| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 文献综述 | 第11-16页 |
| 1 草莓镶脉病毒研究现状 | 第11-13页 |
| 1.1 草莓镶脉病毒危害以及分布 | 第11页 |
| 1.2 草莓镶脉病毒基因组结构和编码的蛋白 | 第11-13页 |
| 2 运动蛋白的研究进展 | 第13-14页 |
| 2.1 病毒的运动蛋白 | 第13页 |
| 2.2 运动蛋白的作用方式 | 第13-14页 |
| 2.3 运动蛋白介导病毒在细胞间运动的机制 | 第14页 |
| 2.4 植物病毒在寄主植物内的移动 | 第14页 |
| 3 蛋白质互作技术 | 第14-15页 |
| 3.1 双分子荧光互补技术 | 第14-15页 |
| 3.2 酵母双杂交技术 | 第15页 |
| 4 原核表达和抗血清的制备 | 第15页 |
| 5 凝胶阻滞实验 | 第15-16页 |
| 引言 | 第16-17页 |
| 材料与方法 | 第17-24页 |
| 1 试验材料 | 第17页 |
| 1.1 病样来源 | 第17页 |
| 1.2 植物材料 | 第17页 |
| 1.3 菌种和载体 | 第17页 |
| 1.4 酶和化学试剂 | 第17页 |
| 1.5 所用抗生素 | 第17页 |
| 2 试验方法 | 第17-24页 |
| 2.1 总DNA的提取 | 第17-18页 |
| 2.2 感受态细胞的制备 | 第18页 |
| 2.3 PCR产物的克隆及转化 | 第18页 |
| 2.3.1 PCR产物回收和纯化 | 第18页 |
| 2.3.2 连接产物转化DH5α感受态细胞 | 第18页 |
| 2.4 提取重组质粒 | 第18页 |
| 2.5 鉴定重组质粒 | 第18-19页 |
| 2.6 农杆菌浸润实验 | 第19页 |
| 2.7 SVBV MP基因的鉴定 | 第19-21页 |
| 2.7.1 引物设计 | 第19-20页 |
| 2.7.2 目的片段的克隆 | 第20页 |
| 2.7.3 表达载体的构建 | 第20页 |
| 2.7.4 表达载体转化农杆菌 | 第20页 |
| 2.7.5 农杆菌浸润 | 第20页 |
| 2.7.6 共聚焦显微镜观察 | 第20-21页 |
| 2.8 SVBV P1蛋白与CP蛋白的互作 | 第21-22页 |
| 2.8.1 引物设计 | 第21页 |
| 2.8.2 双分子荧光互补（BiFC）表达载体的构建 | 第21-22页 |
| 2.8.3 农杆菌转化及接种 | 第22页 |
| 2.8.4 共聚焦显微镜观察 | 第22页 |
| 2.8.5 酵母双杂交（Y2H）表达载体的构建 | 第22页 |
| 2.8.6 酵母双杂交 | 第22页 |
| 2.9 SVBV P1基因的原核表达 | 第22-24页 |
| 2.9.1 SVBV P1基因的克隆 | 第22页 |
| 2.9.2 原核表达载体的构建 | 第22-23页 |
| 2.9.3 融合蛋白的表达、纯化及抗血清的制备 | 第23页 |
| 2.9.4 凝胶阻滞实验 | 第23-24页 |
| 结果与分析 | 第24-34页 |
| 1 SVBV MP蛋白的鉴定 | 第24-28页 |
| 1.1 SVBV P1基因的克隆 | 第24页 |
| 1.2 P1在烟草表皮细胞中的亚细胞定位 | 第24-26页 |
| 1.2.1 重组表达载体的构建 | 第24页 |
| 1.2.2 P1的亚细胞定位 | 第24-26页 |
| 1.3 P1与MPTMV的共定位 | 第26页 |
| 1.4 P1的胞间运动 | 第26-27页 |
| 1.5 P1的运动回补功能 | 第27-28页 |
| 1.5.1 SVBV P1植物表达载体的构建 | 第27页 |
| 1.5.2 P1互补运动缺陷型病毒载体PVX(△P25)-GFP的功能 | 第27-28页 |
| 2 SVBV P1蛋白与CP蛋白互作的验证 | 第28-31页 |
| 2.1 BiFC验证P1与P4的互作 | 第28-29页 |
| 2.1.1 BIFC表达载体构建 | 第28-29页 |
| 2.1.2 用BiFC系统验证SVBV P1蛋白与P4蛋白的互作 | 第29页 |
| 2.2 酵母双杂交验证P1与P4的互作 | 第29-30页 |
| 2.2.1 酵母双杂交系统载体构建 | 第29-30页 |
| 2.3 SVBV P1蛋白与dsDNA结合能力的验证 | 第30-31页 |
| 3 SVBV P1蛋白的原核表达及其多抗血清的制备 | 第31-34页 |
| 3.1 SVBV P1基因的克隆及其原核表达载体的构建 | 第31-32页 |
| 3.2 pET-32a-P1融合蛋白的表达与抗血清的制备 | 第32-34页 |
| 3.2.1 融合蛋白的诱导表达与纯化 | 第32页 |
| 3.2.2 抗血清的制备与Western blot分析 | 第32-34页 |
| 讨论 | 第34-36页 |
| 参考文献 | 第36-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 作者简介 | 第43页 |
