6 南方根结线虫(M. incognita)总RNA的提取 | 第34页 |
3.1.7 c DNA第一链的合成 | 第34-35页 |
3.1.8 q RT-PCR分析Mi-aces基因在南方根结线虫(M. incognita)不同发育阶段的表达模式 | 第35页 |
3.2 结果与分析 | 第35-36页 |
3.2.1 q RT-PCR分析Mi-aces基因表达模式 | 第35-36页 |
3.3 结论与讨论 | 第36-38页 |
第四章 植物介导的RNAi分析Mi-aces基因的功能 | 第38-47页 |
4.1 材料与方法 | 第38-42页 |
4.1.1 主要仪器 | 第38页 |
4.1.2 主要试剂 | 第38页 |
4.1.3 菌株及载体 | 第38页 |
4.1.4 主要材料 | 第38页 |
4.1.5 引物设计 | 第38-39页 |
4.1.6 南方根结线虫(M. incognita)总RNA的提取 | 第39页 |
4.1.7 c DNA第一链的合成 | 第39页 |
4.1.8 RNAi载体的构建 | 第39-41页 |
4.1.9 植物介导RNAi对Mi-aces表达量的影响 | 第41-42页 |
4.1.10 数据分析 | 第42页 |
4.2 结果与分析 | 第42-45页 |
4.2.1 RT-PCR验证RNAi烟草 | 第42页 |
4.2.2 q RT-PCR检测Mi-aces基因表达水平 | 第42-43页 |
4.2.3 Mi-aces RNAi烟草对南方根结线虫侵染力的影响 | 第43-45页 |
4.3 结论与讨论 | 第45-47页 |
第五章 总结与展望 | 第47-49页 |
5.1 总结 | 第47-48页 |
5.1.1 Mi-ace-3 基因的克隆和序列分析 | 第47页 |
5.1.2 转录表达分析 | 第47页 |
5.1.3 植物介导的RNAi分析3个Mi-aces基因功能 | 第47-48页 |
5.2 展望 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-54页 |
致谢 | 第54页 |