摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
缩略语表 | 第11-13页 |
第一部分 文献综述 | 第13-31页 |
1 hUC-MSCs 向肝样细胞分化的研究进展 | 第14-21页 |
·hUC-MSCs 的生物学特性 | 第14-16页 |
·hUC-MSCs 向肝样细胞分化的体外研究 | 第16-18页 |
·hUC-MSCs 向肝样细胞分化的体内及临床研究 | 第18-20页 |
·hUC-MSCs 的应用所面临的问题与前景 | 第20-21页 |
2 肝样细胞的诱导方法 | 第21-26页 |
·细胞因子诱导法 | 第21-23页 |
·转录因子诱导法 | 第23-24页 |
·miRNA 诱导法 | 第24-25页 |
·微环境诱导法 | 第25-26页 |
3 肝富集转录因子的功能 | 第26-28页 |
·GATA4 在肝脏发育中的功能 | 第27页 |
·HNF4α在肝脏发育中的功能 | 第27-28页 |
4 本研究的目的和意义 | 第28-31页 |
·研究目的 | 第28页 |
·研究意义 | 第28-31页 |
第二部分 材料和方法 | 第31-46页 |
1 实验材料 | 第31-34页 |
·实验细胞及质粒 | 第31页 |
·主要试剂与溶液配置 | 第31-33页 |
·实验室仪器设备 | 第33页 |
·主要耗材 | 第33-34页 |
2 实验方法 | 第34-46页 |
·质粒的提取 | 第34页 |
·感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
·重组慢病毒载体的构建 | 第35-36页 |
·hUC-MSCs 的分离、培养与鉴定 | 第36-38页 |
·鼠尾胶原蛋白的制备及包被 | 第38-39页 |
·细胞的复苏及培养 | 第39页 |
·慢病毒的制备与侵染性能检测 | 第39-40页 |
·肝样细胞的诱导及诱导细胞的培养 | 第40-41页 |
·诱导细胞的检测 | 第41-46页 |
第三部分 结果和讨论 | 第46-60页 |
1 GATA4 和 HNF4α基因扩增及其重组慢病毒载体的构建 | 第46-47页 |
2 hUC-MSCs 的分离、培养与鉴定结果 | 第47-48页 |
·hUC-MSCs 的分离、培养结果 | 第47页 |
·hUC-MSCs 表面标记物 CD44 的免疫荧光鉴定结果 | 第47-48页 |
3 重组慢病毒的制备结果 | 第48-49页 |
4 重组慢病毒的浓缩及其侵染性能的检测结果 | 第49-50页 |
5 hUC-MSCs 向肝细胞定向分化的诱导结果与分析 | 第50-53页 |
·GATA4 和 HNF4α重组慢病毒对 hUC-MSCs 的侵染结果 | 第50-51页 |
·GATA4 和 HNF4α介导的 hUC-MSCs 向肝细胞定向分化的结果 | 第51-52页 |
·RT-PCR 法分析诱导细胞的基因表达情况 | 第52页 |
·诱导细胞的功能检测—ICG 的摄取与排泌 | 第52-53页 |
6 小结 | 第53页 |
7 讨论 | 第53-60页 |
结论 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
攻读硕士学位期间参加的科研项目和发表论文 | 第72-73页 |