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藁本内酯对缺糖缺氧诱导大鼠海马神经元凋亡的保护作用

中文摘要第1-11页
ABSTRACT第11-16页
英文对照缩略词对照表第16-17页
藁本内酯对缺糖缺氧诱导大鼠海马神经元凋亡的保护作用第17-20页
第一部分 藁本内酯对缺糖缺氧诱导海马神经元损伤的影响第20-36页
 1 前言第20页
 2 实验材料第20-22页
   ·药物第20页
   ·实验动物第20页
   ·主要试剂第20-21页
   ·主要溶液配制第21-22页
   ·主要仪器第22页
 3 实验方法第22-26页
   ·海马神经元的原代培养及鉴定第22-23页
     ·海马神经元的培养第22-23页
     ·免疫组化法鉴定第23页
   ·藁本内酯安全浓度范围筛选(MTT法)第23-24页
   ·藁本内酯对缺糖缺氧损伤的海马神经元细胞的相关作用第24-25页
     ·实验分组第24页
     ·细胞存活率检测(MTT法)第24页
     ·倒置显微镜观察损伤海马神经元细胞形态第24页
     ·藁本内酯对缺氧/缺氧损伤的海马神经元超微结构的影响第24-25页
     ·乳酸脱氢酶活性检测(LDH法)第25页
   ·藁本内酯对缺糖缺氧损伤海马神经元凋亡的影响第25-26页
     ·Hochest 33258染色观察细胞凋亡形态第25页
     ·Annexin V-FITC/Propidium iodide (PI)双染检测细胞凋亡率第25-26页
 4 统计方法与处理第26页
 5 实验结果第26-34页
   ·海马神经元的形态学观察与鉴定第26-28页
   ·藁本内酯安全浓度范围筛选第28-29页
   ·藁本内酯对缺糖缺氧损伤海马神经元细胞的相关作用第29-32页
     ·藁本内酯对缺糖缺氧(OGD)损伤的海马神经元增存活力的影响第29页
     ·细胞形态学变化(倒置显微镜观察)第29-30页
     ·藁本内酯对OGD诱导海马神经元损伤的超微结构的影响第30-31页
     ·藁本内酯对缺糖缺氧损伤海马神经元LDH漏出量的影响第31-32页
   ·藁本内酯对缺糖缺氧损伤后海马神经元凋亡的影响第32-34页
     ·Hochest33258染色检测细胞凋亡形态第32-33页
     ·Annexin V-FITC/Propidium iodide (PI)双染法检测细胞凋亡率第33-34页
 6 讨论第34-35页
 7 结论第35-36页
第二部分 藁本内酯对缺糖缺氧诱导海马神经元损伤机制的研究第36-53页
 1 实验材料第36-38页
   ·药物第36页
   ·实验动物第36页
   ·主要试剂第36-37页
   ·主要仪器第37-38页
 2 实验方法第38-42页
   ·藁本内酯对缺糖缺氧损伤海马神经元作用机制的研究第38-41页
     ·流式细胞术实验第38页
     ·Western-Blotting法检测凋亡相关蛋白Cyt C、Bax、Bcl-2、Caspase-3 的表达第38-41页
   ·藁本内酯对OGD损伤海马神经元通路的筛选(检测方法同2.1.2)第41页
     ·FITC-Annexin V/PI双染法检测PI3K/Akt信号通路对凋亡的影响第41页
     ·流式细胞术检测PI3K/Akt信号通路对其下游蛋白Bad表达的影响第41页
     ·流式细胞术检测PI3K/Akt信号通路对凋亡执行蛋白Caspase-3 表达的影响第41页
   ·统计方法与处理第41-42页
 3 实验结果第42-48页
   ·藁本内酯抑制了OGD损伤海马神经元细胞内钙离子的内流、ROS释放以及线粒体Cyt C的释放第42-44页
     ·藁本内酯抑制了OGD损伤海马神经元钙离子的内流36第42页
     ·藁本内酯抑制了OGD损伤海马神经元活性氧(ROS)的水平第42-43页
     ·藁本内酯抑制了OGD损伤海马神经元细胞色素C的转移第43-44页
     ·藁本内酯对OGD损伤海马神经元凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2 的影响第44页
   ·藁本内酯激活了PI3K/Akt信号通路参与了OGD对海马神经元损伤的保护作用第44-48页
     ·藁本内酯激活了PI3K/Akt信号通路,并参与抑制了OGD致海马神经元凋亡的作用第45-46页
     ·PI3K/Akt信号通路通过抑制其下游蛋白过Bad表达第46-47页
     ·PI3K/Akt信号通路参与抑制凋亡执行蛋白Caspase-3的过表达第47-48页
 4 讨论第48-52页
   ·缺血性脑血管疾病的相关机制研究第48-50页
     ·钙离子第48页
     ·活性氧(ROS)第48-49页
     ·凋亡诱导因子及相关蛋白第49页
     ·细胞色素C(Cyt C)第49页
     ·Bcl-2 家族第49-50页
     ·Caspase-3第50页
   ·PI3K/Akt信号通路与细胞凋亡第50-51页
   ·创新与结论第51-52页
 5 展望第52-53页
参考文献第53-59页
综述第59-69页
 参考文献第65-69页
个人简历第69-71页
致谢第71页

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