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N~+离子注入甘草诱导根部基因差异表达的分析

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
符号说明第12-13页
第一章 前言第13-24页
   ·离子束生物工程研究进展第13-16页
     ·离子束生物技术第13页
     ·离子束生物工程技术原理与研究进展第13-16页
   ·甘草相关研究进展第16-19页
     ·甘草简介第16页
     ·甘草利用价值第16-18页
     ·甘草酸合成机制的研究进展第18页
     ·甘草基因工程的研究进展第18-19页
   ·差异表达基因研究技术的研究进展第19-22页
     ·限制性内切酶片段长度多态性(Restriction Fragment LengthPolymorphism,RFLP)第19页
     ·随机扩增多态性DNA(Random Ampl ified Polymorphic DNA,RAPD)第19-20页
     ·单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP)第20页
     ·mRNA差异显示技术(mRNA differential display reversetranscription PCR,DDRT-PCR)第20页
     ·代表性差异分析(cDNA-representational differenceanalysis,cDNA-RDA)第20页
     ·基因表达系列分析(serial analusis of^ne e)q)ression, SAGE)第20-21页
     ·抑制性消减杂交技术(suppression subtraction hybridization, SSH)第21页
     ·扩増片段长度多态性标记(Ampliifed Fragment Length Polymorphism, AFLP)第21页
     ·cDNA-AFLP (cDNA-AFLP amplified fragment length polymorphism)技术原理及其应用第21-22页
   ·研究的目的和意义第22-24页
第二章 N~+离子注入甘草种子的诱变育种第24-33页
 引言第24页
   ·材料和试剂第24页
   ·主要仪器第24页
   ·离子束注入装置第24-25页
   ·试验方法第25-26页
     ·甘草种子预处理第25页
     ·低能氮离子注入第25-26页
     ·浸种液电导率的测定第26页
   ·结果与分析第26-31页
     ·不同剂量离子注入对种子浸种液电导率的影响第26-27页
     ·不同剂量离子注入对种子发芽的影响分析第27-29页
     ·不同剂量离子注入对种子发芽指数的影响分析第29-30页
     ·不同剂量离子注入对种子发芽进程的影响分析第30页
     ·发芽率、发芽势和发芽指数的单一因素方差分析第30-31页
   ·讨论第31-33页
第三章 N~+离子注入甘草诱导根部基因差异表达的cDNA-AFLP体系建立与分析第33-52页
 引言第33页
   ·试验材料第33页
   ·主要试剂及仪器第33-34页
     ·主要试剂第33页
     ·主要仪器第33-34页
   ·试验方法第34-39页
     ·总RNA的提取及双链cDNA的合成与精制第34-35页
     ·cDNA双链的酶切体系第35页
     ·接头连接与引物设计第35-36页
     ·预扩增体系与选择性扩增体系的优化第36-37页
     ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳第37-38页
     ·AFLP多态性片段的克隆、测序第38-39页
   ·结果与分析第39-49页
     ·总RNA的提取质量第39页
     ·cDNA双链合成第39页
     ·预扩增体系、选择性扩增体系的建立与优化第39-41页
     ·选择性扩增产物的聚丙烯酰胺凝胶优化第41-44页
     ·cDNA-AFLP差异条带测序及序列同源性分析第44-49页
   ·讨论第49-52页
     ·本研究所用方法及技术特点第49页
     ·cDNA-AFLP试验体系应注意的问题第49-50页
     ·cDNA-AFLP测序结果的序列同源性分析第50-52页
第四章 结论与讨论第52-54页
参考文献第54-62页
附录 攻读学位期间发表论文情况第62-63页
致谢第63页

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