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细胞特异性的DNMT1甲基化修饰对其稳定性的调控

摘要第1-7页
Abstract第7-10页
综述第10-23页
 1 组蛋白的甲基化第11-19页
   ·组蛋白的甲基转移酶第12-14页
   ·组蛋白去甲基化酶第14-18页
   ·组蛋白甲基化与DNA甲基化第18-19页
 2 组蛋白甲基化修饰酶对非组蛋白的调控第19-21页
   ·:组蛋白甲基转移酶对非组蛋白的修饰与调控第19-20页
   ·组蛋白去甲基化酶LSD1对非组蛋白的修饰与调控第20-21页
 3 DNA甲基转移酶DNMT1第21-23页
   ·DNMT1的稳定性的调控第22-23页
材料与方法第23-42页
 1 实验材料第23-35页
   ·菌株和细胞株第23-24页
   ·质粒第24页
   ·主要试剂第24-26页
   ·主要仪器第26-28页
   ·实验试剂的配制第28-35页
 2 实验方法第35-42页
   ·细胞培养第35页
   ·细胞转染第35-36页
   ·稳定细胞株的建立第36-37页
   ·免疫染色第37页
   ·免疫沉淀第37-38页
   ·Western Blotting的实验方法第38-39页
   ·从贴壁细胞中抽提总RNA的步骤第39-40页
   ·RT-Q-PCR实验步骤第40-42页
实验结果第42-52页
 1 LSD1 的缺失使DNMT1 的蛋白稳定性下降第42页
 2 建立并检测沉默LSD1的LNCAP、2 93T及HELA稳定细胞系第42-43页
 3 LNCaP稳定细胞系中LSD1的缺失导致Dnmt1蛋白水平的下降第43-45页
 4 293T和Hela细胞中LSD1与AOF1共同参与对Dnmt1的调控第45-48页
 5 HCT116细胞内LSD1对Dnmt1稳定性没有明显的调控作用第48-50页
 6 组蛋白甲基转移酶SET7和SET8参与调控Dnmt1的稳定性第50-52页
讨论与展望第52-55页
附录第55-58页
 1 缩略词第55-56页
 2 LSD1 shRNA所用空载pGIPz-shRNA的图谱和性质第56-57页
 3 LSD1的两条shRNA序列信息及Dnmtl的RT引物信息第57-58页
参考文献第58-61页
致谢第61页

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