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抑制植物RNA沉默的稻瘟病菌效应因子的筛选及功能研究

摘要第1-5页
Abstract第5-11页
1 引言第11-23页
   ·水稻稻瘟病研究概况第11-13页
   ·植物免疫机制研究进展第13-20页
     ·植物的免疫机制第14-16页
     ·PAMPs 触发的免疫反应第16-17页
     ·效应因子触发的免疫反应第17-20页
   ·真菌基因沉默抑制子的研究进展第20-21页
     ·基因沉默的发现及类型第20-21页
     ·基因沉默抑制子的种类第21页
     ·真菌沉默抑制子的作用机制第21页
   ·本研究的意义第21-23页
2 材料与方法第23-43页
   ·实验材料与仪器第23-24页
     ·实验材料第23页
     ·实验主要菌株和载体第23页
     ·实验主要试剂与酶第23页
     ·实验主要仪器及设备第23页
     ·培养基第23-24页
   ·实验方法第24-37页
     ·效应因子基因载体构建第24-37页
   ·稻瘟病菌效应子在转基因烟草上的筛选第37-38页
     ·农杆菌 EHA105 的转化第37页
     ·注射烟草第37-38页
   ·抑制植物基因沉默效应因子亚细胞定位第38-39页
     ·鉴定正确的质粒进行质粒中提第38页
     ·水稻原生质体的制备第38-39页
     ·水稻原生质体的转化第39页
   ·效应因子信号肽功能的验证第39-40页
     ·酵母感受态的制备第39页
     ·酵母感受态的转化第39-40页
     ·酵母分泌实验第40页
   ·效应因子的基因敲除第40-43页
     ·稻瘟菌原生质体的制备第40页
     ·稻瘟菌原生质体的转化第40-41页
     ·稻瘟菌效应因子基因敲除转化子的验证第41-43页
3 结果与分析第43-57页
   ·稻瘟菌菌株 Guy11 cDNA 获得第43页
   ·稻瘟菌效应因子基因 pGDR 载体构建第43-44页
   ·烟草接菌结果第44-45页
   ·抑制植物 RNA 沉默效应因子基因载体构建第45-48页
     ·抑制植物基因沉默效应因子的克隆第45-46页
     ·抑制植物基因沉默效应因子载体构建第46-48页
   ·水稻原生质体细胞亚细胞定位第48-50页
   ·对水稻稻瘟菌效应因子信号肽功能的验证第50-55页
   ·水稻稻瘟菌效应因子基因的敲除第55-57页
4 讨论第57-59页
   ·稻瘟菌效应因子具有抑制植物 RNA 沉默作用第57页
   ·水稻原生质体瞬时表达体系中效应因子基因的亚细胞定位第57-58页
   ·稻瘟菌效应因子预测信号肽分泌作用的鉴定第58页
   ·水稻稻瘟菌效应因子基因的敲除第58-59页
5 结论第59-61页
致谢第61-63页
参考文献第63-69页
攻读硕士学位期间发表的论文第69页

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