摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-40页 |
1 水稻条纹病毒概述 | 第12-15页 |
·水稻条纹叶枯的分布及危害 | 第12-15页 |
·水稻条纹病毒的生物学特性 | 第15页 |
2 RSV基因组结构及所编码的蛋白 | 第15-20页 |
·病毒粒体 | 第15-16页 |
·RSV基因组的结构 | 第16-17页 |
·病毒基因组编码的蛋白 | 第17-20页 |
3 病毒RNA加帽机制 | 第20-29页 |
·帽子依赖和非帽子依赖的蛋白质翻译起始 | 第20-21页 |
·RNA 5’端帽子的结构及加帽过程 | 第21-23页 |
·病毒RNA加帽机制的多样性 | 第23-26页 |
·抓帽机制的研究概况 | 第26-29页 |
·抓帽机制的存在和过程 | 第26-28页 |
·抓帽机制的模型 | 第28页 |
·抓帽产生引物RNA的偏好性 | 第28-29页 |
4 布尼亚病毒科膜蛋白的研究概况 | 第29-40页 |
·布尼亚病毒侵入、组装及释放 | 第32-34页 |
·病毒侵入 | 第32-33页 |
·病毒组装及释放 | 第33-34页 |
·糖蛋白GP的切割成熟 | 第34-36页 |
·糖蛋白GPs C端CTS的功能 | 第36-40页 |
·病毒粒子出芽释放 | 第36-37页 |
·病毒的组装 | 第37-38页 |
·其他功能 | 第38-40页 |
第二章 水稻条纹病毒mRNA转录起始机制的研究 | 第40-60页 |
摘要 | 第40-41页 |
ABSTRACT | 第41-42页 |
1 材料与方法 | 第42-48页 |
·材料与毒源 | 第42-43页 |
·试验方法 | 第43-48页 |
·摩擦接种法 | 第43页 |
·总RNA的抽提 | 第43页 |
·RT-PCR反应 | 第43-45页 |
·割胶回收 | 第45页 |
·连接 | 第45-46页 |
·感受态细胞制备及转化 | 第46页 |
·菌落PCR筛选阳性克隆 | 第46-47页 |
·质粒小提 | 第47-48页 |
·测序 | 第48页 |
·序列分析 | 第48页 |
2 结果与分析 | 第48-54页 |
·CMV RNAs可为RSV mRNA提供帽子结构 | 第48-51页 |
·在RSV转录起始切割CMV RNA帽子的序列偏好性 | 第51-53页 |
·起始RSV mRNA转录的帽子长度要求及偏好性 | 第53-54页 |
·重复的引物重配所“窃取”的帽子长度至适用RSV转录延伸 | 第54页 |
3 讨论 | 第54-60页 |
第三章 RSV NSvc2蛋白在植物细胞中的亚细胞定位研究 | 第60-86页 |
摘要 | 第60-61页 |
ABSTRACT | 第61-63页 |
1 材料与方法 | 第63-68页 |
·材料与毒源 | 第63页 |
·试验方法 | 第63-68页 |
·摩擦接种法 | 第63页 |
·总蛋白的抽提 | 第63页 |
·Western bolt | 第63-64页 |
·载体构建(图3-1) | 第64-67页 |
·农杆菌转化 | 第67页 |
·农杆菌浸润 | 第67-68页 |
·显微观察 | 第68页 |
·序列分析 | 第68页 |
2 结果与分析 | 第68-82页 |
·RSV NSvc2在本氏烟中可以发生切割 | 第68-70页 |
·NSvc2-N蛋白定位于高尔基体 | 第70-71页 |
·NSvc2-C蛋白累积在内质网膜上 | 第71-72页 |
·NSvc2-N蛋白把NSvc2-C从ER招募到高尔基体 | 第72-73页 |
·在本氏烟中NSvc2蛋白与高尔基体共运动 | 第73-75页 |
·糖蛋白NSvc2从ER到Golgi的转运依赖于COPⅡ复合钵 | 第75-77页 |
·糖蛋白NSvc2积累于Golgi依赖于COPI途径 | 第77-79页 |
·NSvc2-N的高尔基体定位信号位于其C端的跨膜区及其毗邻的24 aa胞浆尾部 | 第79-82页 |
3 讨论 | 第82-86页 |
第四章 全文总结 | 第86-90页 |
1 全文总结 | 第86-87页 |
·RSV mRNA转录起始机制的研究 | 第86-87页 |
·RSV NSvc2蛋白在植物细胞中的亚细胞定位研究 | 第87页 |
2 本研究的创新点 | 第87-90页 |
参考文献 | 第90-104页 |
附录A:本论文主要的重要缩写词及中文对照 | 第104-106页 |
附录B:本研究所用的引物 | 第106-108页 |
附录C:本研究所用缓冲液及培养基配方 | 第108-112页 |
附录D:常用的抗生素及使用浓度 | 第112-114页 |
附录E:研究生期间发表的学术论文 | 第114-116页 |
致谢 | 第116页 |