| 摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-18页 |
| 前言 | 第18-23页 |
| 参考文献 | 第21-23页 |
| 第一章 抗菌肽 D-Nal-Pac-525 对变形链球菌生长及其生物膜形成影响的实验研究 | 第23-43页 |
| 材料和方法 | 第24-29页 |
| 1. 材料 | 第24-25页 |
| ·菌株 | 第24页 |
| ·抗菌肽的制备 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| 2. 方法 | 第25-29页 |
| ·变形链球菌生长曲线的测定 | 第25-26页 |
| ·抗菌肽最低抑菌浓度 ( M I C ） 的测定 | 第26-27页 |
| ·D-Nal-Pac-525 对 S.mutans 生长抑制试验 | 第27页 |
| ·D-Nal-Pac-525 对 S.mutans 杀菌活性试验 | 第27页 |
| ·扫描电镜 | 第27页 |
| ·透射电镜 | 第27页 |
| ·生物膜实验 | 第27-28页 |
| ·生物膜相关基因转录水平的 RT-PCR | 第28-29页 |
| ·统计分析方法 | 第29页 |
| 结果 | 第29-36页 |
| 1. S.mutans UA159 的微生物学一般特征 | 第29-30页 |
| 2. S.mutans 生长曲线的测定 | 第30页 |
| 3. 抗菌肽最低抑菌浓度 ( M I C ） 的测定 | 第30页 |
| 4. D-Nal-Pac-525 对变形链球菌生长抑制试验 | 第30-31页 |
| 5. D-Nal-Pac-525 对 S.mutans 杀菌活性的测定 | 第31-32页 |
| 6. SEM 观察 D-Nal-Pac-525 引起的形态学变化 | 第32-33页 |
| 7. TEM 观察 D-Nal-Pac-525 引起的结构变化 | 第33-34页 |
| 8. D-Nal-Pac-525 对变形链球菌生物膜的作用 | 第34-35页 |
| 9. D-Nal-Pac-525 对生物膜相关基因转录水平的影响 | 第35-36页 |
| 讨论 | 第36-40页 |
| 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-43页 |
| 第二章 变形链球菌 MurA(UDP-N-乙酰葡萄糖胺烯醇式丙酮酸转移酶） 的表达、纯化及酶促反应动力学研究 | 第43-74页 |
| 材料和方法 | 第45-57页 |
| 1. 材料 | 第45-47页 |
| ·质粒、菌种 | 第45-46页 |
| ·主要试剂 | 第46页 |
| ·主要仪器 | 第46-47页 |
| 2. 方法 | 第47-57页 |
| ·S.mutans 基因组的制备 | 第47页 |
| ·S.mutans murA 基因的扩增及纯化 | 第47-48页 |
| ·pMD18-Smu murA 重组质粒的构建 | 第48-50页 |
| ·pET16b-Smu murA 表达载体的构建 | 第50-51页 |
| ·S.mutans MurA 蛋白在在大肠杆菌 BL21 (DE3） 中的可溶性表达与鉴定 | 第51-53页 |
| ·S.mutans MurA 酶活性的测定 | 第53-54页 |
| ·S.mutans MurA 酶的酶促动力学研究 | 第54-57页 |
| ·应用磷霉素验证 S.mutans MurA 的功能 49 | 第57页 |
| 结果 | 第57-67页 |
| 1. S.mutans murA 基因的扩增及纯化 | 第57-58页 |
| 2. pMD18-Smu murA 重组质粒的构建 | 第58-59页 |
| 3. S.mutans UA159 murA PCR 产物的 DNA 序列测定 | 第59-60页 |
| 4. p E T 16 b - S m u m u r A 表达载体的构建 | 第60-61页 |
| 5. S.mutans MurA 在大肠杆菌 BL21(DE3） 中的表达、纯化与鉴定 | 第61-63页 |
| 6. S.mutans MurA 酶活性检测方法的建立 | 第63-64页 |
| 7. S.mutans MurA 酶促反应动力学的研究 | 第64-66页 |
| ·M u r A 酶初速度的确定 | 第64页 |
| ·S.mutans MurA 酶最佳温度及 pH 值的确定 | 第64-65页 |
| ·底物对 M u r A 酶的 K m 值 | 第65-66页 |
| 8. 用磷霉素进行 S.mutans MurA 酶功能的验证 | 第66-67页 |
| 讨论 | 第67-70页 |
| 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-74页 |
| 综述 | 第74-90页 |
| 参考文献 | 第83-90页 |
| 附录 | 第90-92页 |
| 攻读学位期间发表文章情况 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
