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表达yenI基因的APEC重组菌的致病机理研究

中文摘要第1-4页
Abstract第4-8页
符号说明第8-9页
综述一 大肠杆菌群体感应系统研究进展第9-17页
 一、SdiA介导的群体感应系统(大肠杆菌Ⅰ型群体感应系统)第9-10页
 二、以寡肽类分子作为信号分子的革兰氏阳性细菌的群体感应系统第10-11页
 三、LuxS系统是最广泛的群体感应系统,费氏弧菌上面首次发现该系统第11-13页
 四、吲哚分子第13页
 五、AI-3、肾上腺素和去甲肾上腺素第13-14页
 六、总结第14页
 参考文献第14-17页
研究一、Ⅰ型QS对禽致病性大肠杆菌CE129毒力的调控第17-39页
 1 材料与方法第19-21页
   ·菌株与质粒第19-20页
   ·试剂第20-21页
   ·主要仪器第21页
 2 方法第21-27页
   ·质粒的提取第21页
   ·重组株构建及鉴定第21页
   ·缺失株的构建第21-23页
   ·生长曲线测定第23页
   ·最小抑菌浓度(MIC)试验第23页
   ·血清杀菌实验第23页
   ·耐酸性试验第23页
   ·体外竞争性试验第23-24页
   ·泳动性试验第24页
   ·HD11巨噬细胞吞噬试验第24页
   ·DF1细胞黏附实验第24页
   ·荧光定量PCR试验第24-27页
     ·除去基因组DNA第25页
     ·反转录反应第25-26页
     ·Real Time PCR反应第26-27页
 3. 实验结果第27-36页
   ·重组菌和λ-Red同源重组技术缺失株的构建与验证第27-28页
   ·细菌生长生存能力试验第28-31页
     ·生长曲线图第28-29页
     ·SPF鸡血清杀菌实验第29-30页
     ·最小抑菌浓度(MIC)第30页
     ·体外竞争性试验结果第30-31页
     ·HD11细胞吞噬存活试验第31页
   ·耐酸性试验第31-33页
     ·酸性培养条件存活试验第31页
     ·gadA基因表达水平检测第31-33页
   ·黏附因子相关试验第33-34页
     ·泳动性试验第33页
     ·DF1细胞黏附试验第33-34页
     ·粘附因子荧光定量PCR试验第34页
   ·QS-Ⅰ调控QS-Ⅱ活性第34-36页
 4 讨论第36-37页
 参考文献第37-39页
研究二、Ⅰ型群体感应系统对禽致病性大肠杆菌生物被膜形成的调控研究第39-48页
 1 材料与方法第40-42页
   ·菌株、质粒和细胞系第40页
   ·试剂第40页
   ·重组菌株AHL合成能力验证第40页
   ·聚苯乙稀材料表面BF形成能力试验第40-41页
   ·C_6HSL影响下BF定量试验第41页
   ·玻璃试管气液交界面BF形成能力试验第41页
   ·玻璃表面BF形成能力试验第41页
   ·荧光定量PCR第41-42页
 2 实验结果第42-44页
   ·重组菌构建与验证第42页
   ·聚苯乙烯孔板中BF形成能力试验第42-43页
   ·外源添加C_6HSL作用下野生株BF试验第43页
   ·玻璃试管气液交界面BF形成试验第43-44页
   ·非生物活性表面BF形成试验第44页
   ·荧光定量PCR试验第44页
 3 讨论第44-46页
 参考文献第46-48页
全文总结第48-49页
致谢第49-50页

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