| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 缩略词 | 第14-15页 |
| 第一部分 文献综述 | 第15-49页 |
| 第一章 植物诱导型抗虫性研究进展 | 第15-31页 |
| 1 植物与昆虫的关系概述 | 第15-16页 |
| 2 植物抗虫性及其分类 | 第16-20页 |
| ·组成抗虫性 | 第17-18页 |
| ·诱导抗虫性 | 第18-20页 |
| 3 诱导抗虫防御理化机制 | 第20-27页 |
| ·直接防御 | 第20-22页 |
| ·物理防御的形态特征 | 第20-21页 |
| ·化学防御相关的代谢物和酶 | 第21-22页 |
| ·间接防御 | 第22-23页 |
| ·诱导防御中的信号分子及途径 | 第23-27页 |
| ·系统素 | 第23-24页 |
| ·茉莉酸 | 第24-26页 |
| ·乙烯 | 第26页 |
| ·信号途径和分子互作 | 第26-27页 |
| 4 大豆诱导抗虫研究进展 | 第27-31页 |
| ·大豆抗食叶性害虫概述 | 第27-28页 |
| ·大豆诱导抗虫相关研究 | 第28-31页 |
| 第二章 转录组学及其在植物抗虫研究中的应用 | 第31-47页 |
| 1 转录组学概念及研究内容 | 第31页 |
| 2 转录组学研究技术 | 第31-44页 |
| ·基因芯片表达谱技术及应用 | 第32-36页 |
| ·基因芯片技术的概念和方法 | 第32-33页 |
| ·基因芯片的应用 | 第33-34页 |
| ·基因芯片技术的特点和前景展望 | 第34-36页 |
| ·RNA-Seq转录谱技术及应用 | 第36-42页 |
| ·RNA-Seq概念和方法 | 第36-38页 |
| ·RNA-Seq的应用 | 第38-40页 |
| ·RNA-Seq的特点及前景展望 | 第40-42页 |
| ·转录谱生物信息学分析 | 第42-44页 |
| 3 植物防御转录组研究进展 | 第44-47页 |
| 本研究的目的与意义 | 第47-49页 |
| 第二部分 研究报告 | 第49-127页 |
| 第三章 斜纹夜蛾诱导大豆的抗性水平动态分析 | 第49-55页 |
| 1 材料与方法 | 第49-51页 |
| ·实验材料 | 第49页 |
| ·材料种植与诱导处理 | 第49-50页 |
| ·抗虫生物鉴定 | 第50-51页 |
| ·斜纹夜蛾对寄主的双向选择实验 | 第50-51页 |
| ·斜纹夜蛾强迫饲喂实验 | 第51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-53页 |
| ·诱导抗性方差分析 | 第51页 |
| ·抗感品种诱导抗性变化趋势 | 第51-52页 |
| ·最高时间点诱导抗性比较 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-55页 |
| 第四章 大豆诱导抗虫转录谱分析 | 第55-79页 |
| 1 材料与方法 | 第55-64页 |
| ·实验材料 | 第55-56页 |
| ·大豆叶片总RNA的提取 | 第56页 |
| ·RNA的纯化 | 第56-57页 |
| ·芯片实验步骤及数据分析 | 第57-59页 |
| ·RNA浓度和质量检测 | 第57页 |
| ·cDNA合成 | 第57-58页 |
| ·体外转录合成生物素标记cRNA及其片段化 | 第58页 |
| ·芯片杂交及后期扫描 | 第58-59页 |
| ·数据处理及分析 | 第59页 |
| ·RNA-Seq实验步骤及数据分析 | 第59-62页 |
| ·RNA浓度和质量检测 | 第59-60页 |
| ·测序文库的构建 | 第60页 |
| ·测序序列拼接和组装 | 第60-61页 |
| ·Unigene表达差异分析 | 第61页 |
| ·数据功能注释分析 | 第61-62页 |
| ·荧光定量PCR及数据分析 | 第62-64页 |
| 2 结果与分析 | 第64-75页 |
| ·转录谱质量及差异基因表达分析 | 第64-66页 |
| ·芯片表达谱质量分析 | 第64-65页 |
| ·RNA-Seq转录谱质量分析 | 第65-66页 |
| ·抗感品种差异基因表达谱功能分析 | 第66-71页 |
| ·芯片表达谱差异基因功能分类 | 第66-67页 |
| ·RNA-Seq转录谱差异基因功能分类 | 第67-69页 |
| ·表达谱鉴定一致的差异基因分析 | 第69-71页 |
| ·荧光定量PCR验证结果 | 第71-73页 |
| ·关键基因时空表达分析 | 第73-75页 |
| 3 讨论 | 第75-79页 |
| ·基因芯片和RNA-Seq表达谱比较分析 | 第75-76页 |
| ·大豆诱导抗虫反应的分子机理初探 | 第76-78页 |
| ·候选基因时空表达与诱导抗虫动态反应之间的联系 | 第78-79页 |
| 第五章 大豆GmVSPβ和GmN：IFR的克隆及功能分析 | 第79-101页 |
| 1 材料与方法 | 第79-86页 |
| ·实验材料 | 第79-80页 |
| ·主要仪器及试剂 | 第80页 |
| ·主要仪器 | 第80页 |
| ·主要试剂 | 第80页 |
| ·宿主菌与质粒载体 | 第80页 |
| ·引物合成及测序 | 第80页 |
| ·植物基因组DNA的提取方法 | 第80-81页 |
| ·植物总RNA的提取、纯化及cDNA第一链的合成 | 第81页 |
| ·植物总RNA的提取(TRIZOL法) | 第81页 |
| ·RNA的纯化 | 第81页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第81页 |
| ·GmVSPβ和GmN：IFR基因的克隆 | 第81-82页 |
| ·GmVSPβ和GmN：IFR基因序列及氨基酸序列分析 | 第82页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第82-83页 |
| ·入门载体pDONOR221-GmVSPβ和pDONOR221-GmN：IFR的获得 | 第83页 |
| ·目的载体pMDC83-GmVSPβ和pMDC83-GmN：IFR的构建 | 第83页 |
| ·农杆菌介导叶盘法转化烟草 | 第83-84页 |
| ·受体材料的准备 | 第83-84页 |
| ·农杆菌介导法转化烟草 | 第84页 |
| ·转基因烟草阳性植株的鉴定 | 第84-85页 |
| ·转基因烟草的抗虫性实验 | 第85页 |
| ·双向选择实验 | 第85页 |
| ·活体强迫饲养实验 | 第85页 |
| ·转基因烟草抗虫相关基因表达的分析 | 第85-86页 |
| 2 结果与分析 | 第86-96页 |
| ·GmVSPβ和GmN：IFR基因的克隆及序列分析 | 第86-87页 |
| ·大豆GmVSPβ基因的生物信息学分析 | 第87-88页 |
| ·大豆GmN：IFR基因的生物信息学分析 | 第88-90页 |
| ·植物过表达载体的构建 | 第90-91页 |
| ·转基因烟草阳性苗鉴定及表达量分析 | 第91-93页 |
| ·转基因烟草抗虫性的鉴定和分析 | 第93-94页 |
| ·转基因烟草抗虫相关基因的表达分析 | 第94-96页 |
| 3 讨论 | 第96-101页 |
| 第六章 大豆诱导抗虫转录调控机制探索 | 第101-127页 |
| 1 材料与方法 | 第102-111页 |
| ·实验材料 | 第102页 |
| ·主要仪器和主要试剂 | 第102-103页 |
| ·宿主菌与质粒载体 | 第103页 |
| ·引物合成及测序 | 第103页 |
| ·GmVSPβ和GmN：IFR基因启动子的克隆和序列分析 | 第103-104页 |
| ·启动子报告载体的构建 | 第104-106页 |
| ·12个转录因子的克隆和序列分析 | 第106-107页 |
| ·转录因子效应载体的构建 | 第107-108页 |
| ·拟南芥原生质体制备液的配置 | 第108-109页 |
| ·拟南芥原生质体的分离纯化 | 第109-110页 |
| ·PEG-Ca~(2+)介导的质粒转染和培养 | 第110-111页 |
| ·LUC报告基因表达活性检测 | 第111页 |
| 2 结果与分析 | 第111-123页 |
| ·GmVSPs和GmN：IFR基因启动子的克隆及序列分析 | 第111-114页 |
| ·转录因子cDNA克隆和序列分析 | 第114-118页 |
| ·报告载体和效应载体的构建 | 第118-120页 |
| ·拟南芥原生质体提取 | 第120-121页 |
| ·瞬时表达转录调控活性分析 | 第121-123页 |
| 3 讨论 | 第123-127页 |
| 全文结论 | 第127-129页 |
| 本研究创新之处 | 第129-131页 |
| 参考文献 | 第131-153页 |
| 附录 | 第153-157页 |
| 攻读学位期间发表与待发表的论文 | 第157-159页 |
| 致谢 | 第159页 |
