| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 缩略语表 (Abbreviation) | 第12-14页 |
| 1 前言 | 第14-22页 |
| ·糖类抗原 19-9 概述 | 第14-17页 |
| ·糖类抗原 19-9 结构特点 | 第14页 |
| ·糖类抗原 19-9 在诊断学中的实际意义 | 第14-16页 |
| ·糖类抗原 19-9 检测方法及国内外检测试剂盒比较 | 第16-17页 |
| ·单抗制备相关步骤原理及特点 | 第17-21页 |
| ·单克隆抗体及其重要生物学意义 | 第17-18页 |
| ·不同因素对单抗制备过程中的影响 | 第18-21页 |
| ·本研究的目的 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-44页 |
| ·材料 | 第22-29页 |
| ·免疫原 | 第22页 |
| ·实验动物与细胞株 | 第22页 |
| ·主要试剂及材料 | 第22-23页 |
| ·主要仪器设备 | 第23页 |
| ·主要溶液的配制 | 第23-29页 |
| ·方法 | 第29-44页 |
| ·免疫方案的确立 | 第29-30页 |
| ·单克隆抗体阳性检测方法的建立 | 第30页 |
| ·细胞融合 | 第30-31页 |
| ·CA19-9 单克隆抗体筛选方案的确定 | 第31-32页 |
| ·CA19-9 阳性杂交瘤细胞株检测 | 第32-33页 |
| ·阳性杂交瘤细胞株腹水制备及纯化 | 第33-34页 |
| ·CA19-9 单克隆抗体的初步鉴定 | 第34-36页 |
| ·双抗体夹心 ELISA 检测方法的建立 | 第36-41页 |
| ·临床检测试验 | 第41-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-58页 |
| ·间接 ELISA 检测方法的建立 | 第44页 |
| ·免疫效果对比及抗血清效价的检测 | 第44-45页 |
| ·阴、阳血清的最佳稀释浓度的确定 | 第45页 |
| ·细胞融合及克隆化筛选结果 | 第45-46页 |
| ·CA19-9 阳性杂交瘤细胞株冻存、传代稳定性检测结果 | 第46-47页 |
| ·单克隆抗体腹水效价测定 | 第47页 |
| ·单克隆抗体蛋白浓度、纯度鉴定 | 第47页 |
| ·单克隆抗体初步鉴定 | 第47-50页 |
| ·单克隆抗体亚型鉴定 | 第47-48页 |
| ·单克隆抗体交叉反应鉴定 | 第48页 |
| ·单克隆抗体亲和力鉴定 | 第48-49页 |
| ·杂交瘤细胞株染色体数目鉴定 | 第49-50页 |
| ·配对抗体的确定 | 第50页 |
| ·CA19-9 双抗体夹心 ELISA 检测方法的建立 | 第50-55页 |
| ·室内阴阳参考品的建立 | 第50-51页 |
| ·CA19-9 包被条件的优化 | 第51页 |
| ·CA19-9 封闭条件的优化 | 第51-52页 |
| ·确定酶标稀释缓冲液 | 第52-53页 |
| ·包被抗体浓度和酶标抗体稀释度的确立 | 第53页 |
| ·CA19-9 双抗体夹心 ELISA 检测体系的确定 | 第53-54页 |
| ·线性方程及范围 | 第54页 |
| ·包被过酶标检测板的稳定性验证 | 第54-55页 |
| ·CA19-9 双抗体夹心 ELISA 精密性测定 | 第55页 |
| ·CA19-9 双抗体夹心 ELISA 稳定性测定 | 第55-56页 |
| ·CA19-9 双抗体夹心 ELISA 检测方法与国外试剂盒比较 | 第56-58页 |
| 4 讨论 | 第58-60页 |
| ·对比免疫方式结果的讨论 | 第58页 |
| ·克隆化结果讨论 | 第58页 |
| ·CA19-9 双抗体夹心 ELISA 检测方法的建立 | 第58-60页 |
| 5 结论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-66页 |
| 致谢 | 第66-68页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第68-69页 |
