农杆菌介导的指状青霉转化体系的建立
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 1 前言 | 第9-20页 |
| ·柑橘采后病害的发生状况 | 第9-11页 |
| ·我国柑橘生产概况 | 第9页 |
| ·柑橘采后主要病害 | 第9-10页 |
| ·指状青霉病原菌概述 | 第10-11页 |
| ·丝状真菌遗传转化的研究进展 | 第11-16页 |
| ·丝状真菌遗传转化的主要方法 | 第12-14页 |
| ·根癌农杆菌介导转化的基本原理 | 第14-15页 |
| ·根癌农杆菌介导转化的优势 | 第15-16页 |
| ·T-DNA侧翼序列的扩增技术 | 第16-18页 |
| ·反向PCR法(inverse PCR) | 第16页 |
| ·质粒拯救法(plasmid rescue) | 第16-17页 |
| ·热不对称交错PCR法(TAIL-PCR) | 第17-18页 |
| ·课题来源及意义 | 第18-20页 |
| 2 试验材料与方法 | 第20-28页 |
| ·试验材料 | 第20-22页 |
| ·农杆菌 | 第20页 |
| ·指状青霉 | 第20页 |
| ·主要培养基 | 第20-21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22页 |
| ·试验方法 | 第22-28页 |
| ·农杆菌和指状青霉的保存 | 第22页 |
| ·指状青霉基因组总DNA的提取 | 第22-23页 |
| ·指状青霉对潮霉素B的敏感性检测 | 第23页 |
| ·指状青霉孢子悬浮液的配制 | 第23-24页 |
| ·农杆菌细胞的制备 | 第24页 |
| ·农杆菌与指状青霉共培养 | 第24页 |
| ·筛选转化子 | 第24-25页 |
| ·检测转化子的遗传稳定性 | 第25页 |
| ·转化子的分子分析 | 第25-27页 |
| ·苯乙醇(PEA)对转化子的抑菌效果 | 第27-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-35页 |
| ·指状青霉对潮霉素B的敏感性检测结果 | 第28-29页 |
| ·添加乙酰丁香酮对指状青霉N1转化的影响 | 第29-30页 |
| ·指状青霉孢子浓度对其转化的影响 | 第30-31页 |
| ·共培养时间对转化的影响 | 第31页 |
| ·转化子的遗传稳定性检测 | 第31-32页 |
| ·转化子的分子分析结果 | 第32-33页 |
| ·转化子的PCR鉴定结果 | 第32页 |
| ·Tail-PCR结果分析 | 第32-33页 |
| ·苯乙醇(PEA)对转化子的抑菌效果 | 第33-35页 |
| 4 讨论 | 第35-39页 |
| ·ATMT遗传转化条件的探索 | 第35-37页 |
| ·受体材料的选择对转化效率的影响 | 第35-36页 |
| ·乙酰丁香酮对转化效率的影响 | 第36页 |
| ·共培养条件对转化效率的影响 | 第36-37页 |
| ·转化子的稳定性 | 第37-38页 |
| ·展望 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-47页 |
| 附图及说明 | 第47-49页 |
| 致谢 | 第49页 |
