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三疣梭子蟹CYP2和GST基因的cDNA克隆与表达分析

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
引言第12-13页
第一章 文献综述第13-22页
 1 药物代谢第13页
 2 CYP450第13-17页
   ·CYP450 研究简史第13-14页
   ·CYP450 命名第14页
   ·CYP450 结构特征与分布第14-15页
   ·CYP450 与药物的相互作用关系第15页
   ·CYP450 催化药物代谢的作用第15-16页
   ·药物对 CYP450 的诱导和抑制作用第16页
   ·CYP450 在甲壳动物中的研究进展第16-17页
 3 GST第17-19页
   ·GST 研究简史第17页
   ·GSTs 的分类以及分布第17-18页
   ·GST 的结构和功能第18页
   ·GST 在甲壳动物中的研究进展第18-19页
 4 磺胺类药物概述第19-22页
   ·磺胺类药物在水产上应用第19-20页
   ·磺胺类药物分类第20页
   ·本实验所关注的三种磺胺类药物第20-22页
第二章 三疣梭子蟹 CYP2 基因的 cDNA 克隆及表达分析第22-41页
 1 材料与方法第22-30页
   ·实验材料第22-23页
     ·实验动物第22页
     ·实验试剂第22-23页
     ·实验仪器第23页
   ·试验方法第23-30页
     ·样品处理第23页
     ·RNA 提取方法第23-24页
     ·去除总 RNA 中基因组 DNA第24页
     ·反转录反应第24-25页
     ·5′RACE 和 3′RACE cDNA 模板合成第25-26页
     ·三疣梭子蟹 CYP2 基因 cDNA 中间片段的克隆第26-27页
     ·CYP2 基因 3 ' 和 5 ' 末端扩增第27-29页
     ·CYP2 基因的生物信息学分析第29页
     ·三疣梭子蟹本体表达及肌注三种磺胺类药物对 CYP2 基因表达的影响第29页
     ·CYP2 基因 mRNAReal Time RT-PCR 定量检测第29-30页
     ·数据统计分析第30页
 2 结果第30-38页
   ·CYP2 基因的全长 cDNA 序列分析第30-32页
   ·CYP2 基因多序列比对及系统进化树分析第32-34页
   ·CYP2 基因在三疣梭子蟹各组织中的表达第34-35页
   ·不同剂量及作用时间的磺胺类药物对 CYP2 基因在肝胰腺中表达变化量的影响第35-38页
     ·不同剂量及作用时间的 SM2对 CYP2 基因在肝胰腺中表达变化量的影响第35-36页
     ·不同剂量及作用时间的SD对CYP2基因在肝胰腺中表达变化量的影响第36-37页
     ·不同剂量及作用时间的SMM对CYP2基因在肝胰腺中表达变化量的影响第37-38页
 3 讨论第38-41页
第三章 三疣梭子蟹 GST 基因的 cDNA 克隆及表达分析第41-56页
 1 材料与方法第41-43页
   ·实验材料第41-42页
     ·实验动物第42页
     ·实验试剂第42页
     ·实验仪器第42页
   ·试验方法第42-43页
     ·样品处理第42页
     ·RNA 提取方法第42页
     ·去除总 RNA 中基因组 DNA第42页
     ·反转录反应第42页
     ·5′RACE 和 3′RACE cDNA 模板合成第42页
     ·三疣梭子蟹 GST 基因 cDNA 全长的克隆第42-43页
     ·GST 基因的生物信息学分析第43页
     ·三疣梭子蟹本体表达及肌注三种磺胺类药物对 GST 基因表达的影响第43页
     ·GST 基因 mRNAReal Time RT-PCR 定量检测第43页
     ·数据统计分析第43页
 2 结果第43-53页
   ·GST 基因的全长 cDNA 序列分析第43-47页
   ·GST 基因多序列比对及系统进化树分析第47-49页
   ·GST 基因在三疣梭子蟹各组织中的表达第49-50页
   ·不同剂量及作用时间的磺胺类药物对GST基因在肝胰腺中表达变化量的影响第50-53页
     ·不同剂量及作用时间的SM2对GST 基因在肝胰腺中表达变化量的影响第50-51页
     ·不同剂量及作用时间的 SD 对 GST 基因在肝胰腺中表达变化量的影响第51-52页
     ·不同剂量及作用时间的 SMM 对 GST 基因在肝胰腺中表达变化量的影响第52-53页
 3 讨论第53-56页
第四章 磺胺类药物不同浓度对三疣梭子蟹 APND 和 GST 酶活性的影响第56-68页
 1 材料与方法第56-59页
   ·实验材料第56-57页
     ·实验动物第56-57页
     ·实验试剂第57页
     ·实验仪器第57页
   ·试验方法第57-58页
     ·实验设计第57页
     ·样品处理第57页
     ·蛋白含量的测定第57-58页
     ·氨基比林-N-脱甲基酶(APND)活性测定第58页
     ·谷胱甘肽 S-转移酶(GST)活性测定第58页
   ·数据统计分析第58-59页
 2 结果第59-65页
   ·标准曲线第59-60页
     ·牛血清白蛋白标准曲线第59页
     ·甲醛标准曲线第59-60页
   ·不同剂量及作用时间的磺胺类药物对 APND 酶活性的影响第60-62页
     ·不同剂量及作用时间的 SM2对 APND 酶活性的影响第60页
     ·不同剂量及作用时间的 SD 对 APND 酶活性的影响第60-61页
     ·不同剂量及作用时间的 SMM 对 APND 酶活性的影响第61-62页
   ·不同剂量及作用时间的磺胺类药物对 GST 酶活性的影响第62-65页
     ·不同剂量及作用时间的 SM2对 GST 酶活性的影响第62-63页
     ·不同剂量及作用时间的 SD 对 GST 酶活性的影响第63-64页
     ·不同剂量及作用时间的 SMM 对 GST 酶活性的影响第64-65页
 3 讨论第65-68页
   ·不同剂量及作用时间的磺胺类药物对 APND 酶活性的影响第65-66页
   ·不同剂量及作用时间的磺胺类药物对 GST 酶活性的影响第66-68页
参考文献第68-74页
硕士期间的文章发表情况第74-75页
致谢第75页

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