| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-32页 |
| 引言 | 第13-14页 |
| ·滇金丝猴研究概况 | 第14-17页 |
| ·滇金丝猴简介 | 第14页 |
| ·滇金丝猴的食性 | 第14页 |
| ·滇金丝猴胃肠道微生物酶资源的开发潜力 | 第14-17页 |
| ·木聚糖降解酶研究概况 | 第17-22页 |
| ·木聚糖 | 第17-19页 |
| ·木聚糖酶 | 第19-20页 |
| ·β-D-木糖苷酶 | 第20-22页 |
| ·动物胃肠道来源木聚糖降解酶研究进展 | 第22-28页 |
| ·纯培养技术获取木聚糖降解酶 | 第22-24页 |
| ·宏基因组技术获取木聚糖降解酶 | 第24-27页 |
| ·木聚糖降解酶获取策略评价 | 第27-28页 |
| ·木聚糖降解酶的应用 | 第28-30页 |
| ·木聚糖降解酶在食品行业中的应用 | 第28-29页 |
| ·木聚糖降解酶在造纸工业中的应用 | 第29页 |
| ·木聚糖降解酶在饲料工业中的应用 | 第29-30页 |
| ·木聚糖降解酶在能源及其他行业中的应用 | 第30页 |
| ·研究的目的和意义 | 第30-31页 |
| ·研究内容及技术路线 | 第31-32页 |
| ·研究内容 | 第31页 |
| ·技术路线 | 第31-32页 |
| 第2章 滇金丝猴粪便微生物GH10家族木聚糖酶基因多样性研究 | 第32-50页 |
| ·实验材料 | 第32-34页 |
| ·样品和菌株 | 第32页 |
| ·主要试剂 | 第32-33页 |
| ·实验所用主要仪器 | 第33页 |
| ·主要培养基 | 第33-34页 |
| ·主要溶液 | 第34页 |
| ·DNA测序与引物合成 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-39页 |
| ·样品的采集及保存 | 第34-35页 |
| ·滇金丝猴粪便微生物宏基因组DNA的提取 | 第35-36页 |
| ·滇金丝猴粪便微生物GH10木聚糖酶基因的扩增及纯化 | 第36-37页 |
| ·木聚糖酶基因片段文库的构建 | 第37-39页 |
| ·基因多样性分析 | 第39页 |
| ·实验结果与分析 | 第39-47页 |
| ·滇金丝猴粪便微生物宏基因组DNA的提取 | 第39-40页 |
| ·木聚糖酶基因片段的扩增 | 第40-41页 |
| ·木聚糖酶基因片段文库的构建 | 第41页 |
| ·基因多样性分析 | 第41-47页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| ·本章小结 | 第48-50页 |
| 第3章 培养法研究滇金丝猴粪便微生物木聚糖降解酶基因 | 第50-73页 |
| ·实验材料 | 第50-51页 |
| ·样品 | 第50页 |
| ·主要试剂 | 第50-51页 |
| ·主要仪器 | 第51页 |
| ·主要培养基 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-56页 |
| ·木质纤维素降解菌的筛选和分离 | 第51-52页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第52页 |
| ·细菌 16S rDNA的PCR扩增 | 第52-53页 |
| ·菌株的鉴定 | 第53页 |
| ·测序文库的制备 | 第53-55页 |
| ·DNA测序与引物合成 | 第55页 |
| ·序列分析和系统发育分析 | 第55-56页 |
| ·实验结果与分析 | 第56-70页 |
| ·菌株的筛选 | 第56页 |
| ·菌株基因组DNA的提取 | 第56-57页 |
| ·菌株 16S rDNA扩增 | 第57-58页 |
| ·菌株的鉴定 | 第58-59页 |
| ·测序文库的制备 | 第59-60页 |
| ·测序结果 | 第60-61页 |
| ·序列分析 | 第61-70页 |
| ·讨论 | 第70-71页 |
| ·本章小结 | 第71-73页 |
| 第4章 免培养法研究滇金丝猴粪便微生物木聚糖酶基因 | 第73-86页 |
| ·实验材料 | 第73页 |
| ·样品 | 第73页 |
| ·主要试剂 | 第73页 |
| ·主要仪器 | 第73页 |
| ·实验方法 | 第73-75页 |
| ·滇金丝猴粪便微生物宏基因组DNA的提取 | 第73-74页 |
| ·测序文库的制备 | 第74页 |
| ·生物信息学分析 | 第74-75页 |
| ·实验结果与分析 | 第75-84页 |
| ·滇金丝猴粪便微生物宏基因组DNA的提取 | 第75页 |
| ·测序文库的制备 | 第75-77页 |
| ·生物信息学分析 | 第77-80页 |
| ·XynRBM的序列分析 | 第80-84页 |
| ·讨论 | 第84-85页 |
| ·本章小结 | 第85-86页 |
| 第5章 滇金丝猴粪便微生物来源木聚糖降解酶基因异源表达及性质研究 | 第86-139页 |
| ·实验材料 | 第86-88页 |
| ·菌株和质粒 | 第86页 |
| ·主要试剂 | 第86-87页 |
| ·主要仪器 | 第87页 |
| ·主要培养基 | 第87页 |
| ·主要溶液 | 第87-88页 |
| ·DNA测序与引物合成 | 第88页 |
| ·实验方法 | 第88-103页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第88-90页 |
| ·连接 | 第90-91页 |
| ·连接产物的转化 | 第91页 |
| ·阳性重组子的鉴定 | 第91-92页 |
| ·重组酶在大肠杆菌中的诱导表达 | 第92-93页 |
| ·重组酶的纯化 | 第93页 |
| ·重组酶的鉴定 | 第93-95页 |
| ·重组酶的定量 | 第95页 |
| ·酶活测定方法 | 第95-97页 |
| ·酶学特性分析 | 第97-103页 |
| ·实验结果与分析 | 第103-131页 |
| ·Xyn RBM26的基因表达、纯化及酶学性质研究 | 第103-112页 |
| ·XylRBM26的基因表达、纯化及酶学性质研究 | 第112-121页 |
| ·Xyn RBM的基因表达、纯化及酶学性质研究 | 第121-131页 |
| ·讨论 | 第131-138页 |
| ·本章小结 | 第138-139页 |
| 第6章 总结与展望 | 第139-144页 |
| ·总结 | 第139-142页 |
| ·创新 | 第142页 |
| ·展望 | 第142-144页 |
| 致谢 | 第144-145页 |
| 参考文献 | 第145-154页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文和研究成果 | 第154-155页 |
| 附录 | 第155-162页 |
| 附录A 实验中所使用的缓冲液的配制 | 第155-157页 |
| A1不同pH值的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液的配制 | 第155-156页 |
| A2不同pH值的甘氨酸-NaOH缓冲液的配制 | 第156页 |
| A3不同pH值的Tris-HCl缓冲液的配制 | 第156-157页 |
| 附录B 三个重组酶的氨基酸序列 | 第157-158页 |
| B1 XynRBM26的氨基酸序列 | 第157页 |
| B2 XynRBM的氨基酸序列 | 第157页 |
| B3 XylRBM26的氨基酸序列 | 第157-158页 |
| 附录C 三个重组酶的核苷酸序列 | 第158-162页 |
| C1 XynRBM26的核苷酸序列 | 第158-159页 |
| C2 XynRBM的核苷酸序列 | 第159-160页 |
| C3 XylRBM26的核苷酸序列 | 第160-162页 |
| 附录D 氨基酸中英文对照及缩写表 | 第162页 |
