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棘孢木霉刺激植物响应蛋白基因Epll功能研究

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
1 绪论第9-17页
   ·木霉菌分类地位及特点第9页
   ·木霉菌生物防治机制第9-14页
     ·木霉与病原菌的互作关系第9-12页
     ·植物根际木霉菌的作用第12-14页
     ·内生菌第14页
   ·木霉刺激植物响应蛋白Epl1基因功能第14-15页
   ·本研究的目的意义第15-17页
2 棘孢木霉刺激植物响应蛋白Epl1基因的克隆及序列分析第17-33页
   ·实验材料第17页
     ·供试菌株第17页
     ·供试试剂第17页
     ·仪器设备第17页
   ·研究方法第17-21页
     ·棘孢木霉DNA提取第17-18页
     ·棘孢木霉菌丝RNA提取及反转录cDNA第18-19页
     ·棘孢木霉刺激植物响应蛋白Epl1基因全长DNA和cDNA的获得第19页
     ·核苷酸测序第19-20页
     ·Epl1基因生物信息学分析第20-21页
   ·结果与分析第21-30页
     ·棘孢木霉基因组DNA第21页
     ·棘孢木霉菌丝体RNA及其反转录第21页
     ·棘孢木霉刺激植物响应蛋白Epl1基因cDNA及DNA序列的扩增第21-22页
     ·棘孢木霉刺激植物响应蛋白Epl1基因序列分析第22-24页
     ·棘孢木霉刺激植物响应蛋白Epl1基因生物信息学分析第24-30页
   ·关于棘孢木霉刺激植物响应蛋白Epl1基因生物信息学分析的讨论第30-31页
     ·基因组搜索的简便方法第30-31页
     ·有关刺激植物响应蛋白Epl1的家族第31页
   ·本章小结第31-33页
3 棘孢木霉刺激植物响应蛋白Epl1基因表达特性第33-46页
   ·实验材料第33页
     ·供试树种与菌株第33页
     ·培养基第33页
     ·实验仪器第33页
   ·研究方法第33-37页
     ·引物设计第34页
     ·MM(0.5%葡萄糖)培养基诱导第34-35页
     ·C饥饿培养基诱导第35-36页
     ·N饥饿培养基诱导第36页
     ·山新杨根粉诱导第36页
     ·山新杨茎粉诱导第36页
     ·山新杨叶粉诱导第36页
     ·杨树叶枯病菌细胞壁诱导第36-37页
     ·杨树叶枯病菌发酵液诱导第37页
   ·结果与分析第37-42页
     ·MM(0.5%葡萄糖)诱导下棘孢木霉Epl1的表达第37页
     ·C饥饿诱导下棘孢木霉Epl1的表达第37-38页
     ·N饥饿诱导下棘孢木霉Epl1的表达第38页
     ·山新杨根粉诱导下棘孢木霉Epl1的表达第38-39页
     ·山新杨茎粉诱导下棘孢木霉Epl1的表达第39页
     ·山新杨叶粉诱导下棘孢木霉Epl1的表达第39-40页
     ·杨树叶枯病菌细胞壁诱导下棘孢木霉Epl1的表达第40页
     ·杨树叶枯病菌发酵液诱导下棘孢木霉Epl1的表达第40-41页
     ·8种不同培养条件Epl1差异表达结果比较第41-42页
   ·关于Epl1基因表达特性的讨论第42-44页
     ·杨树叶枯病菌培养时间的确定第42-43页
     ·杨树叶枯病菌细胞壁制备第43页
     ·诱导诱导前培养时间的确定第43-44页
     ·取样时间的确定第44页
     ·棘孢木霉与植物互作方式的选择第44页
   ·本章小结第44-46页
4 棘孢木霉刺激植物响应蛋白Epl1基因的原核表达第46-56页
   ·实验材料第46页
     ·供试试剂第46页
     ·供试菌株第46页
     ·实验仪器第46页
   ·研究方法第46-51页
     ·原核表达载体的选择第46-47页
     ·pGEX-4T-2质粒的提取第47-48页
     ·棘孢木霉刺激植物响应蛋白Epl1基因的扩增第48页
     ·重组载体pGEX-Epl1构建第48-49页
     ·重组载体pGEX-Epl1检测第49页
     ·重组载体pGEX-Epl1的诱导表达第49-51页
   ·研究结果第51-54页
     ·pGEX-4T-2质粒提取第51页
     ·棘孢木霉刺激植物响应蛋白Epl1基因扩增第51-52页
     ·重组载体pGEX-Epl1的构建第52页
     ·重组载体检测第52页
     ·重组菌株BL21-TasEpl1的诱导表达第52-54页
   ·讨论第54-55页
     ·原核表达过程中出现的问题及解决方法第54-55页
     ·融合蛋白表达引物设计应注意的问题第55页
   ·本章小结第55-56页
结论第56-58页
参考文献第58-66页
攻读学位期间发表的学术论文第66-67页
致谢第67-68页

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