致谢 | 第1-5页 |
中文摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
缩略语 | 第10-11页 |
目次 | 第11-13页 |
1 引言 | 第13-17页 |
2 实验材料与方法 | 第17-25页 |
·实验材料 | 第17-19页 |
·抗体 | 第17页 |
·肽段 | 第17页 |
·Cathepsin L特异性抑制剂 | 第17页 |
·细胞转染试剂 | 第17页 |
·融合蛋白纯化试剂 | 第17-18页 |
·细胞培养试剂 | 第18页 |
·分子克隆及荧光定量PCR试剂 | 第18页 |
·SiRNA及PCR引物 | 第18页 |
·细胞系 | 第18页 |
·体外反应试剂 | 第18-19页 |
·细胞蛋白提取相关试剂 | 第19页 |
·实验方法 | 第19-25页 |
·原核蛋白表达纯化 | 第19-21页 |
·酸抽提法提取组蛋白 | 第21页 |
·基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF) | 第21页 |
·细胞培养、细胞转染、SiRNA干扰、MNNG处理细胞 | 第21-22页 |
·GST Pull-dwon、免疫共沉淀(Coimmunoprecipitation) | 第22页 |
·实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第22-24页 |
·流式细胞仪检测细胞周期 | 第24页 |
·体外水解反应 | 第24-25页 |
3 结果与讨论 | 第25-50页 |
·结果 | 第25-47页 |
·Hela与A549细胞中JMJD5过表达引起组蛋白H3氨基端水解增强 | 第25-30页 |
·JMJD5与Cathepsin L二级结构相似 | 第30页 |
·体外重组His-JMJD5蛋白催化单甲基化组蛋白H3水解 | 第30-37页 |
·JMJD5蛋白与组蛋白H3氨基末端相互作用 | 第37-41页 |
·JMJD5氨基端区域负性调控自身酶活性 | 第41页 |
·SiRNA干扰细胞内源JMJD5表达能减弱H3水解 | 第41-42页 |
·细胞内JMJD5以及Cathepsin L诱导的H3水解都能被E-64抑制 | 第42-43页 |
·JMJD5参与化学致癌物MNNG引起的细胞反应 | 第43-45页 |
·JMJDS影响MNNG引起的细胞周期阻滞现象 | 第45-47页 |
·讨论 | 第47-50页 |
4 结论和展望 | 第50-52页 |
·主要结论 | 第50页 |
·展望 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-53页 |
综述 | 第53-64页 |
参考文献 | 第60-64页 |
作者简历及在学期间取得的科研成果 | 第64页 |