| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-24页 |
| ·蛋白质翻译后修饰 | 第12-19页 |
| ·磷酸化修饰 | 第13-14页 |
| ·蛋白激酶活性检测和筛选其抑制剂 | 第14-19页 |
| ·新型生物纳米材料的性质及其在传感中的应用 | 第19-22页 |
| ·金纳米粒子（AuNPs） | 第19-21页 |
| ·石墨烯 | 第21-22页 |
| ·本文构思 | 第22-24页 |
| 第2章 基于磷酸化抑制 CPY 水解的 AuNPs 比色分析方法用于检测蛋白激酶活性 | 第24-37页 |
| ·前言 | 第24-25页 |
| ·实验部分 | 第25-27页 |
| ·材料和仪器设备 | 第25-26页 |
| ·合成 AuNPs | 第26页 |
| ·多肽诱导 AuNPs 聚集 | 第26页 |
| ·羧肽酶（CPY）水解底物多肽 S-pep | 第26页 |
| ·检测 PKA 活性和抑制作用 | 第26页 |
| ·检测 MCF-7 细胞裂解液中 PKA 活性 | 第26-27页 |
| ·结果和讨论 | 第27-36页 |
| ·比色激酶活性分析方法的检测原理 | 第27-28页 |
| ·底物多肽（S-pep）诱导 AuNPs 聚集的条件优化 | 第28-30页 |
| ·优化 CPY 消化 S-pep 的条件 | 第30-31页 |
| ·检测 PKA 活性和抑制作用 | 第31-35页 |
| ·检测细胞裂解液中 PKA 活性 | 第35-36页 |
| ·结论 | 第36-37页 |
| 第3章 多肽适配体（IP_(20)）和氧化石墨烯（GO）相互作用应用于蛋白激酶A 的监测 | 第37-51页 |
| ·前言 | 第37-38页 |
| ·实验部分 | 第38-40页 |
| ·材料和仪器设备 | 第38-39页 |
| ·研究 GO 对 FITC-IP_(20)的荧光淬灭 | 第39页 |
| ·特定识别和检测 PKA | 第39页 |
| ·MCF-7 细胞培养和裂解液的制备 | 第39-40页 |
| ·用荧光 PKA 活性分析试剂盒来检测激酶活性 | 第40页 |
| ·结果与讨论 | 第40-49页 |
| ·检测机制 | 第40-41页 |
| ·研究 GO 对 FITC-IP_(20)的荧光淬灭 | 第41-43页 |
| ·基于 GO-适配体多肽体系监测 PKA | 第43-44页 |
| ·各向异性检测 PKA | 第44-45页 |
| ·特异识别和检测 PKA | 第45-48页 |
| ·细胞裂解液中的蛋白激酶检测 | 第48-49页 |
| ·结论 | 第49-51页 |
| 第4章 基于磷酸化多肽抑制羧肽酶消化的氧化石墨烯(GO)/多肽纳米复合荧光探针来检测蛋白激酶活性 | 第51-62页 |
| ·前言 | 第51-52页 |
| ·实验部分 | 第52-54页 |
| ·试剂和仪器设备 | 第52-53页 |
| ·GO 对 FITC 分子和 FITC-多肽的荧光淬灭 | 第53页 |
| ·CPY 消化多肽条件优化 | 第53页 |
| ·检测蛋白激酶活性和抑制 | 第53页 |
| ·荧光各向异性（FA）的数据分析 | 第53-54页 |
| ·MCF-7 细胞培养和裂解液的制备 | 第54页 |
| ·结果与讨论 | 第54-60页 |
| ·GO-多肽纳米生物传感分析方法检测激酶活性的检测机理 | 第54-55页 |
| ·多肽结合 GO 和 CPY 消化多肽的条件优化 | 第55页 |
| ·GO/多肽传感器在 PKA 激酶检测中的应用 | 第55-57页 |
| ·荧光各向异性检测激酶活性 | 第57页 |
| ·基于磷酸化阻碍 CPY 消化的分析方法筛选抑制剂 | 第57-58页 |
| ·癌细胞裂解液中蛋白激酶活性的检测 | 第58-59页 |
| ·基于 GO 激酶分析方法同时检测 CKII 和 PKA 活性 | 第59-60页 |
| ·结论 | 第60-62页 |
| 结论 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-74页 |
| 附录 A 攻读学位期间所发表的学术论文 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
