| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-29页 |
| 1 热休克蛋白的分类 | 第13-15页 |
| 2 小热休克蛋白 | 第15-29页 |
| ·小热休克蛋白的结构 | 第15-16页 |
| ·小热休克蛋白的主要功能 | 第16-23页 |
| ·“分子伴侣”功能 | 第16-18页 |
| ·sHSP与重金属离子 | 第18-20页 |
| ·sHSP参与稳定细胞骨架 | 第20-21页 |
| ·sHSP参与凋亡 | 第21-23页 |
| ·sHSP与免疫 | 第23-25页 |
| ·sHSP与疾病 | 第25-29页 |
| ·sHSP与神经退行性疾病 | 第26-27页 |
| ·sHSP与多发性硬化病 | 第27页 |
| ·sHSP与肿瘤 | 第27-29页 |
| 第二章 柞蚕小热休克蛋白 20.8 和 21.4 基因的克隆 | 第29-42页 |
| 引言 | 第29页 |
| 1 研究的目的及意义 | 第29-30页 |
| 2 主要研究内容 | 第30页 |
| ·柞蚕小热休克蛋白的基因克隆 | 第30页 |
| ·柞蚕小热休克蛋白的生物信息学分析 | 第30页 |
| 3 材料与方法 | 第30-34页 |
| ·实验材料 | 第30页 |
| ·仪器与试剂 | 第30-31页 |
| ·主要实验仪器 | 第30-31页 |
| ·主要生化试剂 | 第31页 |
| ·常用溶液的配制 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-34页 |
| ·五龄柞蚕脂肪体总RNA的提取 | 第31-32页 |
| ·单链cDNA的合成 | 第32页 |
| ·PCR扩增引物的设计，柞蚕sHSP基因cDNA的扩增 | 第32-33页 |
| ·Ap-sHSP20.8 和Ap-sHSP21.4 基因的克隆及测序 | 第33-34页 |
| ·生物信息学与进化树分析 | 第34页 |
| 4 结果与分析 | 第34-41页 |
| ·柞蚕cDNA模板的合成（这个不能作为标题） | 第34页 |
| ·Ap-sHSP20.8 和Ap-sHSP21.4 的序列分析 | 第34-37页 |
| ·Ap-sHSP20.8 和Ap-sHSP21.4 统进化树 | 第37-41页 |
| 5 讨论 | 第41-42页 |
| 第三章 小热休克蛋白的原核表达及分子伴侣功能研究 | 第42-54页 |
| 引言 | 第42页 |
| 1 研究的目的及意义 | 第42页 |
| 2 主要研究内容 | 第42-43页 |
| ·柞蚕小热休克蛋白的原核表达 | 第42页 |
| ·柞蚕小热休克蛋白AP-sHSP20.8 和Ap-sHSP21.4 的蛋白纯化 | 第42页 |
| ·柞蚕小热休克蛋白AP-sHSP20.8 的多克隆抗体制备 | 第42页 |
| ·柞蚕小热休克蛋白AP-sHSP20.8 的分子伴侣功能验证 | 第42-43页 |
| 3 材料与方法 | 第43-49页 |
| ·实验材料 | 第43页 |
| ·仪器与试剂 | 第43-46页 |
| ·主要仪器 | 第43页 |
| ·主要生化试剂 | 第43-44页 |
| ·常用溶液的配制 | 第44-46页 |
| ·实验方法 | 第46-49页 |
| ·PCR扩增，基因克隆 | 第46页 |
| ·重组蛋白的表达及鉴定 | 第46页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳和 Western-blotting 分析 | 第46-47页 |
| ·重组蛋白的可溶性分析 | 第47页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第47-48页 |
| ·Bradford法测定蛋白浓度 | 第48页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第48页 |
| ·小热休克蛋白的分子伴侣功能研究 | 第48-49页 |
| 4 结果 | 第49-52页 |
| ·小休克蛋白的原核化表达分析 | 第49-52页 |
| ·多克隆抗体制备 | 第52页 |
| ·Ap-sHSP20.8 的分子伴侣功能研究 | 第52页 |
| 5 讨论 | 第52-54页 |
| 第四章 柞蚕小热休克蛋白的免疫功能研究 | 第54-68页 |
| 引言 | 第54页 |
| 1 研究的目的及意义 | 第54-55页 |
| 2 主要研究内容 | 第55-56页 |
| ·组织表达特征分析 | 第55页 |
| ·微生物刺激后sHSP的表达 | 第55页 |
| ·RNA干扰后免疫相关基因的表达情况 | 第55-56页 |
| 3. 材料与方法 | 第56-60页 |
| ·实验材料 | 第56页 |
| ·仪器与试剂 | 第56-58页 |
| ·主要实验仪器 | 第56页 |
| ·主要生化试剂 | 第56-57页 |
| ·常用溶液的配制 | 第57-58页 |
| ·实验方法 | 第58-60页 |
| ·柞蚕处理 | 第58页 |
| ·柞蚕RNA的提取 | 第58页 |
| ·提取的总RNA的质量检测 | 第58页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第58-59页 |
| ·柞蚕蛋白的提取 | 第59页 |
| ·RNA干涉 | 第59页 |
| ·部分免疫相关基因的表达分析 | 第59-60页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western-blotting分析 | 第60页 |
| 4 结果 | 第60-66页 |
| ·组织定量 | 第60-61页 |
| ·微生物刺激后sHSP的表达 | 第61-65页 |
| ·RNA干涉后免疫相关基因的表达 | 第65-66页 |
| 5. 讨论 | 第66-68页 |
| 第五章 类花生四烯酸代谢途径对柞蚕小热休克蛋白免疫功能的调节 | 第68-77页 |
| 引言 | 第68页 |
| 1 研究的目的及意义 | 第68-72页 |
| 2 主要研究内容 | 第72页 |
| ·类花生四烯酸代谢途径酶的抑制剂柞蚕对sHSP表达的影响 | 第72页 |
| ·花生四烯酸对sHSP表达的影响 | 第72页 |
| 3. 材料与方法 | 第72-73页 |
| ·实验材料 | 第72页 |
| ·仪器与试剂 | 第72页 |
| ·主要实验仪器 | 第72页 |
| ·主要生化试剂 | 第72页 |
| ·常用溶液的配制 | 第72页 |
| ·实验方法 | 第72-73页 |
| ·柞蚕处理 | 第72-73页 |
| ·柞蚕RNA的提取 | 第73页 |
| ·提取的总RNA的质量检测 | 第73页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第73页 |
| ·柞蚕蛋白的提取 | 第73页 |
| ·处理后Ap-sHSP20.8 和Ap-sHSP21.4 的基因表分析 | 第73页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western-blotting分析 | 第73页 |
| 4 结果 | 第73-76页 |
| 5. 讨论 | 第76-77页 |
| 第六章 柞蚕小热休克蛋白对细胞凋亡因子caspase影响 | 第77-84页 |
| 引言 | 第77页 |
| 1 研究的目的及意义 | 第77-78页 |
| 2 主要研究内容 | 第78页 |
| ·si-AP-sHSP20.8 后热激，Ap-sHSP20.8 蛋白和基因表达分析 | 第78页 |
| ·si-AP-sHSP20.8 后热激，capase-1 基因表达分析 | 第78页 |
| ·si-AP-sHSP20.8 后热激，capase-1 活性分析 | 第78页 |
| 3. 材料与方法 | 第78-80页 |
| ·实验材料 | 第78页 |
| ·仪器与试剂 | 第78页 |
| ·主要实验仪器 | 第78页 |
| ·主要生化试剂 | 第78页 |
| ·常用溶液的配制 | 第78页 |
| ·实验方法 | 第78-80页 |
| ·柞蚕处理 | 第78-79页 |
| ·柞蚕RNA的提取 | 第79页 |
| ·提取的总RNA的质量检测 | 第79页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第79页 |
| ·柞蚕蛋白的提取 | 第79页 |
| ·处理后Ap-sHSP20.8 和caspase-1 的基因表分析 | 第79页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western-blotting分析 | 第79页 |
| ·caspase-1 的活性分析 | 第79-80页 |
| 4 结果 | 第80-82页 |
| ·si-AP-sHSP20.8 后热激，Ap-sHSP20.8 蛋白和基因表达分析 | 第80-82页 |
| ·si-AP-sHSP20.8 后热激，capase-1 基因表达和活性分析 | 第82页 |
| 5. 讨论 | 第82-84页 |
| 第七章 结论 | 第84-85页 |
| 1 Ap-sHSP20.8 和Ap-sHSP21.4 基因序列分析 | 第84页 |
| 2 首次发现了Ap-sHSP20.8 和Ap-sHSP21.4 参与柞蚕对病原微生物的免疫反 | 第84页 |
| 3 首次发现类花生四烯酸代谢途径对柞蚕小热休克蛋白免疫功能的影响 | 第84页 |
| 4 初步探讨了Ap-sHSP20.8 与caspase-1 的关系 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-101页 |
| 致谢 | 第101-102页 |
| 个人简介 | 第102页 |
