摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
综述 | 第10-23页 |
1 组蛋白的甲基化 | 第11-19页 |
·组蛋白的甲基转移酶 | 第12-14页 |
·组蛋白去甲基化酶 | 第14-18页 |
·组蛋白甲基化与DNA甲基化 | 第18-19页 |
2 组蛋白甲基化修饰酶对非组蛋白的调控 | 第19-21页 |
·:组蛋白甲基转移酶对非组蛋白的修饰与调控 | 第19-20页 |
·组蛋白去甲基化酶LSD1对非组蛋白的修饰与调控 | 第20-21页 |
3 DNA甲基转移酶DNMT1 | 第21-23页 |
·DNMT1的稳定性的调控 | 第22-23页 |
材料与方法 | 第23-42页 |
1 实验材料 | 第23-35页 |
·菌株和细胞株 | 第23-24页 |
·质粒 | 第24页 |
·主要试剂 | 第24-26页 |
·主要仪器 | 第26-28页 |
·实验试剂的配制 | 第28-35页 |
2 实验方法 | 第35-42页 |
·细胞培养 | 第35页 |
·细胞转染 | 第35-36页 |
·稳定细胞株的建立 | 第36-37页 |
·免疫染色 | 第37页 |
·免疫沉淀 | 第37-38页 |
·Western Blotting的实验方法 | 第38-39页 |
·从贴壁细胞中抽提总RNA的步骤 | 第39-40页 |
·RT-Q-PCR实验步骤 | 第40-42页 |
实验结果 | 第42-52页 |
1 LSD1 的缺失使DNMT1 的蛋白稳定性下降 | 第42页 |
2 建立并检测沉默LSD1的LNCAP、2 93T及HELA稳定细胞系 | 第42-43页 |
3 LNCaP稳定细胞系中LSD1的缺失导致Dnmt1蛋白水平的下降 | 第43-45页 |
4 293T和Hela细胞中LSD1与AOF1共同参与对Dnmt1的调控 | 第45-48页 |
5 HCT116细胞内LSD1对Dnmt1稳定性没有明显的调控作用 | 第48-50页 |
6 组蛋白甲基转移酶SET7和SET8参与调控Dnmt1的稳定性 | 第50-52页 |
讨论与展望 | 第52-55页 |
附录 | 第55-58页 |
1 缩略词 | 第55-56页 |
2 LSD1 shRNA所用空载pGIPz-shRNA的图谱和性质 | 第56-57页 |
3 LSD1的两条shRNA序列信息及Dnmtl的RT引物信息 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-61页 |
致谢 | 第61页 |