| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-40页 |
| 1 真菌中胞质分裂的研究进展 | 第13-27页 |
| ·真核生物胞质分裂的一般特点 | 第13-14页 |
| ·真菌胞质分裂的一般特点 | 第14-17页 |
| ·概述 | 第14页 |
| ·胞质分裂信号通路 | 第14页 |
| ·Septin环 | 第14-15页 |
| ·Actin环 | 第15-16页 |
| ·细胞壁物质 | 第16-17页 |
| ·芽殖酵母的胞质分裂机制 | 第17-19页 |
| ·裂殖酵母的胞质分裂机制 | 第19-23页 |
| ·丝状真菌构巢曲霉胞质分裂研究进展 | 第23-27页 |
| ·模式生物构巢曲霉及其胞质分裂信号通路 | 第23-24页 |
| ·SEPH激酶的结构和功能 | 第24-25页 |
| ·胞质分裂信号通路的反向调节研究 | 第25-26页 |
| ·胞质分裂研究前景 | 第26-27页 |
| 2 丝状真菌无性产孢的研究进展 | 第27-30页 |
| ·概述 | 第27-30页 |
| ·无性产孢和胞质分裂的关系 | 第30页 |
| 3 真菌极性生长的研究进展 | 第30-33页 |
| ·概述 | 第30-31页 |
| ·极性生长的建立和维持 | 第31-33页 |
| ·极性生长和胞质分裂的关系 | 第33页 |
| 4 模式生物构巢曲霉的特点 | 第33-36页 |
| 5 研究内容、思路和方法 | 第36-40页 |
| ·研究内容 | 第36-37页 |
| ·研究思路 | 第37-38页 |
| ·研究方法 | 第38-40页 |
| ·正向筛选出sepH的反向调节子Anprs1 | 第38页 |
| ·反向验证Anprs1是sepH的反向调节子 | 第38-39页 |
| ·构巢曲霉中PP2A参与形态建成 | 第39-40页 |
| 第2章 sepH反向调节子Anprs1的筛选和初步验证 | 第40-55页 |
| 第1节 sepH反向调节子Anprs1的筛选 | 第42-49页 |
| 1 材料与方法 | 第42-44页 |
| ·菌种及培养条件 | 第42-43页 |
| ·试剂与仪器 | 第43页 |
| ·紫外诱变 | 第43页 |
| ·遗传杂交 | 第43-44页 |
| ·Actin免疫荧光染色 | 第44页 |
| ·显微观察 | 第44页 |
| 2 实验结果 | 第44-48页 |
| 3 讨论 | 第48-49页 |
| 第2节 sepH反向调节子Anprs1的初步验证 | 第49-55页 |
| 1 材料与方法 | 第49-52页 |
| ·菌种及培养条件 | 第49-50页 |
| ·试剂与仪器 | 第50页 |
| ·构巢曲霉基因组DNA的提取 | 第50-51页 |
| ·引物设计 | 第51页 |
| ·PCR扩增Anprs1全长和pAMA1-Anprs1质粒的构建 | 第51页 |
| ·A. nidulans原生质体的制备及转化 | 第51-52页 |
| ·转化子的筛选 | 第52页 |
| 2 实验结果 | 第52-54页 |
| ·PCR扩增结果 | 第52-53页 |
| ·重组载体酶切验证 | 第53页 |
| ·转化子表型鉴定 | 第53-54页 |
| 3 讨论 | 第54-55页 |
| 第3章 利用乙醇脱氢酶启动子alcA(p)替换Anprs1启动子和绿色荧光蛋白GFP标记Anprs1 | 第55-68页 |
| 第1节 alcA(p)：：GFP：：Anprs1同源整合菌株ZGA01构建 | 第56-62页 |
| 1 材料与方法 | 第56-58页 |
| ·菌种及培养条件 | 第56页 |
| ·试剂与仪器 | 第56-57页 |
| ·引物设计 | 第57页 |
| ·pLB-Anprs1 5’载体的构建 | 第57页 |
| ·转化子的初步筛选 | 第57页 |
| ·重组子的进一步鉴定 | 第57-58页 |
| 2 实验结果 | 第58-61页 |
| ·PCR扩增结果 | 第58-59页 |
| ·重组载体的酶切鉴定 | 第59页 |
| ·转化子的初步表型鉴定 | 第59-60页 |
| ·重组子的进一步PCR鉴定 | 第60-61页 |
| 3 讨论 | 第61-62页 |
| 第2节 Anprs1在构巢曲霉胞质分裂过程中的生物学功能 | 第62-68页 |
| 1 材料与方法 | 第63-65页 |
| ·菌种及培养条件 | 第63页 |
| ·试剂与仪器 | 第63-64页 |
| ·透射电子显微镜(TEM)样品制备 | 第64-65页 |
| 2 实验结果 | 第65-67页 |
| ·ZGAO1胞质分裂异常表型和Sin110比较 | 第65-66页 |
| ·GFP-AnPRS1的荧光定位 | 第66页 |
| ·TEM电镜观察隔膜结果 | 第66-67页 |
| 3 讨论 | 第67-68页 |
| 第4章 构巢曲霉Anprs1敲除菌株的构建 | 第68-82页 |
| 第1节 Anprs1完全敲除菌株ZGA02的构建 | 第68-77页 |
| 1 材料与方法 | 第68-73页 |
| ·菌种、质粒及培养条件 | 第68-69页 |
| ·试剂与仪器 | 第69页 |
| ·引物设计 | 第69-71页 |
| ·Fusion PCR | 第71-72页 |
| ·构巢曲霉原生质体的制备及转化 | 第72页 |
| ·转化子的初步筛选 | 第72页 |
| ·转化子的进一步PCR诊断 | 第72-73页 |
| 2 实验结果 | 第73-76页 |
| ·Fusion PCR各组成片段的扩增 | 第73-74页 |
| ·Fusion PCR全长片段的扩增 | 第74页 |
| ·转化子的初步鉴定 | 第74-75页 |
| ·转化子的诊断PCR | 第75页 |
| ·ZGA02胞质分裂形态鉴定 | 第75-76页 |
| 3 讨论 | 第76-77页 |
| 第2节 Anprs1 C端敲除菌株ZGA03的构建 | 第77-82页 |
| 1 材料与方法 | 第77-79页 |
| ·菌种、质粒及培养条件 | 第77页 |
| ·引物设计 | 第77-78页 |
| ·转化子的PCR诊断 | 第78-79页 |
| 2 实验结果 | 第79-80页 |
| ·Fusion PCR全长片段的扩增 | 第79页 |
| ·转化子的诊断PCR | 第79-80页 |
| ·ZGA03胞质分裂形态鉴定 | 第80页 |
| 3 讨论 | 第80-82页 |
| 第5章 Anprs家族在构巢曲霉胞质分裂过程中的作用 | 第82-91页 |
| 1 材料与方法 | 第82-85页 |
| ·菌种及培养条件 | 第82页 |
| ·试剂与仪器 | 第82页 |
| ·Sin110菌株Anprs基因测序 | 第82-83页 |
| ·AnPRS酶活测定 | 第83页 |
| ·Real-time qPCR实验方法 | 第83-85页 |
| 2 实验结果 | 第85-89页 |
| ·Anprs1△C/sepH双缺菌株ZGA04的表型鉴定 | 第85-87页 |
| ·Sin110菌株AnPRS酶活测定结果 | 第87-88页 |
| ·Sin110菌株Anprs基因家族转录水平变化 | 第88页 |
| ·Anprs基因家族能够弥补Sin110的病态表型 | 第88-89页 |
| 3 讨论 | 第89-91页 |
| 第6章 PP2A在构巢曲霉胞质分裂过程中的生物学功能 | 第91-106页 |
| 第1节 PP2A参与构巢曲霉的形态建成 | 第93-101页 |
| 1 材料与方法 | 第93-94页 |
| 2 实验结果 | 第94-100页 |
| ·构巢曲霉PP2A两个调节亚基的生物信息学分析 | 第94-96页 |
| ·parA和pabA影响无性产孢和有性生殖 | 第96-99页 |
| ·parA和pabA分别与sepH和sepA在调节胞质分裂中的关系 | 第99-100页 |
| 3 讨论 | 第100-101页 |
| 第2节 PP2A在细胞中的定位 | 第101-106页 |
| 1 材料与方法 | 第101页 |
| 2 实验结果 | 第101-104页 |
| ·alcA(p)：：GFP：：parA和alcA(p)：：GFP：：pabA菌株的构建 | 第101-102页 |
| ·GFP-ParA和GFP-PabA分别定位在隔膜和细胞核上 | 第102-104页 |
| 3 讨论 | 第104-106页 |
| 第7章 结论 | 第106-108页 |
| 附录 | 第108-109页 |
| 参考文献 | 第109-120页 |
| 致谢 | 第120页 |
