| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-9页 |
| 1 引言 | 第9-18页 |
| ·概述 | 第9-10页 |
| ·牛病毒性腹泻病-黏膜病的病原情况 | 第9页 |
| ·猪瘟病原情况 | 第9-10页 |
| ·牛病毒性腹泻-黏膜病的流行状况 | 第10-12页 |
| ·牛病毒性腹泻-黏膜病的国外流行状况 | 第10-11页 |
| ·牛病毒性腹泻-黏膜病的国内流行状况 | 第11-12页 |
| ·猪瘟的流行状况 | 第12-14页 |
| ·猪瘟的国外流行状况 | 第12页 |
| ·猪瘟的国内流行状况 | 第12-14页 |
| ·CSFV与BVDV的诊断 | 第14-18页 |
| ·血清学诊断方法 | 第14-16页 |
| ·CSFV和BVDV的分子生物学诊断方法 | 第16-18页 |
| ·研究目的意义 | 第18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-26页 |
| ·材料 | 第18-20页 |
| ·疫苗、病毒株和病料 | 第18页 |
| ·主要试剂和仪器设备 | 第18-19页 |
| ·引物与探针 | 第19-20页 |
| ·方法 | 第20-26页 |
| ·标准阳性质粒模板的制备 | 第20-23页 |
| ·CSFV和BVDV1的实时双荧光PCR试验参数的优化 | 第23-24页 |
| ·双重实时荧光定量PCR方法反应体系与参数的建立 | 第24页 |
| ·标准曲线的制备 | 第24-25页 |
| ·特异性试验 | 第25页 |
| ·敏感性试验 | 第25页 |
| ·重复性试验 | 第25页 |
| ·临床样品检测 | 第25-26页 |
| 3 结果 | 第26-37页 |
| ·标准阳性质粒模板的制备 | 第26-28页 |
| ·常规PCR的扩增结果 | 第26页 |
| ·重组质粒鉴定结果 | 第26-27页 |
| ·目的基因片段测序结果 | 第27页 |
| ·质粒拷贝数计算结果 | 第27-28页 |
| ·双重实时荧光PCR反应参数的优化结果 | 第28-31页 |
| ·引物浓度的优化结果 | 第28-29页 |
| ·探针浓度的优化结果 | 第29-30页 |
| ·常规PCR退火温度优化结果 | 第30-31页 |
| ·标准曲线的制备 | 第31-32页 |
| ·特异性实验 | 第32-33页 |
| ·敏感性试验结果 | 第33-35页 |
| ·单重实时荧光定量PCR敏感性结果 | 第33-34页 |
| ·双重实时荧光定量PCR敏感性结果 | 第34-35页 |
| ·重复性试验结果 | 第35页 |
| ·双重实时荧光定量PCR方法临床样品检测结果 | 第35-37页 |
| 4 讨论 | 第37-38页 |
| 5 结论 | 第38-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-47页 |
| 作者简介 | 第47页 |