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番鸭白细胞介素-6基因的克隆与序列分析

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
第一部分 综述第11-24页
 1 细胞因子第11-13页
   ·细胞因子概述第11页
   ·细胞因子生物学功能第11-12页
   ·细胞因子的免疫学研究第12-13页
 2 白细胞介素第13-14页
   ·白细胞介素的来源第13页
   ·白细胞介素的分类及结构第13-14页
   ·白细胞介素的生物学功能第14页
 3 IL-6 的研究进展第14-20页
   ·IL-6 的来源及生物学活性第14-15页
   ·IL-6 的结构第15-16页
   ·IL-6 受体与信号传导第16-17页
   ·IL-6 基因的克隆第17-18页
   ·IL-6 在畜禽业中的应用前景第18-20页
     ·对神经系统的治疗作用第18页
     ·在免疫系统的保护作用第18-20页
 4 RACE 实验技术进展第20-22页
   ·5’RACE 研究进展第20-21页
     ·5’RACE 原理第20-21页
     ·5’RACE 的改进第21页
   ·3’RACE 试验进展第21-22页
 5 本试验的研究意义第22-24页
第二部分 研究报告第24-68页
 1 试验材料第24-26页
   ·试验动物第24页
   ·质粒和菌株第24页
   ·试验试剂第24页
   ·主要试验仪器设备第24-25页
   ·主要溶液的配制第25-26页
 2 试验方法第26-39页
   ·番鸭IL-6 基因序列的测定第26-29页
     ·番鸭脾淋巴细胞的分离和总RNA 的提取第26-27页
     ·番鸭IL-6 基因片段的RT-PCR第27-29页
     ·番鸭IL-6 阳性克隆菌株的序列测定与分析第29页
   ·RACE 试验第29-35页
     ·已知序列验证第29-31页
     ·3’RACE 试验第31-32页
     ·5’RACE 试验第32-34页
     ·5’及3’RACE 序列验证第34-35页
     ·番鸭IL-6 序列同源性比较第35页
   ·番鸭IL-6 基因片段的克隆第35-39页
     ·番鸭 IL-6 基因片段特异性引物的设计与合成第35页
     ·番鸭IL-6 基因片段的RT-PCR 反应第35-36页
     ·PCR 反应扩增番鸭IL-6 基因片段第36页
     ·PCR 产物纯化第36-37页
     ·感受态细胞的制备(氯化钙法)第37页
     ·IL-6 目的基因片段与pMD-18T 载体的连接及转化第37-38页
     ·重组质粒少量提取第38页
     ·重组质粒的鉴定第38-39页
     ·番鸭IL-6 阳性克隆菌株的序列测定与分析第39页
 3 试验结果与分析第39-62页
   ·番鸭IL-6 基因片段测序结果第39-41页
     ·提取的总RNA 电泳结果第39页
     ·番鸭IL-6 基因片段RT-PCR 扩增结果第39-40页
     ·番鸭IL-6 基因序列测定结果第40-41页
   ·RACE 试验结果第41-58页
     ·已知序列验证第41-42页
     ·3’RACE PCR 扩增结果第42页
     ·5’RACE 序列PCR 扩增结果第42-43页
     ·3’RACE 及 5’RACE 测序结果第43-44页
     ·5’及3’RACE 序列验证结果第44页
     ·番鸭IL-6 基因序列同源性分析第44-52页
     ·番鸭IL-6 的氨基酸序列同源性分析第52-58页
   ·番鸭IL-6 克隆结果第58-62页
     ·番鸭IL-6 基因片段的RT-PCR 扩增结果第58页
     ·重组质粒pMD-18T/IL-6 的酶切鉴定第58-59页
     ·重组质粒pMD-18T/IL-6 的PCR 鉴定第59页
     ·番鸭IL-6 克隆基因序列分析第59-61页
     ·氨基酸序列同源性分析第61-62页
 4 讨论第62-68页
   ·RACE 试验第63-65页
     ·RACE 引物设计第63页
     ·RACE 试验的条件优化第63-65页
     ·番鸭IL-6 核苷酸序列分析第65页
     ·番鸭IL-6 氨基酸序列分析第65页
     ·番鸭IL-6 抗原位点分析第65页
   ·番鸭 IL-6 基因片段的克隆第65-67页
     ·番鸭IL-6 基因片段的克隆第65-66页
     ·番鸭IL-6 克隆序列的核苷酸分析第66页
     ·番鸭IL-6 氨基酸序列分析第66-67页
   ·研究展望第67-68页
第三部分 结论第68-69页
参考文献第69-75页
致谢第75页

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