摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-6页 |
英文缩略表 | 第6-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-19页 |
·蜱的概况 | 第10-11页 |
·蜱虫形态特征 | 第10-11页 |
·生长发育 | 第11页 |
·传播疾病 | 第11-12页 |
·森林脑炎 | 第11-12页 |
·新疆出血热 | 第12页 |
·莱姆病 | 第12页 |
·Q 热 | 第12页 |
·蜱肌肉的组成 | 第12-14页 |
·肌球蛋白 | 第12-13页 |
·肌球蛋白性质 | 第13页 |
·肌球蛋白功能 | 第13页 |
·原肌球蛋白 | 第13页 |
·肌动蛋白 | 第13-14页 |
·肌钙蛋白 | 第14页 |
·蜱类肌肉相关蛋白的研究进展 | 第14-16页 |
·长角血蜱的肌肉相关蛋白研究进展 | 第14-15页 |
·青海血蜱的肌肉相关蛋白研究进展 | 第15页 |
·扇头蜱肌肉相关蛋白的研究进展 | 第15-16页 |
·其他节肢动物肌肉相关蛋白的研究进展 | 第16-17页 |
·甲壳纲肌肉相关蛋白的研究进展 | 第16页 |
·蛛形纲肌肉相关蛋白的研究进展 | 第16-17页 |
·多足纲肌肉相关蛋白的研究进展 | 第17页 |
·昆虫纲肌肉相关蛋白的研究进展 | 第17页 |
·本研究的目的及意义 | 第17-19页 |
第二章 HL-Tm 和 HL-MALC 基因的生物信息学分析 | 第19-30页 |
·材料方法 | 第19-20页 |
·生物信息学方法分析目的基因的全序列 | 第19-20页 |
·结果 | 第20-28页 |
·HL-Tm 基因全长的获得及生物信息学分析 | 第20-24页 |
·HL-MALC 基因全长的获得及生物信息学分析 | 第24-28页 |
·讨论 | 第28-30页 |
第三章 HL-Tm 和 HL-MALC 基因的原核表达及其反应原性初步鉴定 | 第30-40页 |
·材料 | 第31-32页 |
·蜱、实验动物 | 第31页 |
·试剂 | 第31页 |
·仪器设备 | 第31-32页 |
·方法 | 第32-35页 |
·引物设计 | 第32页 |
·聚合酶链式反应 | 第32页 |
·HL-Tm 和 HL-MALC 基因的克隆以及测序 | 第32-33页 |
·重组表达载体的构建和 PCR 鉴定 | 第33-34页 |
·重组载体的原核表达 | 第34页 |
·MagneGSTTM 小量纯化蛋白 | 第34页 |
·Westernblot 检测 | 第34-35页 |
·结果 | 第35-39页 |
·长角血蜱基因 Tm 和 MALC 基因的 ORF 扩增结果 | 第35-36页 |
·HL-Tm 和 HL-MALC 基因表达产物及纯化的重组蛋白质的 SDS-PAGE 分析 | 第36-37页 |
·Western-blotting 分析表达产物 | 第37-39页 |
·讨论 | 第39-40页 |
第四章 HL-Tm 基因和 HL-MALC 基因在长角血蜱不同发育阶段和组织的转录 | 第40-47页 |
·材料 | 第40-41页 |
·蜱、组织收集、总 RNA 的提取和 cDNA 合成 | 第40页 |
·试剂 | 第40-41页 |
·仪器设备 | 第41页 |
·HL-Tm 基因和 HL-MALC 基因在长角血蜱不同发育阶段和组织的转录 | 第41-42页 |
·荧光相对定量 PCR 引物 | 第41页 |
·相对定量分析目的基因在长角血蜱п同发育阶段和组织中的转录 | 第41-42页 |
·结果 | 第42-45页 |
·相对定量分析 HL-Tm 基因在п同组织、п同发育阶段的转录 | 第42-44页 |
·相对定量分析 HL-MALC 基因在п同组织、п同发育阶段的转录 | 第44-45页 |
·讨论 | 第45-47页 |
第五章 HL-Tm 和 HL-MALC 基因的动物免疫及攻蜱实验和 RNAi 实验 | 第47-60页 |
·材料 | 第47-48页 |
·蜱、组织收集、总 RNA 的提取和 cDNA 合成 | 第47页 |
·试剂 | 第47-48页 |
·仪器设备 | 第48页 |
·方法 | 第48-52页 |
·融合蛋白的大量纯化 | 第48-49页 |
·蛋白免疫及攻蜱试验 | 第49页 |
·RNAi 实验 | 第49-52页 |
·Liner DNA template 的扩增 | 第49-50页 |
·ds RNA 的制备 | 第50-51页 |
·ds RNA 的显微注射 | 第51-52页 |
·接种至兔体饲血 | 第52页 |
·干扰效果分析 | 第52页 |
·干扰后蜱的沉默效果 | 第52页 |
·结果 | 第52-58页 |
·rHL-Tm 免疫和攻蜱实验 | 第52-53页 |
·rHL- MALC 免疫和攻蜱实验 | 第53-54页 |
·RNAi 试验结果 | 第54-58页 |
·dsRNA 的合成 | 第54-55页 |
·RNA 干扰后目的基因的沉默效果评价 | 第55-56页 |
·HL-Tm 沉默后对长角血蜱生物学特性的影响 | 第56-57页 |
·HL-MALC 沉默后对长角血蜱生物学特性的影响 | 第57-58页 |
·讨论 | 第58-60页 |
全文结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
作者简历 | 第67-68页 |
附录 | 第68-72页 |