| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-29页 |
| ·性发育研究理论简介 | 第13-19页 |
| ·性发育启动神经内分泌信号调控机制 | 第13-15页 |
| ·小鼠性发育启动的性状鉴定指标 | 第15-16页 |
| ·转基因小鼠的构建方法 | 第16-19页 |
| ·miRNA概述 | 第19-22页 |
| ·miRNA的生成 | 第19页 |
| ·miRNA的生物学功能 | 第19-20页 |
| ·miRNA的表达特性 | 第20页 |
| ·miRNA的发现与研究进展 | 第20-22页 |
| ·miRNA的研究应用 | 第22页 |
| ·立题背景 | 第22-27页 |
| ·利用近交系小鼠的研究 | 第22-23页 |
| ·本实验室QTL区段定位进展 | 第23-24页 |
| ·miRNA-505简介 | 第24-25页 |
| ·miRNA的检测 | 第25-27页 |
| ·研究思路及研究意义 | 第27-29页 |
| ·研究思路 | 第27-28页 |
| ·研究意义 | 第28-29页 |
| 第二章 材料与方法 | 第29-43页 |
| ·实验模型构建 | 第29-31页 |
| ·小鼠的饲养 | 第29页 |
| ·小鼠性发育启动的性状鉴定 | 第29-31页 |
| ·材料 | 第31-34页 |
| ·实验仪器 | 第31-32页 |
| ·实验试剂 | 第32-33页 |
| ·软件与网络资源 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-41页 |
| ·小鼠PCR分型 | 第34-36页 |
| ·组织取样 | 第36页 |
| ·小鼠RNA的抽提、定量 | 第36-37页 |
| ·目的基因引物设计 | 第37-39页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第39-40页 |
| ·看家基因优选 | 第40页 |
| ·目的基因实时荧光定量PCR | 第40-41页 |
| ·数据分析 | 第41-43页 |
| ·基因表达相对定量分析方法 | 第41页 |
| ·基因表达绝对定量分析方法 | 第41-43页 |
| 第3章 结果与分析 | 第43-59页 |
| ·PCR分型检测结果 | 第43-44页 |
| ·基因组DNA抽提结果 | 第43页 |
| ·DNA扩增结果 | 第43-44页 |
| ·雌鼠表型鉴定数据结果分析 | 第44-45页 |
| ·阴道口开启时间分析 | 第44页 |
| ·生长曲线分析 | 第44-45页 |
| ·miRNA基因表达定量检测的实验方案分析 | 第45-53页 |
| ·RNA抽提与质检 | 第45-46页 |
| ·内参基因的优选 | 第46-47页 |
| ·miRNA成熟体检测方案的建立 | 第47-50页 |
| ·miRNA前体和初级体检测方案的建立 | 第50-53页 |
| ·目的基因表达量分析 | 第53-59页 |
| ·miRNA前体和初级体转录表达水平 | 第53-56页 |
| ·miRNA成熟体基因表达水平 | 第56-59页 |
| 第四章 讨论 | 第59-64页 |
| ·miRNA-505转基因小鼠构建的讨论 | 第59页 |
| ·检测microRNAs的实时定量RT-PCR的讨论 | 第59-60页 |
| ·内参基因的优选 | 第60-61页 |
| ·本课题构建的qRT-PCR技术平台的要点 | 第61-62页 |
| ·PCR污染 | 第61页 |
| ·样本的保存 | 第61页 |
| ·位置效应和固定阈值 | 第61-62页 |
| ·性发育启动相关鉴定指标结果讨论 | 第62页 |
| ·基因转录表达水平分析 | 第62-64页 |
| 第5章 结论与展望 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 课题来源 | 第72-73页 |
| 攻读硕士学位期间学术论文目录 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |