| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 縮略词 | 第8-12页 |
| 1 绪言 | 第12-22页 |
| ·油茶概述 | 第12页 |
| ·油茶栽培所面临的问题 | 第12-13页 |
| ·植物对磷元素的吸收和利用 | 第13-16页 |
| ·植物磷素营养的生理功能 | 第13-15页 |
| ·植物对磷素吸收 | 第15-16页 |
| ·植物体内磷素运输 | 第16页 |
| ·植物缺磷响应机制 | 第16-17页 |
| ·低磷胁迫下的植物生理变化 | 第16-17页 |
| ·低磷胁迫下的植物生化变化 | 第17页 |
| ·PHT1家族磷酸盐转运蛋白基因的研究进展 | 第17-20页 |
| ·PHT1家族成员的结构 | 第18-19页 |
| ·PHT1家族成员的表达 | 第19页 |
| ·PHT1基因的功能鉴定 | 第19-20页 |
| ·本研究的目的意义,技术路线及主要内容 | 第20-22页 |
| ·目的意义 | 第20-21页 |
| ·技术路线 | 第21页 |
| ·研究方法及内容 | 第21-22页 |
| 2 油茶PHT1基因的cDNA克隆、基因组克隆及生物信息学分析 | 第22-44页 |
| ·试验材料 | 第22-23页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·实验药品 | 第22-23页 |
| ·仪器设备 | 第23页 |
| ·实验方法及步骤 | 第23-34页 |
| ·油茶根系总RNA的制备 | 第23-24页 |
| ·RNA电泳检测 | 第24页 |
| ·反转录合成cDNA第一条链 | 第24-25页 |
| ·保守区域的扩增 | 第25-27页 |
| ·5'cDNA末端扩增 | 第27-29页 |
| ·3'cDNA末端扩增 | 第29-31页 |
| ·油茶PHT1基因全长的克隆 | 第31-32页 |
| ·油茶PHT1基因组的克隆 | 第32-33页 |
| ·序列分析与结构预测 | 第33-34页 |
| ·结果与分析 | 第34-42页 |
| ·油茶根系总RNA提取及检测 | 第34页 |
| ·油茶PHT1基因全长克隆 | 第34-38页 |
| ·油茶PHT1基因组扩增 | 第38页 |
| ·油茶PHT1基因生物信息分析 | 第38-42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| 3 油茶PHT1基因的表达模式 | 第44-51页 |
| ·试验材料 | 第44页 |
| ·植物材料 | 第44页 |
| ·实验药品 | 第44页 |
| ·仪器设备 | 第44页 |
| ·实验方法及步骤 | 第44-47页 |
| ·不同组织总RNA提取与cDNA样品制备 | 第44-45页 |
| ·引物设计 | 第45页 |
| ·qRT-PCR分析基因表达 | 第45-47页 |
| ·结果与分析 | 第47-49页 |
| ·总RNA提取 | 第47页 |
| ·RT-PCR反应 | 第47-48页 |
| ·qRT-PCR引物的特异性检测 | 第48页 |
| ·油茶PHT1基因与内参基因的标准曲线 | 第48-49页 |
| ·qRT-PCR检测油茶PHT1基因在不同磷水平下的表达模式 | 第49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 4 油茶PHT1基因的真核表达 | 第51-64页 |
| ·试验材料 | 第51-52页 |
| ·植物材料与菌株 | 第51-52页 |
| ·实验药品 | 第52页 |
| ·仪器设备 | 第52页 |
| ·实验方法及步骤 | 第52-58页 |
| ·中间过渡表达载体pCAMBIA-1304-35S的验证 | 第52-53页 |
| ·基因片段的制备 | 第53-54页 |
| ·超表达载体pCAMBIA1304-35s-CoPht1的构建 | 第54-55页 |
| ·超表达载体转化农杆菌 | 第55-56页 |
| ·野生型烟草的培养 | 第56页 |
| ·叶盘法转化烟草 | 第56-57页 |
| ·转基因烟草的阳性鉴定 | 第57-58页 |
| ·结果与分析 | 第58-63页 |
| ·中间过渡载体pCAMBIA-1304-35S的验证 | 第58-59页 |
| ·植物表达载体构建 | 第59-60页 |
| ·农杆菌阳性克隆鉴定 | 第60-61页 |
| ·转基因植株获得及鉴定 | 第61-63页 |
| ·讨论 | 第63-64页 |
| 5 结论与创新点 | 第64-65页 |
| ·结论 | 第64页 |
| ·创新点 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 附录A：常用实验药品配方 | 第73-74页 |
| 附录B：GenBank序列提交信息 | 第74-75页 |
| 附录C：攻读硕士学位期间的主要学术成果 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
