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奶山羊INSIG基因对乳腺上皮细胞中脂代谢的影响研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-14页
第一章 文献综述第14-24页
   ·INSIG基因的发现第14-15页
   ·INSIGs的分子结构第15页
   ·INSIGs的功能第15-18页
     ·INSIGs参与固醇介导的SREBPs蛋白调控第16-18页
     ·INSIGs参与固醇介导的HMGR蛋白调控第18页
   ·INSIGs的表达及调控第18-20页
   ·INSIGs的研究进展第20-23页
     ·INSIG与PPAR对脂代谢的调控及代谢综合征相关第20-21页
     ·INSIGs与micro RNA对脂代谢的调控相关第21页
     ·INSIGs多态性与肥胖相关第21-22页
     ·INSIGs与癌症相关第22-23页
   ·本研究的目的及意义第23-24页
第二章 INSIGs两个亚型在山羊乳腺的表达丰度及序列比对情况第24-31页
   ·材料与方法第24-26页
     ·样品第24页
     ·试验试剂第24页
     ·仪器设备第24页
     ·样品采集第24-25页
     ·西农萨能奶山羊乳腺组织总RNA的提取及c DNA的合成第25页
     ·山羊不同泌乳时期乳腺组织中INSIGs的表达丰度检测第25-26页
     ·山羊INSIGs序列生物信息学分析第26页
   ·结果与分析第26-29页
     ·乳腺组织总RNA的提取结果第26-27页
     ·不同泌乳时期山羊乳腺组织中INSIGs的表达情况第27页
     ·山羊INSIG1和INSIG2基因CDS区的差异第27-29页
   ·讨论第29-30页
     ·不同泌乳时期山羊乳腺组织中INSIGs表达丰度的比较第29页
     ·山羊INSIGs两个亚型间的序列比较第29-30页
   ·小结第30-31页
第三章 超表达INSIG1对GMEC中脂代谢的影响研究第31-46页
   ·材料与方法第31-38页
     ·材料第31页
     ·试验试剂及仪器设备第31页
     ·INSIG1基因的扩增第31-33页
     ·pAdTrack-CMV-INSIG1腺病毒穿梭载体的构建第33页
     ·pAdEasy-INSIG1重组腺病毒载体的构建及鉴定第33-34页
     ·Ad-INSIG1腺病毒的包装、扩增及滴度测定第34-35页
     ·腺病毒感染GMEC最佳MOI值(multiplicity of infection)的测定第35-36页
     ·Ad-INSIG1腺病毒超表达效果检测第36页
     ·超表达INSIG1基因对脂质合成相关基因表达的影响第36页
     ·超表达INSIG1基因后GMEC中TAG及TC含量的影响第36-37页
     ·超表达INSIG1基因对GMEC中脂滴积累的影响第37-38页
   ·结果与分析第38-43页
     ·INSIG1基因的扩增与鉴定第38页
     ·pAdTrack-CMV-INSIG1腺病毒穿梭载体的构建与鉴定第38-39页
     ·pAdEasy-INSIG1重组腺病毒载体的构建与鉴定第39-40页
     ·腺病毒的包装、扩增与滴度测定第40页
     ·腺病毒感染GMEC最佳MOI值的确定第40-41页
     ·Ad-INSIG1腺病毒超表达效果检测第41页
     ·超表达INSIG1基因对脂质合成相关基因表达的影响第41-42页
     ·超表达INSIG1基因对细胞中TAG、TC含量的影响第42-43页
     ·超表达INSIG1基因对细胞中脂滴积累的影响第43页
   ·讨论第43-45页
     ·Ad-INSIG1超表达腺病毒的包装第43-44页
     ·超表达INSIG1基因对GMEC中脂代谢相关基因的影响第44-45页
     ·超表达INSIG1基因对GMEC中脂滴积累的影响第45页
   ·小结第45-46页
第四章 超表达INSIG2对GMEC中脂代谢的影响研究第46-57页
   ·材料与方法第46-49页
     ·试验材料第46页
     ·试验试剂及仪器设备第46页
     ·INSIG2基因的扩增第46-47页
     ·pAdTrack-CMV-INSIG2腺病毒穿梭载体的构建第47页
     ·pAdEasy-INSIG2重组腺病毒载体的构建及鉴定第47-48页
     ·Ad-INSIG2腺病毒的包装、扩增及滴度测定第48页
     ·腺病毒感染GMEC最佳MOI值(multiplicity of infection)的测定第48页
     ·Ad-INSIG2腺病毒超表达效果检测第48页
     ·超表达INSIG2基因对脂质合成相关基因表达的影响第48页
     ·超表达INSIG2基因对GMEC中TAG及TC含量的影响第48-49页
     ·超表达INSIG2基因对GMEC中脂滴积累的影响第49页
   ·结果与分析第49-54页
     ·INSIG2基因的扩增与鉴定第49页
     ·pAdTrack-CMV-INSIG2腺病毒穿梭载体的构建与鉴定第49-50页
     ·pAdEasy-INSIG2重组腺病毒载体的构建与鉴定第50-51页
     ·腺病毒的包装、扩增与滴度测定第51页
     ·腺病毒感染GMEC最佳MOI值的确定第51-52页
     ·Ad-INSIG2腺病毒超表达效果检测第52页
     ·超表达INSIG2基因对脂质合成相关基因表达的影响第52-53页
     ·超表达INSIG2基因对细胞中TAG、TC含量的影响第53-54页
     ·超表达INSIG2基因对细胞中脂滴积累的影响第54页
   ·讨论第54-56页
     ·Ad-INSIG2超表达腺病毒的包装第54-55页
     ·超表达INSIG2基因对GMEC中脂代谢相关基因的影响第55页
     ·超表达INSIG2基因对GMEC中脂质积累的影响第55-56页
   ·小结第56-57页
第五章 干扰INSIGs对GMEC中脂代谢的影响研究第57-66页
   ·材料与方法第57-59页
     ·试验试剂第57页
     ·仪器设备第57页
     ·奶山羊INSIGs基因si RNA的设计与合成第57-58页
     ·siRNA干扰效率检测第58页
     ·干扰INSIGs基因的表达对脂代谢相关基因表达的影响第58-59页
     ·干扰INSIGs基因的表达对GMEC中TAG及TC含量的影响第59页
     ·干扰INSIGs基因的表达对GMEC中脂滴积累的影响第59页
   ·结果与分析第59-63页
     ·siRNA干扰效率检测第59-61页
     ·干扰INSIGs基因的表达对脂质合成相关基因表达的影响第61页
     ·干扰INSIGs基因的表达对GMEC中TAG及TC含量的影响第61-62页
     ·干扰INSIGs基因的表达对GMEC中脂滴积累的影响第62-63页
   ·讨论第63-65页
     ·siRNA的设计第63-64页
     ·干扰INSIGs基因的表达对脂代谢相关基因的影响第64页
     ·干扰INSIGs基因的表达对脂质积累的影响第64-65页
   ·小结第65-66页
结论第66-67页
缩略词第67-68页
参考文献第68-74页
附录 1第74-75页
附录 2第75-76页
附录 3第76-77页
致谢第77-78页
作者简介第78页

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