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长角血蜱Tm蛋白和MALC蛋白的免疫保护性初步分析

摘要第1-4页
Abstract第4-6页
英文缩略表第6-10页
第一章 文献综述第10-19页
   ·蜱的概况第10-11页
     ·蜱虫形态特征第10-11页
     ·生长发育第11页
   ·传播疾病第11-12页
     ·森林脑炎第11-12页
     ·新疆出血热第12页
     ·莱姆病第12页
     ·Q 热第12页
   ·蜱肌肉的组成第12-14页
     ·肌球蛋白第12-13页
       ·肌球蛋白性质第13页
       ·肌球蛋白功能第13页
     ·原肌球蛋白第13页
     ·肌动蛋白第13-14页
     ·肌钙蛋白第14页
   ·蜱类肌肉相关蛋白的研究进展第14-16页
     ·长角血蜱的肌肉相关蛋白研究进展第14-15页
     ·青海血蜱的肌肉相关蛋白研究进展第15页
     ·扇头蜱肌肉相关蛋白的研究进展第15-16页
   ·其他节肢动物肌肉相关蛋白的研究进展第16-17页
     ·甲壳纲肌肉相关蛋白的研究进展第16页
     ·蛛形纲肌肉相关蛋白的研究进展第16-17页
     ·多足纲肌肉相关蛋白的研究进展第17页
     ·昆虫纲肌肉相关蛋白的研究进展第17页
   ·本研究的目的及意义第17-19页
第二章 HL-Tm 和 HL-MALC 基因的生物信息学分析第19-30页
   ·材料方法第19-20页
     ·生物信息学方法分析目的基因的全序列第19-20页
   ·结果第20-28页
     ·HL-Tm 基因全长的获得及生物信息学分析第20-24页
     ·HL-MALC 基因全长的获得及生物信息学分析第24-28页
   ·讨论第28-30页
第三章 HL-Tm 和 HL-MALC 基因的原核表达及其反应原性初步鉴定第30-40页
   ·材料第31-32页
     ·蜱、实验动物第31页
     ·试剂第31页
     ·仪器设备第31-32页
   ·方法第32-35页
     ·引物设计第32页
     ·聚合酶链式反应第32页
     ·HL-Tm 和 HL-MALC 基因的克隆以及测序第32-33页
     ·重组表达载体的构建和 PCR 鉴定第33-34页
     ·重组载体的原核表达第34页
     ·MagneGSTTM 小量纯化蛋白第34页
     ·Westernblot 检测第34-35页
   ·结果第35-39页
     ·长角血蜱基因 Tm 和 MALC 基因的 ORF 扩增结果第35-36页
     ·HL-Tm 和 HL-MALC 基因表达产物及纯化的重组蛋白质的 SDS-PAGE 分析第36-37页
     ·Western-blotting 分析表达产物第37-39页
   ·讨论第39-40页
第四章 HL-Tm 基因和 HL-MALC 基因在长角血蜱不同发育阶段和组织的转录第40-47页
   ·材料第40-41页
     ·蜱、组织收集、总 RNA 的提取和 cDNA 合成第40页
     ·试剂第40-41页
     ·仪器设备第41页
   ·HL-Tm 基因和 HL-MALC 基因在长角血蜱不同发育阶段和组织的转录第41-42页
     ·荧光相对定量 PCR 引物第41页
     ·相对定量分析目的基因在长角血蜱п同发育阶段和组织中的转录第41-42页
   ·结果第42-45页
     ·相对定量分析 HL-Tm 基因在п同组织、п同发育阶段的转录第42-44页
     ·相对定量分析 HL-MALC 基因在п同组织、п同发育阶段的转录第44-45页
   ·讨论第45-47页
第五章 HL-Tm 和 HL-MALC 基因的动物免疫及攻蜱实验和 RNAi 实验第47-60页
   ·材料第47-48页
     ·蜱、组织收集、总 RNA 的提取和 cDNA 合成第47页
     ·试剂第47-48页
     ·仪器设备第48页
   ·方法第48-52页
     ·融合蛋白的大量纯化第48-49页
     ·蛋白免疫及攻蜱试验第49页
     ·RNAi 实验第49-52页
       ·Liner DNA template 的扩增第49-50页
       ·ds RNA 的制备第50-51页
       ·ds RNA 的显微注射第51-52页
       ·接种至兔体饲血第52页
       ·干扰效果分析第52页
       ·干扰后蜱的沉默效果第52页
   ·结果第52-58页
     ·rHL-Tm 免疫和攻蜱实验第52-53页
     ·rHL- MALC 免疫和攻蜱实验第53-54页
     ·RNAi 试验结果第54-58页
       ·dsRNA 的合成第54-55页
       ·RNA 干扰后目的基因的沉默效果评价第55-56页
       ·HL-Tm 沉默后对长角血蜱生物学特性的影响第56-57页
       ·HL-MALC 沉默后对长角血蜱生物学特性的影响第57-58页
   ·讨论第58-60页
全文结论第60-61页
参考文献第61-66页
致谢第66-67页
作者简历第67-68页
附录第68-72页

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