盐胁迫下发菜多糖代谢相关差异表达基因的克隆与原核表达
| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 1 绪论 | 第12-22页 |
| 1.1 发菜概述 | 第12-14页 |
| 1.1.1 发菜简介 | 第12页 |
| 1.1.2 发菜生理特性 | 第12-13页 |
| 1.1.3 发菜人工培养 | 第13页 |
| 1.1.4 发菜分子生物学相关研究 | 第13-14页 |
| 1.2 发菜多糖概述 | 第14-15页 |
| 1.2.1 发菜多糖的结构 | 第14页 |
| 1.2.2 发菜多糖的生物活性 | 第14-15页 |
| 1.3 发菜与盐胁迫 | 第15-16页 |
| 1.3.1 盐胁迫简介 | 第15页 |
| 1.3.2 盐胁迫对发菜的影响 | 第15-16页 |
| 1.4 微生物多糖的生物合成 | 第16-19页 |
| 1.4.1 微生物多糖的合成过程 | 第16-19页 |
| 1.4.2 微生物多糖合成基因簇的研究 | 第19页 |
| 1.5 发菜多糖代谢相关基因的筛选 | 第19-21页 |
| 1.6 本课题研究目的及研究内容 | 第21-22页 |
| 1.6.1 研究目的及意义 | 第21页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第21-22页 |
| 2 发菜多糖代谢相关基因克隆及序列分析 | 第22-51页 |
| 2.1 引言 | 第22页 |
| 2.2 材料与设备 | 第22-24页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第22页 |
| 2.2.2 主要实验试剂 | 第22-23页 |
| 2.2.3 主要实验仪器与设备 | 第23-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-27页 |
| 2.3.1 发菜细胞培养 | 第24-25页 |
| 2.3.2 发菜基因组DNA的提取 | 第25页 |
| 2.3.3 引物设计 | 第25页 |
| 2.3.4 目的基因PCR扩增 | 第25-26页 |
| 2.3.5 PCR产物回收 | 第26页 |
| 2.3.6 目的基因与T载体连接 | 第26页 |
| 2.3.7 重组质粒转化大肠杆菌DH5α | 第26-27页 |
| 2.3.8 重组质粒提取与测序 | 第27页 |
| 2.3.9 生物信息学分析 | 第27页 |
| 2.4 结果与分析 | 第27-47页 |
| 2.4.1 发菜基因组DNA的提取 | 第27-28页 |
| 2.4.2 目的基因PCR扩增 | 第28-29页 |
| 2.4.3 目的基因TA克隆重组阳性菌株的筛选 | 第29页 |
| 2.4.4 目的基因生物信息学分析 | 第29-47页 |
| 2.5 讨论 | 第47-49页 |
| 2.5.1 发菜基因组DNA的提取 | 第47-48页 |
| 2.5.2 引物设计 | 第48页 |
| 2.5.3 生物信息学分析 | 第48-49页 |
| 2.6 本章小结 | 第49-51页 |
| 3 发菜多糖代谢相关基因的表达 | 第51-76页 |
| 3.1 引言 | 第51页 |
| 3.2 材料与设备 | 第51-52页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第51页 |
| 3.2.2 主要实验试剂 | 第51-52页 |
| 3.2.3 主要实验设备 | 第52页 |
| 3.3 实验方法 | 第52-55页 |
| 3.3.1 引物设计 | 第52页 |
| 3.3.2 目的基因PCR扩增 | 第52-53页 |
| 3.3.3 PCR产物回收 | 第53页 |
| 3.3.4 目的基因与载体酶切 | 第53页 |
| 3.3.5 目的基因与载体连接 | 第53-54页 |
| 3.3.6 重组质粒转化大肠杆菌DH5α | 第54页 |
| 3.3.7 重组质粒转化大肠杆菌BL21 | 第54页 |
| 3.3.8 目的基因的诱导表达 | 第54-55页 |
| 3.4 结果与分析 | 第55-73页 |
| 3.4.1 目的基因PCR扩增 | 第55-56页 |
| 3.4.2 阳性菌的筛选 | 第56-62页 |
| 3.4.3 目的基因的诱导表达及条件优化 | 第62-73页 |
| 3.5 讨论 | 第73-75页 |
| 3.6 本章小结 | 第75-76页 |
| 4 结论、创新点与展望 | 第76-78页 |
| 4.1 主要结论 | 第76-77页 |
| 4.2 创新点 | 第77页 |
| 4.3 展望 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-86页 |
| 附录：基因序列 | 第86-90页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第90-91页 |
