斑点叉尾鮰呼肠孤病毒诱导斑点叉尾鮰肾脏组织细胞凋亡的研究
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略语表 | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| 1. 斑点叉尾鮰呼肠孤病毒研究概况 | 第12-14页 |
| ·斑点叉尾鮰出血病的症状及流行特征 | 第12页 |
| ·斑点叉尾鮰呼肠孤病毒的特征 | 第12-13页 |
| ·斑点叉尾鮰呼肠孤病毒病的诊断 | 第13-14页 |
| ·组织病理学诊断 | 第13页 |
| ·细胞培养法分离鉴定病毒 | 第13-14页 |
| ·超微病理学技术检测 | 第14页 |
| ·分子生物学检测方法 | 第14页 |
| 2. 细胞凋亡 | 第14-21页 |
| ·细胞凋亡的概念 | 第14-15页 |
| ·细胞凋亡的形态以及生化特征 | 第15-16页 |
| ·细胞凋亡的发生机制 | 第16页 |
| ·细胞凋亡过程中相关凋亡因子 | 第16-18页 |
| ·Caspase家族 | 第17页 |
| ·原癌基因及抑癌基因 | 第17页 |
| ·病毒基因 | 第17-18页 |
| ·细胞凋亡的检测 | 第18-21页 |
| ·形态学观察 | 第18页 |
| ·DNA片段化分析 | 第18-19页 |
| ·TUNEL分析法 | 第19页 |
| ·Caspase-3活性的检测 | 第19页 |
| ·线粒体膜势能的检测 | 第19-20页 |
| ·流式细胞术 | 第20页 |
| ·其他方法 | 第20-21页 |
| 3. 病毒感染与细胞凋亡的研究现状 | 第21-22页 |
| ·病毒感染与细胞凋亡的关系 | 第21页 |
| ·病毒调节细胞凋亡的途径 | 第21-22页 |
| ·经免疫系统介导凋亡 | 第21-22页 |
| ·病毒直接调节凋亡 | 第22页 |
| ·病毒引起细胞凋亡的意义 | 第22页 |
| 4. 本论文研究的目的及意义 | 第22-24页 |
| 第二章 斑点叉尾鮰呼肠孤病毒的分离与培养方法 | 第24-35页 |
| 1 实验材料与方法 | 第24-29页 |
| ·材料 | 第24-25页 |
| ·患病鱼和细胞系 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| ·主要仪器与设备 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-29页 |
| ·CCK细胞复苏 | 第25-26页 |
| ·CCK细胞传代 | 第26页 |
| ·病毒分离 | 第26页 |
| ·病毒接种 | 第26-27页 |
| ·电镜观察 | 第27页 |
| ·病毒滴度(TCID_(50))测定 | 第27-28页 |
| ·病毒对冻融的敏感性 | 第28-29页 |
| 2 结果 | 第29-33页 |
| ·正常CCK细胞观察 | 第29页 |
| ·病理症状观察 | 第29-30页 |
| ·细胞病变观察 | 第30页 |
| ·超微结构观察 | 第30-31页 |
| ·病毒培养特性 | 第31页 |
| ·病毒滴度TCID_(50)测定 | 第31-32页 |
| ·冻融对病毒滴度的影响 | 第32-33页 |
| 3 讨论 | 第33-34页 |
| ·CCK细胞的生长 | 第33-34页 |
| ·病毒的培养特性 | 第34页 |
| ·冻融处理对病毒的影响 | 第34页 |
| 4 小结 | 第34-35页 |
| 第三章 斑点叉尾鮰呼肠孤病毒诱导CCK细胞凋亡 | 第35-48页 |
| 1 实验材料与方法 | 第35-38页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·毒株和细胞系 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35-36页 |
| ·主要仪器与设备 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-38页 |
| ·CCK的培养 | 第36页 |
| ·CCRV病毒感染 | 第36-37页 |
| ·Hoechst 33258荧光染色 | 第37页 |
| ·DNA Ladder试验 | 第37页 |
| ·TUNEL检测 | 第37-38页 |
| ·亚G_1期(sub-G1)细胞检测 | 第38页 |
| ·JC-1检测线粒体膜电位变化 | 第38页 |
| ·灭活CCRV诱导CCK凋亡试验 | 第38页 |
| 2 实验结果 | 第38-44页 |
| ·CCK细胞病变效应 | 第38-39页 |
| ·HOECHST 33258荧光染色 | 第39-40页 |
| ·DNALADDER试验 | 第40-41页 |
| ·TUNEL检测 | 第41-42页 |
| ·亚G_1期(suB-G1)细胞检测 | 第42-43页 |
| ·流式细胞仪JC-1检测 | 第43页 |
| ·灭活CCRV诱导CCK凋亡 | 第43-44页 |
| 3 讨论 | 第44-47页 |
| ·CCRV诱导的细胞凋亡形态学变化 | 第45页 |
| ·CCRV诱导的细胞凋亡生化特征变化 | 第45-46页 |
| ·流式细胞术在细胞凋亡检测中应用 | 第46-47页 |
| ·CCRV诱导CCK细胞凋亡与病毒核酸复制 | 第47页 |
| 4 小结 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-57页 |
| 附录 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
