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水稻条纹病毒mRNA转录起始机制及其NSvc2蛋白在植物细胞中的亚细胞定位研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-12页
第一章 文献综述第12-40页
 1 水稻条纹病毒概述第12-15页
   ·水稻条纹叶枯的分布及危害第12-15页
   ·水稻条纹病毒的生物学特性第15页
 2 RSV基因组结构及所编码的蛋白第15-20页
   ·病毒粒体第15-16页
   ·RSV基因组的结构第16-17页
   ·病毒基因组编码的蛋白第17-20页
 3 病毒RNA加帽机制第20-29页
   ·帽子依赖和非帽子依赖的蛋白质翻译起始第20-21页
   ·RNA 5’端帽子的结构及加帽过程第21-23页
   ·病毒RNA加帽机制的多样性第23-26页
   ·抓帽机制的研究概况第26-29页
     ·抓帽机制的存在和过程第26-28页
     ·抓帽机制的模型第28页
     ·抓帽产生引物RNA的偏好性第28-29页
 4 布尼亚病毒科膜蛋白的研究概况第29-40页
   ·布尼亚病毒侵入、组装及释放第32-34页
     ·病毒侵入第32-33页
     ·病毒组装及释放第33-34页
   ·糖蛋白GP的切割成熟第34-36页
   ·糖蛋白GPs C端CTS的功能第36-40页
     ·病毒粒子出芽释放第36-37页
     ·病毒的组装第37-38页
     ·其他功能第38-40页
第二章 水稻条纹病毒mRNA转录起始机制的研究第40-60页
 摘要第40-41页
 ABSTRACT第41-42页
 1 材料与方法第42-48页
   ·材料与毒源第42-43页
   ·试验方法第43-48页
     ·摩擦接种法第43页
     ·总RNA的抽提第43页
     ·RT-PCR反应第43-45页
     ·割胶回收第45页
     ·连接第45-46页
     ·感受态细胞制备及转化第46页
     ·菌落PCR筛选阳性克隆第46-47页
     ·质粒小提第47-48页
     ·测序第48页
     ·序列分析第48页
 2 结果与分析第48-54页
   ·CMV RNAs可为RSV mRNA提供帽子结构第48-51页
   ·在RSV转录起始切割CMV RNA帽子的序列偏好性第51-53页
   ·起始RSV mRNA转录的帽子长度要求及偏好性第53-54页
   ·重复的引物重配所“窃取”的帽子长度至适用RSV转录延伸第54页
 3 讨论第54-60页
第三章 RSV NSvc2蛋白在植物细胞中的亚细胞定位研究第60-86页
 摘要第60-61页
 ABSTRACT第61-63页
 1 材料与方法第63-68页
   ·材料与毒源第63页
   ·试验方法第63-68页
     ·摩擦接种法第63页
     ·总蛋白的抽提第63页
     ·Western bolt第63-64页
     ·载体构建(图3-1)第64-67页
     ·农杆菌转化第67页
     ·农杆菌浸润第67-68页
     ·显微观察第68页
     ·序列分析第68页
 2 结果与分析第68-82页
   ·RSV NSvc2在本氏烟中可以发生切割第68-70页
   ·NSvc2-N蛋白定位于高尔基体第70-71页
   ·NSvc2-C蛋白累积在内质网膜上第71-72页
   ·NSvc2-N蛋白把NSvc2-C从ER招募到高尔基体第72-73页
   ·在本氏烟中NSvc2蛋白与高尔基体共运动第73-75页
   ·糖蛋白NSvc2从ER到Golgi的转运依赖于COPⅡ复合钵第75-77页
   ·糖蛋白NSvc2积累于Golgi依赖于COPI途径第77-79页
   ·NSvc2-N的高尔基体定位信号位于其C端的跨膜区及其毗邻的24 aa胞浆尾部第79-82页
 3 讨论第82-86页
第四章 全文总结第86-90页
 1 全文总结第86-87页
   ·RSV mRNA转录起始机制的研究第86-87页
   ·RSV NSvc2蛋白在植物细胞中的亚细胞定位研究第87页
 2 本研究的创新点第87-90页
参考文献第90-104页
附录A:本论文主要的重要缩写词及中文对照第104-106页
附录B:本研究所用的引物第106-108页
附录C:本研究所用缓冲液及培养基配方第108-112页
附录D:常用的抗生素及使用浓度第112-114页
附录E:研究生期间发表的学术论文第114-116页
致谢第116页

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