| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| 1.1 CRISPR/Cas系统 | 第12-20页 |
| 1.1.1 CRISPR/Cas系统的研究历史 | 第12-13页 |
| 1.1.2 CRISPR/Cas系统的基本结构和类型 | 第13-15页 |
| 1.1.3 CRISPR/Cas系统的作用机制 | 第15-16页 |
| 1.1.4 作为基因组编辑技术CRISPR/Cas系统与ZFN,TELEN的比较 | 第16-18页 |
| 1.1.5 CRISPR系统的应用与发展 | 第18-20页 |
| 1.2 IAA2研究背景 | 第20-22页 |
| 1.3 小立碗藓的研究进展 | 第22-24页 |
| 第二章 材料和方法 | 第24-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第24页 |
| 2.2 原始载体 | 第24-25页 |
| 2.3 入门载体的构建 | 第25-29页 |
| 2.3.1 gRNA靶位点的选择 | 第25-26页 |
| 2.3.2 单个gRNA表达框的扩增 | 第26-28页 |
| 2.3.3 三个gRNA表达框的扩增和串联 | 第28页 |
| 2.3.4 转化及阳性克隆鉴定 | 第28-29页 |
| 2.4 目的载体的构建 | 第29页 |
| 2.5 表达载体的构建 | 第29-30页 |
| 2.6 转基因、筛选及种子萌发 | 第30-32页 |
| 2.6.1 拟南芥的培养 | 第30-31页 |
| 2.6.2 电转化 | 第31页 |
| 2.6.3 转基因 | 第31-32页 |
| 2.6.4 筛选 | 第32页 |
| 2.6.5 种子萌发 | 第32页 |
| 2.7 数据收集 | 第32-33页 |
| 2.7.1 DNA水平的数据收集 | 第32-33页 |
| 2.7.2 目的基因的扩增 | 第33页 |
| 2.7.3 突变体的检测 | 第33页 |
| 2.8 小立碗藓原丝体的培养 | 第33-34页 |
| 2.9 小立碗藓原生质体的制备 | 第34页 |
| 2.10 PEG介导的转化 | 第34-36页 |
| 第三章 实验结果 | 第36-46页 |
| 3.1 序列查找与靶位点设计 | 第36页 |
| 3.2 两轮PCR法串联多个gRNA表达框的优点 | 第36-38页 |
| 3.3 拟南芥IAA2 T_0代突变的鉴定 | 第38-39页 |
| 3.4 拟南芥IAA2 T_1代突变的鉴定 | 第39-41页 |
| 3.5 IAA2突变体测序结果及突变形式 | 第41-43页 |
| 3.6 表型观察与分析 | 第43-44页 |
| 3.7 PEG介导的小立碗藓原生质体转基因 | 第44-46页 |
| 第四章 讨论 | 第46-51页 |
| 参考文献 | 第51-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 附录 | 第60-63页 |