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JMJD5催化单甲基化组蛋白H3氨基末端水解

致谢第1-5页
中文摘要第5-7页
Abstract第7-10页
缩略语第10-11页
目次第11-13页
1 引言第13-17页
2 实验材料与方法第17-25页
   ·实验材料第17-19页
     ·抗体第17页
     ·肽段第17页
     ·Cathepsin L特异性抑制剂第17页
     ·细胞转染试剂第17页
     ·融合蛋白纯化试剂第17-18页
     ·细胞培养试剂第18页
     ·分子克隆及荧光定量PCR试剂第18页
     ·SiRNA及PCR引物第18页
     ·细胞系第18页
     ·体外反应试剂第18-19页
     ·细胞蛋白提取相关试剂第19页
   ·实验方法第19-25页
     ·原核蛋白表达纯化第19-21页
     ·酸抽提法提取组蛋白第21页
     ·基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF)第21页
     ·细胞培养、细胞转染、SiRNA干扰、MNNG处理细胞第21-22页
     ·GST Pull-dwon、免疫共沉淀(Coimmunoprecipitation)第22页
     ·实时荧光定量PCR(qRT-PCR)第22-24页
     ·流式细胞仪检测细胞周期第24页
     ·体外水解反应第24-25页
3 结果与讨论第25-50页
   ·结果第25-47页
     ·Hela与A549细胞中JMJD5过表达引起组蛋白H3氨基端水解增强第25-30页
     ·JMJD5与Cathepsin L二级结构相似第30页
     ·体外重组His-JMJD5蛋白催化单甲基化组蛋白H3水解第30-37页
     ·JMJD5蛋白与组蛋白H3氨基末端相互作用第37-41页
     ·JMJD5氨基端区域负性调控自身酶活性第41页
     ·SiRNA干扰细胞内源JMJD5表达能减弱H3水解第41-42页
     ·细胞内JMJD5以及Cathepsin L诱导的H3水解都能被E-64抑制第42-43页
     ·JMJD5参与化学致癌物MNNG引起的细胞反应第43-45页
     ·JMJDS影响MNNG引起的细胞周期阻滞现象第45-47页
   ·讨论第47-50页
4 结论和展望第50-52页
   ·主要结论第50页
   ·展望第50-52页
参考文献第52-53页
综述第53-64页
 参考文献第60-64页
作者简历及在学期间取得的科研成果第64页

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