| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 文献综述 | 第10-19页 |
| 1.1 植物病毒病概述 | 第10-11页 |
| 1.2 WRKY与植物抗病性 | 第11页 |
| 1.3 miRNA | 第11-14页 |
| 1.3.1 miRNA的发现及其生物合成 | 第11-12页 |
| 1.3.2 miRNA的作用机理 | 第12页 |
| 1.3.3 植物内源miRNA的生物学功能 | 第12-14页 |
| 1.4 人工miRNA技术 | 第14-15页 |
| 1.4.1 amiRNA的设计 | 第14-15页 |
| 1.4.2 amiRNA在植物中的应用 | 第15页 |
| 1.5 反义寡核苷酸（asODN）的研究现状 | 第15-17页 |
| 1.5.1 asODN发挥作用的机理 | 第15-16页 |
| 1.5.2 asODN在基因工程中的应用 | 第16-17页 |
| 1.6 小结与展望 | 第17-19页 |
| 2 引言 | 第19-22页 |
| 2.1 研究目的及意义 | 第19-20页 |
| 2.2 研究路线 | 第20页 |
| 2.3 研究内容 | 第20-22页 |
| 3 实验材料与方法 | 第22-28页 |
| 3.1 实验材料 | 第22页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第22页 |
| 3.1.2 病毒材料 | 第22页 |
| 3.1.3 表达载体与菌体 | 第22页 |
| 3.2 实验试剂与仪器 | 第22-23页 |
| 3.2.1 实验所用主要试剂 | 第22页 |
| 3.2.2 培养基及抗生素的制备 | 第22-23页 |
| 3.2.3 实验所用主要仪器 | 第23页 |
| 3.3 实验方法 | 第23-28页 |
| 3.3.1 烟草模板DNA的提取 | 第23页 |
| 3.3.2 RNA提取及cDNA的合成 | 第23页 |
| 3.3.3 生物信息学分析 | 第23-24页 |
| 3.3.4 质粒的构建 | 第24页 |
| 3.3.5 农杆菌介导转化烟草获得转基因植株 | 第24-25页 |
| 3.3.6 转基因植株的扩繁 | 第25页 |
| 3.3.7 病毒侵染 | 第25页 |
| 3.3.8 asODN烟草处理 | 第25-26页 |
| 3.3.9 基因的定量分析 | 第26-28页 |
| 4 实验结果与分析 | 第28-35页 |
| 4.1 烟草NtWRKY40对病毒侵染的响应 | 第28-30页 |
| 4.1.1 NtWRKY40的生物信息学分析 | 第28页 |
| 4.1.2 NtWRKY40过表达转基因烟草植株的获得 | 第28-29页 |
| 4.1.3 NtWRKY40过表达植株对植物病毒的抗病分析 | 第29-30页 |
| 4.2 amiR167-PVY抗马铃薯Y型病毒实验 | 第30-33页 |
| 4.2.1 amiR167-PVY转基因烟草植株的获得 | 第30页 |
| 4.2.2 amiR167-PVY转基因烟草植株的定量分析 | 第30-31页 |
| 4.2.3 amiR167-PVY转基因烟草植株抗病毒实验 | 第31-33页 |
| 4.3 asODN抗病毒实验 | 第33-35页 |
| 4.3.1 染病烟草中病毒的分布状况 | 第33页 |
| 4.3.2 染病烟草中asODN对TMV的影响 | 第33-35页 |
| 5 讨论 | 第35-39页 |
| 5.1 WRKY家族基因在病毒防御信号中的作用 | 第35-36页 |
| 5.2 amiRNA骨架和病毒靶基因位点的选择 | 第36-37页 |
| 5.3 asODN对病毒基因的作用 | 第37页 |
| 5.4 病毒病害与茶树育种 | 第37-39页 |
| 6 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-48页 |
| 附表 | 第48-49页 |
| 附录 英文缩写及注释 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 作者简介 | 第51页 |
