摘要 | 第1-3页 |
Abstract | 第3-4页 |
中文文摘 | 第4-6页 |
目录 | 第6-9页 |
绪论 | 第9-21页 |
·红曲概述 | 第9-11页 |
·红曲霉和红曲简介 | 第9页 |
·红曲霉的次生代谢产物 | 第9-11页 |
·红曲霉产品中桔霉素的问题及其解决途径 | 第11-16页 |
·桔霉素(citrinin) | 第11-12页 |
·桔霉素合成相关基因的探究 | 第12-13页 |
·桔霉素的检测方法 | 第13-14页 |
·低桔霉素红曲霉菌株的选育 | 第14-16页 |
·丝状真菌转化的方法 | 第16-19页 |
·PEG介导原生质体的传统转化方法 | 第16-17页 |
·电击转化法 | 第17页 |
·农杆菌介导的转化(ATMT)法 | 第17-18页 |
·限制性酶介导整合(REMI)的转化方法 | 第18页 |
·基因枪法(Particle gun) | 第18-19页 |
·课题的研究的意义以及主要内容 | 第19-21页 |
第一章 桔霉素基因改造 | 第21-43页 |
·前言 | 第21-23页 |
·材料与方法 | 第23-33页 |
·菌株 | 第23页 |
·主要试剂 | 第23页 |
·主要培养基 | 第23-24页 |
·主要仪器和设备 | 第24页 |
·实验方法 | 第24-33页 |
·结果与分析 | 第33-41页 |
·红曲霉菌株MQ-01基因组DNA | 第33-34页 |
·桔霉素关键酶编码基因DNA的克隆 | 第34-35页 |
·桔霉素克隆载体pBCTD的构建 | 第35-38页 |
·桔霉素敲除载体(pBCTD762-9)的构建 | 第38-41页 |
·小结 | 第41-43页 |
第二章 原生质体制备与限制性内切酶介导转化 | 第43-55页 |
·前言 | 第43页 |
·材料与方法 | 第43-46页 |
·菌株与质粒 | 第43页 |
·主要试剂 | 第43页 |
·主要培养基 | 第43-44页 |
·主要仪器和设备 | 第44页 |
·试验方法 | 第44-46页 |
·结果与分析 | 第46-53页 |
·酶解体系的选择 | 第46-49页 |
·原生质体再生条件的选择 | 第49-50页 |
·原生质体转化方法的建立 | 第50-52页 |
·阳性转化子的筛选 | 第52-53页 |
·小结 | 第53-55页 |
第三章 原始菌株MQ-01与改造菌株MN-02产红曲色素和桔霉素的比较 | 第55-65页 |
·前言 | 第55页 |
·材料与方法 | 第55-57页 |
·菌株 | 第55页 |
·主要试剂 | 第55-56页 |
·主要培养基 | 第56页 |
·主要仪器设备 | 第56页 |
·实验方法 | 第56-57页 |
·结果与分析 | 第57-62页 |
·原始菌株MQ-01与改造菌株MN-02色价比较 | 第57-58页 |
·原始菌株MQ-01与改造菌株MN-02产桔霉素的HPLC分析 | 第58-62页 |
·小结 | 第62-65页 |
第四章 总结与展望 | 第65-67页 |
·主要工作总结 | 第65-66页 |
·工作展望 | 第66-67页 |
附录1 英文缩写词表 | 第67-69页 |
附录2 红曲霉桔霉素编码基因核苷酸序列 | 第69-75页 |
附录3 pCSN43 trpC基因启动子和Hygromycin B抗性基因hph序列 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-85页 |
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第85-87页 |
致谢 | 第87-89页 |
个人简历 | 第89-90页 |