| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-15页 |
| 第1章 文献综述 | 第15-23页 |
| ·细菌毒素-抗毒素系统 | 第15-18页 |
| ·细菌毒素-抗毒素系统的种类 | 第15页 |
| ·Ⅱ类 TA 系统的一般特征 | 第15-16页 |
| ·TA 系统的生理功能 | 第16-18页 |
| ·依赖 ATP 的蛋白酶系统 | 第18-20页 |
| ·Lon 蛋白酶 | 第18-19页 |
| ·Clp 蛋白酶 | 第19-20页 |
| ·蓝细菌 PCC6803 基因组中的毒素-抗毒素系统 | 第20页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20-23页 |
| 第2章 relBE1 TA 系统反馈调控作用 | 第23-33页 |
| ·实验材料和方法 | 第23-26页 |
| ·质粒、菌株和培养条件 | 第23页 |
| ·分子生物学操作 | 第23-24页 |
| ·重组蛋白的诱导表达和检测 | 第24页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第24-25页 |
| ·大肠杆菌β-半乳糖苷酶活性的测定 | 第25-26页 |
| ·数据分析 | 第26页 |
| ·结果 | 第26-31页 |
| ·relBE1 转录融合报告质粒的构建 | 第26-27页 |
| ·relBE1 TA 系统的转录调控 | 第27-28页 |
| ·诱导毒素-抗毒素蛋白重组质粒的构建以及鉴定 | 第28-30页 |
| ·H_6-RelBE1 重组蛋白的纯化及检测 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| 第3章 依赖 ATP 蛋白酶对 relBE1 TA 系统活性的调控作用 | 第33-43页 |
| ·实验材料和方法 | 第33-36页 |
| ·菌株、质粒及培养条件 | 第33页 |
| ·分子生物学操作 | 第33-34页 |
| ·选择性表达菌株的诱导 | 第34-35页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第35页 |
| ·抗体效价检测及 Western blot 分析 | 第35-36页 |
| ·结果 | 第36-41页 |
| ·蛋白酶基因和选择性表达 TA 系统质粒的构建 | 第36-38页 |
| ·多克隆抗体的效价检测 | 第38页 |
| ·蛋白酶 Lon 和 Clp 降解抗毒素蛋白 RelB1 的 Western blot 检测 | 第38-40页 |
| ·双诱导调控重组菌株的细胞生长分析 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 第4章 relBE1 TA 系统的生理功能 | 第43-55页 |
| ·材料和实验方法 | 第43-46页 |
| ·菌株和质粒培养方法 | 第43页 |
| ·分子生物学操作方法 | 第43-44页 |
| ·集胞藻 PCC6803 染色体的提取 | 第44-45页 |
| ·集胞藻 PCC6803 的转化及转化子的筛选 | 第45页 |
| ·铜离子诱导表达调控突变株的生长表型分析 | 第45页 |
| ·突变株的表型分析 | 第45-46页 |
| ·结果 | 第46-52页 |
| ·relBE1 基因缺失突变株的构建 | 第46-47页 |
| ·缺失突变株 DR1164 在 Cd~2+胁迫条件下的表型分析 | 第47-48页 |
| ·互补突变株在 Cd~2+胁迫条件下的表型分析 | 第48-49页 |
| ·受铜离子诱导 relBE1 组分过表达的整合性重组质粒构建 | 第49-50页 |
| ·relBE1 基因过表达调控突变株的构建 | 第50-51页 |
| ·relBE1 基因过表达对集胞藻细胞生长的影响 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-55页 |
| 第5章 relBE1 TA 系统在自然宿主细胞中的转录调控作用 | 第55-61页 |
| ·材料和方法 | 第55-56页 |
| ·菌株、培养条件和分子生物学操作 | 第55-56页 |
| ·表达调控株β-半乳糖苷酶活性的测定 | 第56页 |
| ·表达调控株在 Cd~2+胁迫条件下的表型分析 | 第56页 |
| ·数据分析 | 第56页 |
| ·结果 | 第56-59页 |
| ·含有 LacZ 基因的重组突变株的构建 | 第56-57页 |
| ·relBE1 系统在自然宿主细胞中的转录调控作用及在 Cd~2+胁迫条件下的转录调控作用 | 第57-58页 |
| ·表达调控株在 Cd~2+胁迫条件下的表型分析 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| 第6章 结论与展望 | 第61-63页 |
| ·主要结论 | 第61-62页 |
| ·研究展望 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 附表 1 原始数据 | 第69-73页 |
| 附录 2 缩略语表 | 第73-74页 |
| 附录 3 主要实验仪器 | 第74-75页 |
| 附录 4 主要试剂及配制 | 第75-79页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
