| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 1 引言 | 第10-17页 |
| ·马病毒性动脉炎概述 | 第10页 |
| ·EAV病原学 | 第10-11页 |
| ·EAV病毒形态学 | 第10页 |
| ·EAV的基因组结构 | 第10-11页 |
| ·EAV ORFs编码的蛋白及其分子生物学功能 | 第11页 |
| ·EAV的流行病学 | 第11页 |
| ·EAV的临床症状 | 第11-12页 |
| ·EAV的诊断 | 第12-14页 |
| ·临床诊断 | 第12页 |
| ·EAV的分离与鉴定 | 第12页 |
| ·血清学诊断 | 第12-13页 |
| ·分子生物学诊断 | 第13-14页 |
| ·EAV疫苗研究 | 第14-16页 |
| ·弱毒苗 | 第14-15页 |
| ·灭活苗 | 第15页 |
| ·基因工程疫苗 | 第15页 |
| ·亚单位疫苗 | 第15-16页 |
| ·EAV的预防 | 第16页 |
| ·加强饲养管理 | 第16页 |
| ·加强检疫 | 第16页 |
| ·EAV的治疗 | 第16页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-23页 |
| ·材料 | 第17-20页 |
| ·病毒、细胞及试验动物 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17-18页 |
| ·主要溶液和培养基的配制 | 第18页 |
| ·主要仪器 | 第18-19页 |
| ·病毒标准品及检测抗体的标记 | 第19页 |
| ·杂交瘤细胞2B3和2B9的复苏及培养 | 第19页 |
| ·MAb 2B3和MAb 2B9的制备 | 第19页 |
| ·MAb 2B3和MAb 2B9的纯化 | 第19页 |
| ·MAb 2B3和MAb 2B9特性鉴定 | 第19-20页 |
| ·EAV AC-ELISA方法的建立 | 第20-21页 |
| ·操作程序 | 第20页 |
| ·确定最佳反应条件 | 第20-21页 |
| ·确定临界值判定标准 | 第21页 |
| ·建立AC-ELISA方法的标准曲线 | 第21页 |
| ·AC-ELISA方法的评价 | 第21页 |
| ·AC-ELISA方法的应用 | 第21页 |
| ·EAV Eva Green荧光定量RT-PCR方法的建立 | 第21-23页 |
| ·引物设计 | 第21-22页 |
| ·病毒RNA的提取与cDNA合成 | 第22页 |
| ·目的基因的克隆与标准质粒的构建 | 第22页 |
| ·反应体系和程序 | 第22页 |
| ·标准曲线的建立 | 第22页 |
| ·荧光定量RT-PCR方法的评价 | 第22-23页 |
| ·荧光定量RT-PCR方法的应用 | 第23页 |
| 3 结果 | 第23-33页 |
| ·MAb 2B3和MAb 2B9特性鉴定 | 第23-24页 |
| ·Western blot(WB)鉴定 | 第23-24页 |
| ·IFA鉴定 | 第24页 |
| ·EAV AC-ELISA方法 | 第24-28页 |
| ·AC-ELISA检测方法反应条件的优化 | 第24-25页 |
| ·AC-ELISA的判定标准 | 第25页 |
| ·AC-ELISA方法的标准曲线 | 第25页 |
| ·AC-ELISA方法的特异性试验 | 第25-26页 |
| ·AC-ELISA方法的敏感性试验 | 第26-27页 |
| ·AC-ELISA方法的重复性试验 | 第27-28页 |
| ·AC-ELISA方法的应用 | 第28页 |
| ·EAV Eva Green荧光定量RT-PCR方法的建立与初步应用 | 第28-33页 |
| ·荧光定量RT-PCR的标准质粒 | 第28-29页 |
| ·荧光定量RT-PCR方法的标准曲线 | 第29-30页 |
| ·荧光定量RT-PCR方法的特异性试验 | 第30页 |
| ·荧光定量RT-PCR方法的敏感性试验 | 第30-32页 |
| ·荧光定量RT-PCR方法的重复性试验 | 第32页 |
| ·不同时间点病毒上清液的TCID_(50)测定及荧光定量RT-PCR扩增 | 第32-33页 |
| 4 讨论 | 第33-35页 |
| ·EAV AC-ELISA定量检测方法 | 第33-34页 |
| ·EAV Eva Green荧光定量RT-PCR检测方法 | 第34-35页 |
| 5 结论 | 第35-36页 |
| 致谢 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-43页 |
| 作者简介 | 第43页 |
