中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
前言 | 第9-12页 |
材料 | 第12-13页 |
·重组质粒 | 第12页 |
·实验细胞 | 第12页 |
·实验试剂及来源 | 第12页 |
·实验器材 | 第12-13页 |
方法 | 第13-27页 |
·试剂的配置 | 第13-15页 |
·构建pGPU6/GFP/Neo-LDHA-siRNA载体 | 第15-16页 |
·质粒转化扩增 | 第16页 |
·挑单克隆,摇菌扩增质粒 | 第16-17页 |
·细胞培养及LDH-A短发夹RNA质粒表达载体的瞬时转染 | 第17-19页 |
·鉴定选择沉默效率最高的干扰质粒 | 第19-23页 |
·Western blot检测质粒干扰效率 | 第23-25页 |
·下调LDHA表达对胆管癌细胞系生物学影响 | 第25-27页 |
数据统计 | 第27页 |
结果 | 第27-35页 |
·胆管癌细胞较正常胆管上皮细胞过表达LDHA; | 第27-28页 |
·有效干扰质粒的筛选 | 第28-30页 |
·Western blot在蛋白水平检测重组质粒的干扰效果 | 第30-31页 |
·下调LDHA表达对胆管癌细胞系Hucct-1的生物学影响 | 第31-35页 |
讨论 | 第35-38页 |
结论 | 第38页 |
参考文献 | 第38-41页 |
综述 | 第41-51页 |
参考文献 | 第47-51页 |
缩略词表 | 第51-52页 |
附录 | 第52-53页 |
致谢 | 第53页 |