| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 缩略词表 | 第11-13页 |
| 第一部分 Neuritin 在视神经损伤后视网膜和视神经中的表达变化 | 第13-36页 |
| 一、前言 | 第13-15页 |
| 二、实验材料 | 第15-17页 |
| 三、实验方法 | 第17-25页 |
| （一）组织学切片 | 第17-18页 |
| （二）免疫组织化学 | 第18页 |
| （三）免疫荧光组织化学 | 第18-19页 |
| （四）动物模型的制作 | 第19-20页 |
| （五）伊红苏木素（HE）染色 | 第20页 |
| （六）视神经顺行束路追踪 | 第20-21页 |
| （七）透射电子显微镜观察 | 第21页 |
| （八）免疫印迹法(Western blot) | 第21-23页 |
| （九）实时荧光定量 PCR | 第23-24页 |
| （十）统计学分析 | 第24-25页 |
| 四、结果 | 第25-32页 |
| （一） Neuritin 在正常视网膜和视神经中的表达定位 | 第25-28页 |
| （二）动物模型的建立 | 第28-31页 |
| （三） Neuritin 在视神经损伤后视网膜和视神经中的表达变化 | 第31-32页 |
| 五、讨论 | 第32-36页 |
| （一） Neuritin 在正常视网膜和视神经中的表达定位 | 第32-34页 |
| （二）建立视神经不完全损伤模型 | 第34页 |
| （三）Neuritin 在视神经受损后视网膜及视神经中的表达变化 | 第34-36页 |
| 第二部分 Neuritin 慢病毒对受损视神经和 RGC5 的修复作用及机制 | 第36-77页 |
| 一、前言 | 第36页 |
| 二、实验材料 | 第36-41页 |
| 三、实验方法 | 第41-52页 |
| （一）目的基因片段获取 | 第41-42页 |
| （二）慢病毒载体及 Nrn1 基因的酶切连接和转化 | 第42-44页 |
| （三）Nrn1 基因慢病毒质粒的抽提及鉴定 | 第44-45页 |
| （四）病毒包装细胞 293T 细胞的培养 | 第45-46页 |
| （五）慢病毒生产及滴度测定 | 第46-47页 |
| （六）动物实验分组 | 第47-48页 |
| （七）视神经损伤形态学指标检测 | 第48页 |
| （八）RGC5 的培养及诱导分化 | 第48页 |
| （九）RGC5 损伤模型的建立 | 第48-49页 |
| （十）RGC5 损伤后 Neuritin 表达变化的检测 | 第49页 |
| （十一）Neuritin 基因过表达及实验分组 | 第49-50页 |
| （十二）细胞存活率的检测 | 第50页 |
| （十三）细胞突起长度的检测 | 第50页 |
| （十四）细胞凋亡的检测 | 第50-51页 |
| （十五）神经营养因子相关信号通路蛋白表达的检测 | 第51页 |
| （十六）统计学分析 | 第51-52页 |
| 四、结果 | 第52-72页 |
| （一）Neuritin 慢病毒重组质粒的构建 | 第52-55页 |
| （二）Neuritin 慢病毒重组病毒的包装 | 第55-57页 |
| （三）Neuritin 对受损视神经的作用 | 第57-60页 |
| （四）Neuritin 在体外对 RGC5 的作用及机制 | 第60-72页 |
| 五、讨论 | 第72-77页 |
| （一）慢病毒基因治疗 | 第72-73页 |
| （二）Neuritin 慢病毒载体对大鼠视神经损伤的修复作用 | 第73页 |
| （三）RGC5 损伤模型的建立 | 第73-74页 |
| （四）Neuritin 蛋白或者过表达对受损 RGC5 的保护作用 | 第74-75页 |
| （五）Neuritin 保护作用的可能作用机制 | 第75-77页 |
| 全文小结 | 第77-78页 |
| 创新点及意义 | 第78-79页 |
| 附录 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-86页 |
| 综述 | 第86-94页 |
| 参考文献 | 第92-94页 |
| 在读期间发表论文和参加科研工作情况说明 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
